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文档简介
1、河北省唐山市开滦第二中学高中生物 1.2.2 基因工程的基本操作(第2课时)导学案 新人教版选修3班级: 姓名: 小组: 【学习目标】1基因表达载体的构建2将目的基因导入受体细胞的方法 【重点难点】重点:1基因表达载体的构建2将目的基因导入受体细胞的方法难点:将目的基因导入受体细胞的方法【自主学习】一、基因表达载体的构建(1)基因工程的核心 (2)构建表达载体的目的:使目的基因在受体细胞中 ,并且可以遗传给 。(3)表达载体必须有 、 、 、 。(4)启动子位于基因的 ,它是 识别和结合的部位,驱动基因转录得到 。终止子位于基因的 ,也是一段有特殊结构的 。启动子与终止子的结构单位是 (5)标
2、记基因的作用是 。 (6)构建过程的示意图:(7)由于受体细胞不同,将基因导入受体细胞的方法也不同,所以基因表达载体的构建不是千篇一律的。二、将目的基因导入受体细胞阅读课本1213页, (一)转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内 的过程。(二)将目的基因导入植物细胞(1)受体细胞: (2)农杆菌转化法(采用最多的方法)农杆菌特点:易感染 植物和裸子植物,对_ _ 植物没有感染力;Ti质粒的 可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的 上。转化过程:构建的表达载体转入 导入植物细胞 目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(3)基因枪法基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较
3、高。(4)花粉管通道法 我国独创的一种方法(三)将目的基因导入动物细胞(1)方法: (2)受体细胞: (3)操作程序:目的基因表达载体 取卵(受精卵) 显微注射注射了目的基因的受精卵移植到 性动物的 内发育新性状动物。(四)将目的基因导入微生物细胞(1)原核生物特点: 、多为 、 相对较少等。(2)大肠杆菌最常用的转化方法是: 处理细胞,成为 细胞表达载体与感受态细胞混合 细胞吸收DNA分子。【问题生成】【师生互动,问题探讨】1.启动子与起始密码子有何区别?2.终止子与终止密码子有何区别?3.基因表达载体的构建需要哪些工具酶,如何将目的基因与运载体连接起来形成重组DNA分子(以质粒为运载体)?
4、4.培育转基因动物时,受体细胞能否采用动物体细胞,为什么采用受精卵?5将目的基因与载体混合并用DNA连接酶处理后,会出现几种结果,怎样从中筛选处所需要重组质粒?【课后小结与反思】【自我检测】1.下列关于基因表达载体构建的相关叙述,不正确的是()A需要限制酶和DNA连接酶B必须在细胞内进行C抗生素抗性基因可作为标记基因D启动子位于基因的首端2. 基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞,原因是( )A结构简单,操作方便B繁殖速度快C遗传物质含量少、简单D性状稳定,变异少3. 正确的操作顺序是 ( )使目的基因与运载体相结合将目的基因导入受体细胞目的基因的获取检测目的基因的表达是否符
5、合特定性状要求;提取目的基因。A B C D4. 科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如图,据图回答:(1)人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组,原因是 _(2)过程表示的是采取 的方法来获取目的基因。其过程可表示为_。(3)图中(3)过程用人工方法,使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,主要是借鉴细菌或病毒_ 细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用 处理,使细胞处于能_的生理状态,这种细胞称为_细胞,再将表达载体溶于缓冲液中与_混合,在一定的温度下完成转化。(4)检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒,可采用的方法是 ,理由是 。 (
6、5)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌,放在含有四环素的培养基上培养,发生的现象是 ,原因是: 。5.科学家通过基因工程方法,将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内,并成功实现了表达,从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株抗虫棉。其过程大致如图所示:(1)进行基因工程操作的工具酶有 ,将苏云金芽孢杆菌的Bt基因导入棉花细胞内,使棉花植株产生抗虫性状,引起这种新性状产生依赖于 。细菌的基因之所以能在棉花细胞内表达,产生抗性,其原因是_。(2) 基因工程的操作程序主要包括的四个步骤是_,其核心步骤是_,其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以 给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。(3)上述过程中,将目的基因导入棉花细胞内使用的方法是_,这种导入方法较经济、有效。(4)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒,其上有T-DNA,把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA的_特点。5.如图将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图
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