三萜皂苷类成分分析.ppt

1、1,第三节 三萜皂苷类成分分析,triterpenoid saponins,2,人参 调节机体代谢、增加免疫功能 桔梗 祛痰 甘草 降胆固醇、抗动脉硬化 酸枣仁 镇静、催眠、降压,作用 具多方面的生物活性,一、概述,多数能与胆甾醇结合生成复合物沉淀而产生溶血作用,3,三萜 含30个碳原子的萜类化合物 多以皂苷形式存在,皂苷 水溶液振摇能产生持久性肥 皂样泡沫（甾体、三萜）,4,二、结构特征和理化性质,（一）结构特征,5,中性皂苷,四环三萜皂苷元,6,人参皂苷Re,7,人参皂苷Rg1,8,黄芪甲苷,9,五环三萜皂苷元,酸性皂苷,10,齐墩果酸,11,熊果酸,12,甘草酸,13,分析方法特点,1.

2、 多无共轭体系，无明显UV特征,2. 在硫酸作用下，可发生脱水、脱 羧、氧化等变化，产生颜色，可 用于鉴别和含量测定,3. 以TLC、HPLC检测为主,14,（二）理化性质,1. 物理性质,（2）皂苷多为无定形粉末， 有吸湿性，可降低水溶 液表面张力,（1）皂苷元多为结晶,15,2. 溶解性,三萜皂苷元,16,3. 与金属盐类的反应,与Ba2+、Cu2+、Pb2+、Al3+ ,17,原理 含不饱和双键或羟（酮）基的三萜化合物可与强酸等作用，使苷元发生脱水、脱羧、氧化、缩合、分子重排等反应，因生成具有多烯结构的缩合物而改变颜色,4. 显色反应,18,显色剂 多为氧化剂或强酸试剂,常用硫酸或含硫酸

3、混合溶液,特点 灵敏度低、专属性差 久置后褪色 仅用于药味少的制剂分析,19,（1）醋酐-硫酸反应 （Liebermann-Burchard反应）,20,例 甘草浸膏 【鉴别】（1）取本品细粉约12mg，置 白瓷板上，加硫酸溶液（45）数滴，即显 黄色，渐变为橙黄色至橙红色。（甘草酸）,21,（2）五氯化锑反应（Kahlenberg反应）,22,（3）三氯醋酸反应 （Rosen-Heimer反应）,23,（4）冰醋酸-乙酰氯反应 （Tschugaeff反应）,24,（5）氯仿硫酸反应（Salkowski反应）,25,例 养心定悸膏（煎膏剂） 【鉴别】（2）取本品10mL，加水5mL，摇 匀，加

4、正丁醇10mL，振摇，分取正丁醇液，置 水浴上蒸干，残渣加氯仿1mL使溶解，移至试 管中，沿管壁滴加硫酸0.5mL，两液接界处显 红色环。（甘草酸）,26,三、定性鉴别,1. 泡沫反应,常用于药材鉴别,原理 皂苷具有降低水溶液表 面张力的作用,27,例 暑症片 【鉴别】（2）取本品2片，研细，加水10 mL，置水浴上加热5分钟，滤过，滤液置具 塞试管中，密塞，强力振摇1分钟，即产生持久性蜂窝状泡沫，在15分钟内不得明显减少。（桔梗皂苷、甘草酸）桔梗、甘草,28,区分三萜皂苷和甾体皂苷,29,2. 显色反应,30,3. 薄层色谱法,皂苷类成分结构复杂，又无明显UV特征，故TLC法是常用的分析方法

5、,31,32,33,流动相 用于皂苷元时极性要小些 氯仿-丙酮（19:1）,用于皂苷时极性要大些 水饱和的正丁醇,34,显色剂（氧化性或强酸性试剂）,硫酸-乙醇（10%、50%） 碘蒸气,35,例 生脉饮 ChP 【鉴别】,展开剂 环己烷-丙酮（2:1）,显色剂 硫酸-甲醇（1:1）,对照品 人参二醇、人参三醇,36,a,b,37,四、含量测定,提取溶剂,*皂苷元极性弱，易溶于有机溶剂,*皂苷极性较大，易溶于亲水性 有机溶剂（甲醇、乙醇、丁醇）,萃取溶剂 正丁醇（水饱和）,38,（一）重量法,* 待测组分的含量,正丁醇浸出物 原料药的质量控制,39,例 甘草浸膏（甘草酸） ChP 【含量测定】

6、 取本品约6g，精密称定，加水50mL溶解后，移至100mL量瓶中，用乙醇稀释至刻度，混匀，静置12小时，精密吸取上清 液25mL置烧杯中，加氨试液3滴，置水浴上蒸 发至稠膏状，加水30mL使溶解，缓缓加入盐酸溶液（310）5mL，在冰水中静置约30分钟，滤过，沉淀用冰水洗涤4次，每次5mL，弃去洗液及滤液，沉淀置滤纸上放置约23小时，,40,使水分自然挥散，再用预先加热至6070的乙醇10mL使沉淀溶解，滤过，滤器用热乙醇洗涤至洗液无色，合并乙醇液，置已干燥至恒重的烧杯中，在水浴上蒸干，并在105干燥3小时，精密称定，计算供试品中甘草酸的含量，即得。,本品含甘草酸（C42H62O16）不得少

7、于20.0%,41,（二）比色法,主要是通过显色剂与总皂 苷或总皂苷元反应显色，在可 见光区测定，灵敏度高，但专 属性差,42,显色剂 多为氧化性或强酸试剂,香草醛-硫酸 高氯酸 硫酸（或硫酸-乙醇溶液） 亚甲蓝,43,例 薯蓣皂苷元与硫酸-甲醇（4:1）反应后可 在405nm波长处测定,例 甘草酸与亚甲蓝反应后可在640nm波长处 测定,44,（三）薄层色谱法,方法 薄层色谱-比色法 薄层扫描法（TLCS）,45,例 复方扶芳藤合剂 ChP,提取 水饱和的正丁醇,纯化 D101型大孔吸附树脂柱,对照品 黄芪甲苷（外标两点法）,薄层板 硅胶G（含0.1%CMC-Na）,展开剂 正丁醇-醋酸乙酯

8、-水(4:1:5)上层 -甲醇（10:1）,显色剂 10%硫酸乙醇溶液（100加热）,测定波长 S=530nm R=700nm,46,（四）HPLC法,*药物有UV吸收,紫外检测器,柴胡皂苷元A,甘草次酸,47,*药物弱UV特征,溶剂（流动相）常有干扰,检测末端吸收,48,15 A. 三萜皂苷 B. 甾体皂苷 C. A和B均可 D. A和B均不可 1. 泡沫反应 2. 与硫酸作用产生颜色 3. 遇三氯醋酸100时斑点由红变紫 4. 酸、碱管泡沫强度相同 5. 三氯化铁反应中显紫堇色,C,C,A,A,D,49,6. 下列中药水溶液能产生泡沫反应是 A. 金银花 B. 黄芩 C. 甘草 D. 乌头 E. 麻黄,50,7. 皂苷类药物的特点 A.