呼吸道病原体检测在临床中的应用参考幻灯片.ppt

1、呼吸道病原体检测在临床中的应用,1,一 呼吸道相关疾病 我国呼吸系统感染现状 常见呼吸系统病原体及感染情况 呼吸道感染病原体的实验室检测,一 呼吸道感染概况和现状 二 呼吸道病原体实验室检测方法 三 九项呼吸道病原体联合检测的临床应用,2,呼吸道感染,呼吸道感染（Respiratory Tract infections）是最常见的感染性疾病之一 上呼吸道感染 （Upper Respiratory Infection） 下呼吸道感染 （Lower Respiratory Infection）,3,呼吸道感染常见病原体,4,呼吸道感染概况,上呼吸道感染 鼻腔、咽、喉部 - 常见病因病毒，少数为细菌

2、； 下呼吸道感染(最常见的感染性疾患) 气管、支气管、肺部-由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起。 以社区获得性肺炎(CAP)多见,5,呼吸道感染概况,一、典型“致病菌” 细菌：肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌等 症状：典型，咳嗽、脓性痰、胸膜炎性胸痛，一般都伴有发热，或有脓血痰 病史：悠久，古代的“瘟疫”很多细菌性肺炎 重症致死性肺炎很多是细菌性 上世纪50年代以前的肺炎90%以上为细菌性肺炎，现在报道约在40%左右 肺炎链球菌大约占在60%,6,呼吸道病原体感染概况,二、非典型病原体 进展的、开放的概念，始用于20世纪30年代末，60年代首次发现了非典型的病

3、原体肺炎支原体 泛指各种能引起肺炎的、临床表现与典型肺炎不同的各种病原体（广义） 临床症状不典型，差异大 在CAP中感染的比例逐年增加，据报道大约占40-60%，逐渐引起各国医疗工作者注意,7,（一）最常见的非典型病原体,肺炎支原体、肺炎衣原体、军团菌等（狭义的非典型病原体） 感染比例高，超过“非典”50% 临床症状：干咳为主，少痰或无痰，肺外症状较常见明显，尤其军团菌感染，表现相对较重，多脏器受累明显。可有高热、耳鸣、相对缓脉、血尿、腹痛、腹泻、肝酶升高、电解质紊乱、精神神经症状等 -内酰胺类 （青霉素类、头孢类）、氨基糖苷类（链霉素）等药物无效 治疗：呼吸喹诺酮类、大环内酯类,8,（二）病

4、毒类,流感病毒、副流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒、禽流感病毒等 季节性或区域性流行 临床症状：干咳为主，少痰或无痰、呼吸困难，低氧血症 治疗：主要依靠对症支持治疗。早期抗病毒治疗可能效果较好。预后取决于病毒类型和宿主对病毒的反应,9,（三）真菌性肺炎,念珠菌，曲菌，新型隐球菌，放线菌，组织胞浆菌，毛霉菌属等 除组织胞浆菌为原发吸入性感染外，多数为条件致病 多发生在免疫低下患者和长时间接受广谱抗生素治疗的患者,白色念珠菌肺炎,10,各病原体在CAP中感染率,数据来源：,各国社区获得性肺炎指南对非典型病原体的重视情况,肺炎的诊断与治疗研究进展,重视非典型病原体在CAP致病中的作用,要重

5、视非典型病原体在呼吸道疾病中的致病作用等,11,重视多种病原体联合检测,12,2016年中国居民主要疾病死亡率（1/10万）,前四位死因构成比： 农村：77.43% 城市：80.19%,13,2006-2012年感染性疾病病死率（城市）,2000年以后相对以前有明显降低，但2010年后有小幅反弹趋势,14,呼吸道病原体流行特点,公园,非典型病原体的感染率逐年提高，占CAP的40-60%,混合感染常见，细菌合并非典型病原体感染最常见，重视多种病原体联合检测,最常见的感染性疾病,15,如何选择诊断方法？,依据是什么？,临床医师如何应对呼吸道感染,16,国内外呼吸道感染指南介绍,美国感染病学会及胸科

6、学会 欧洲呼吸学会、欧洲临床微生物学与感染性疾病学会 英国胸科学会、英国国家优化卫生与保健研究所 中华医学会呼吸病学分会,17,抗感染,18,2015年全国细菌耐药监测报告,不同地区甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌分离情况,19,2015年全国细菌耐药监测报告,甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率,20,2015年全国细菌耐药监测报告,肺炎链球菌红霉素耐药率,21,2015年全国细菌耐药监测报告,肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素耐药率,22,明确感染病原体，针对性使用抗生素,23,呼吸道病原体的实验室检测方法,金标准：培养 分子生物学检测：核酸检测、PCR； 病原检测:直接免疫荧光法检测病

