瘤胃保护性氨基酸稳定性检验

1、ICS65.020.30B40DB15内蒙古自治区地方标准DB 15/ TXXXX规模化羊场绒山羊舍饲管理技术规程瘤胃保护性氨基酸稳定性检验Test method for the stability of rumen-protected amino acid点击此处添加与国际标准一致性程度的标识XXXX - XX - XX发布XXXX - XX - XX实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/ TXXXX前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由内蒙古自治区农牧业科学院提出。本标准由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。本标准起草单位：内蒙古自治

2、区农牧业科学院。本标准主要起草人：孙海洲、桑丹、金鹿、李胜利、张春华、张崇志、凌树礼、任晓萍、珊丹。2瘤胃保护性氨基酸稳定性检验1 范围本标准规定了瘤胃保护性氨基酸稳定性检验方法。本标准适用于瘤胃保护性氨基酸测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 3358.1 统计学词汇及符号 第1部分：一般统计术语与用于概率的术语3 术语及定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1瘤胃保护性氨基酸（RPAA）ru

3、men protected amino acids通过物理和化学方法处理，将氨基酸以某种方式修饰或保护起来，尽可能减少该氨基酸在瘤胃中被化学和微生物降解，在瘤胃后的消化道中被有效释放，且以生物学可利用形式被吸收和利用的保护性氨基酸。4 试剂和材料4.1 如无特别说明，所用试剂均为色谱纯试剂，水为GB/T 6682规定的一级水。4.2 人工唾液：将9.30 g NaHPO4、9.80 g NaHCO3、0.47 g NaCl、0.57 g KCl、0.04 g CaCl2、0.12 g MgSO4溶于少量蒸馏水中，定容至1000 mL容量瓶中。5 仪器和设备5.1 分析天平（分度值0.0001

4、g）。5.2 烘箱（室温300 ）。5.3 具塞试管（50 mL）。5.4 恒温水浴摇床。5.5 容量瓶（100 mL和1000 mL）。5.6 刻度吸管（20 mL）。5.7 三角瓶（250 mL）。6 测定步骤6.1 RPAA在人工唾液中稳定性检验准确称取0.5 g RPAA，放入50 mL具塞试管底部，加入20 mL人工唾液，盖紧试管塞，在39 的恒温水浴摇床内消化2，4，8，12，16和24 h，取出后冲洗、过滤，置于40 烘箱中烘干，用茚三酮比色法测定不同时间点残渣中的氨基酸含量，由此计算出氨基酸释放率。6.2RPAA在瘤胃液中稳定性检验选择孔径为3550 m的尼龙布，裁剪成15 c

5、m11 cm的长方块，对折，用涤纶线进行双道缝合，制成长宽为7 cm 10 cm的尼龙袋，尼龙袋边缘用烙铁熨烫使其无散边，用油性笔标号，再用自来水冲洗，浸泡50 min，低温烘干至恒重，备用。准确称取5 g RPAA样品放入尼龙袋内，尼龙袋夹在一根长约1215 cm的塑料软管一端，用橡皮筋缠紧,于早晨饲喂后1 h投入瘘管羊瘤胃内，管的另一端用尼龙绳挂在瘘管塞上。分别在2，4，8，12，16和24 h后将尼龙袋从瘘管羊瘤胃中取出，进行冲洗、浸泡1 min，置于40 烘箱中烘干，用茚三酮比色法测定不同时间点内尼龙袋中残留的氨基酸含量，由此计算氨基酸释放率。6.3 RPAA在十二指肠中稳定性检验采集绵羊十二指肠液200 mL，经四层纱布过滤后装入250 mL三角瓶内，准确称取0.5 g 瘤胃保护性氨基酸，放入50 mL具塞试管底部，盖紧试管塞，在39 的恒温水浴摇床内消化2，4，8，12，16和24 h，取出后过滤、冲洗1 min，用茚三酮比色法测定残渣中的氨基酸含量，由此计算氨基酸释放率。7 测定结果的计算7.1RPAA的氨基酸释放率（%）=RPAA中的氨基酸含量-消化后残留物中氨基酸的含量RPAA中氨基酸的含量1007.2 结果表示 取两次测定