高中生物《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》学案1 新人教版选修1

1、高二年级导学案 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数学科 生物 编号 006 编制 审核 批准 时间 2009-2-23 【学习目标】1.研究培养基对微生物的选择作用2.进行微生物数量的测定3.分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性【重点难点】课题重点：对土样的选取和选择培养基的配制课题难点: 对分解尿素的细菌的计数【知识链接】1培养基一般都含有 、 、 、 四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对 、 以及 的要求。2.培养基的分类：按照物理性质可以分为 、 、 ；按照化学性质分为 和 ；按照用途分为 和 。3.尿素可以为农作物提供 肥，但是只有被 分解成 之后，才能被植物吸收利用。4

2、以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是： ； 。5PCR（ ）是一种在体外将 。此项技术的自动化，但是在合成的过程中需要在93的条件下，所以要求使用耐高温的 【导学过程】（一）筛选菌株 1.原理: 人为提供有利于 生长的条件（包括 等），同时抑制或阻止其他微生物生长。2.方法：选择培养基定义：在微生物学中，将允许 的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。配制的的依据：在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，加入 可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到 。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。培养基中的营养成分的改变也可达到分离

3、微生物的目的。如培养基中缺乏 源时，可以分离固氮微生物。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。改变微生物的培养条件， 也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在 环境中培养只能得到耐高温的微生物。讨论1：怎样找耐高温的酶呢？讨论2.如何找到能够分解石油的细菌？(二)统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有 和 。（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置 个平板，选择菌落数在 的平板进行计数，并取 。统计

4、的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。讨论3.完成课本P22页思考题讨论4. 完成课本P22页旁栏思考题？（三）设置对照设置对照的主要目的 对照试验的定义：讨论5.完成课本P23页A同学的两个对照试验？（四）实验设计实验设计包括 ，所需 、 、用具和药品，具体的 以及时间安排等的综合考虑和安排。（1）土壤取样从富含有机物、潮湿、pH 的土壤中取样。铲去 ，在距地表约 cm的土壤层取样。（2）制备培养基准备牛肉膏蛋白胨培养基和用 作为氮源的选择培养基。牛肉膏蛋白胨培养基作为 ，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。（3）微生物的培养与观察将土样以1、101

5、、102依次等比稀释至107稀释度，按照浓度从低到高的顺序涂布平板， （是否）更换移液管。对于不同的微生物要选择不同的稀释浓度，测定细菌一般选择 ，测定真菌一般选择 ，测定放线菌一般选择 。注明培养基种类、培养日期以及平板培养样品的稀释度。将涂布好的培养皿放在 温度下培养。随着培养时间的延长，会有不同的菌产生。比较牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。讨论6.为什么分离不同的微生物需要不同的稀释浓度？（4）细菌的计数当菌落数目稳定时，进行计数，防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。求出平均值，根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。（五）操作提示1.本实验中要

6、注意那些无菌操作？2. 在进行多组实验过程中，应注意做好标记，其目的是什么？应标记哪些内容？怎样操作更有利于实验的进行？3.如何对分离的菌种作进一步的鉴定？【达标检测】1自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是 ( )A、碳源 B、氮源 C、无机盐 D、生长因子2发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。消灭杂菌，获得纯种的方法不包括（ ）A根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基B根据微生物缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子C根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸D根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗菌素3.利用生物工程生产

7、啤酒、味精、胰岛素、酸奶的常用菌种分别是（ ）A酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌 B酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌 C酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌 D黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌4下列操作不属于微生物的分离步骤的是( )A稀释 B划线或涂布 C接斜面 D培养5影响微生物生长的主要环境因素是A阳光、温度、水分B温度、水分、PH C水分、PH、氧D温度、PH、氧6.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（ ） A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试

8、剂7下面是发现和研究青霉素的过程：问题：在培养细菌的培养基中，发现青霉菌，在其周围没有细菌生长。没有青霉菌的培养基内布满了细菌。假设：实验：把青霉菌放入培养液内培养，一段时间后除去青霉菌，并用这种培养液培养细菌，观察细菌的生长情况。结果：这种培养液阻止了细菌的生长和繁殖。结论：青霉菌可产生一种阻止细菌生长繁殖的物质。请回答：该实验的假设是 。以上实验还不足以论证以上结论，请在以上实验的基础上，补充相应的实验方法。8.某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起。该同学设计下面的实验，分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。实验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。材料用具：(略)主要步骤：制备两种培养基，将两种培养基各自分成两份，依次标号A、a和B、b。_，并在25摄氏度条件培养_天。分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培养基中，适宜条件下培养34天。请回答：本实验中，配制的分离用的培养基成分特点：A、a是_培养基、B、b是_培养基，根据上述原理配制的培