7、原； 血清学检测:ELISA、IFA等；,24,从标本类型看抗原检测,优势 WHO推荐，直接检测，无窗口期 鼻咽拭子，无创采样 局限性 采样要求高，不规范采样容易导致假阴性 检测上呼吸道病原体,25,抗原与抗体检测采样标准化及难易程度对比图,抗原,抗体,从样本角度讲，血清是最为理想的检测标本类型。,26,检测IgG抗体还是IgM抗体？,IgM IgG,27,九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测,28,嗜肺军团菌,广泛分布于天然淡水域或人工水域，是一种兼性细胞内致病菌，有鞭毛、革兰氏阴性短小球杆菌。 易感人群为老年人、吸烟者、慢性肺部患者、免疫功能低下、癌症病人、肾透析病人和艾滋病人。 症状类似于

8、肺炎，表现为发冷、不适、肌痛、头晕、头痛，伴有烦躁、呼吸困难、胸痛。以上患者体温急剧上升，咳嗽、粘痰，偶尔出现腹泻呕吐胃肠道紊乱，重症患者可发生肝功能变化及肾衰竭。 欧洲和北美军团菌肺炎占社区获得性肺炎前4位； 我国各省市每年均有病例报告。 治疗：阿奇霉素 红霉素,29,30,肺炎支原体,介于病毒与细菌之间一种没有细胞壁的病原体； 40%以上的非典型肺炎病例是由肺炎支原体引起的； 冬季较多，地区性流行； IgM抗体检测，PCR是目前公认的检测标准； 治疗：大环内酯类首选、喹诺酮类药物。,31,Q热立克次体,介于最小细菌和病毒之间一类的原核细胞型微生物 大部分病例发于春天或初夏，流行分布全世界

9、绵羊和牛是人类的主要传染源，吸入感染的污染物 多见于男性青壮年，潜伏期1239天，平均18天 多急骤起病，发热、头痛、寒颤，肌痛、胸痛 体温可升至40持续13周 治疗：氯霉素、四环素.,32,肺炎衣原体,5-15岁青年易被感染，尤其是人群聚集处 多起病缓慢，潜伏期30天左右 临床多出现流感样的症状，发热一般低于38度，数天至数周后出现持续性干咳，若不及时治疗会持续数月 阳性率一般在1-5%左右,33,腺病毒,无外壳的双链DNA病毒，与人类呼吸道感染密切有关 多发生于724月婴幼及老人，冬春两季常见 潜伏期38天，急骤发热，自第12日即39以上的高热，第34日呈不规则的高热；60%以上的病例体温

10、超过40 在呼吸、神经、循环、消化等系统都有症状显现,34,呼吸道合胞病毒,RNA病毒 该病经空气飞沫和密切接触传播； 多见于新生儿和6 个月以内的婴儿 在冬季爆发流行 潜伏期3-7天，IgM抗体在发病1周出现，持续23个月,35,流感病毒,球形RNA病毒 根据其核蛋白的抗原性可以分为三类: 甲型、乙型、丙型 呈季节性周期性流行爆发（12月-4月） 甲型流感的流行每年都会发生 乙型流感的流行只在每3-6年爆发一次，感染人数超过总人口的25%,36,副流感病毒,单链的RNA病毒 致病性仅次于呼吸道合胞病毒，尤其在儿童及老年人群中 全年均发生 第 1 和第 3 型常见于幼儿，局部流行发生于托儿所、

11、儿科病房、小学及其他儿童场所 第3型为地方性流行，传染性强,37,检测原理（间接免疫荧光法）,38,九种呼吸道病原菌的潜伏期和IgM抗体出现,39,引用文献-九种呼吸道病原菌IgM抗体出现时间,1.陆慰萱，张运剑.军团菌肺炎J. 国际呼吸杂志 2007,27(8):634-635. 2. 刘丽，林花，成焕吉等.儿童社区获得性肺炎肺炎支原体感染的快速诊断J.中国妇幼保健,2006,21(9):1289-1291. 3.鲜耀国，曹建新，闫兰等. Q热C Q fever)的流行病学、预防与治疗J.世界感染杂志,2008,8(4):310-313. 4. 季伟.儿童呼吸道肺炎衣原体感染流行病学与临床J

12、.实用儿科临床杂志,2007,22(16):1209-1212. 5. 孙桂莲等. 腺病毒肺炎的病原学诊断与临床观察J.白求恩医科大学学报,1994,20(3):271-272. 6. 沈怡，高传化.小儿下呼吸道3种常见病毒感染359例临床分析J.中华现代儿科学杂志,2005,2(6):488-489.,40,小结,2、九项病原体联合检测，不仅可以检测五项病毒，而且可以检测肺炎支原体、肺炎衣原体、嗜肺军团菌、Q热立克次体，同步完成多种疑似病原体鉴别诊断。克服单项检测为临床提供片面实验室依据的缺陷。 3、检测IgM抗体，利于早期发现。 4、标本为血清标本（15微升），容易采集、容易保存。 5、准确检测出感染的病原体，能为临床诊断、治疗提供强有力的帮助 6、采用间接免疫荧光法，技