第九章球菌.ppt

1、总论:微生物学的基本原理 (生物学性状 / 感染 / 抗感染免疫 / 遗传与变异 / 医学微生态学与医院内感染 / 消毒与灭菌 / 病原学诊断与防治 / 细菌的耐药性与控制策略)各论:细菌学 三性两原则 病毒学 (生物学性状/ 致病性/免疫性/ 真菌学 微生物学检查原则/防治原则),细菌学各论,coccus,球菌,化脓性细菌 能感染人体并引起化脓性炎症的细菌 （皮肤、皮下软组织、深部组织、内脏器官、脓毒血症） 化脓性球菌： 革兰氏阳性球菌主要介绍葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌； 革兰氏阴性球菌主要介绍脑膜炎双球菌、淋球菌 化脓性杆菌： 主要为革兰氏阴性杆菌，如: 大肠埃希菌属、变形杆菌属 假单胞菌

2、属、 厌氧菌等,第一节 葡萄球菌属(staphylococcus),堆积样排列，G（+），分布广泛 大部分为腐物寄生菌 病原性球菌 一般引起化脓性感染，亦可引起败血症，是最常见的化脓性细菌，80%以上的化脓性炎症由其引起 葡萄球菌属包括40多个种，主要包括三个： 金黄色葡萄球菌（s.aureus) 表皮葡萄球菌(s.epidermidis) 腐生葡萄球菌(s.saprophyticus),一、生物学性状,1.形态与染色 球形，直径平均1m，葡萄串状，G+，无鞭毛，无芽孢，体外培养一般不形成荚膜 在青霉素等作用下可变为L型,Staphylococcus (SEM),2.培养特性,易培养,兼性厌氧

3、或需氧；37；pH7.4 液体培养基（肉汤） 混浊生长 固体培养基 菌落 普通平板 中等大小S型菌落 脂溶性色素 金黄色/白色/柠檬色 血琼脂平板 金葡菌溶血毒素形成完全透明的 溶血环（溶血）,上为金黄色葡萄球菌，下为表皮葡萄球菌,培养特性（ 固体培养基生长现象）,3.生化反应,触酶阳性（与链球菌区分标准） 多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气 致病菌分解甘露醇,葡萄球菌A蛋白(SPA) 存在于细胞壁上的表面抗原，可与IgG的Fc段结合，可进行协同凝集，并具有抗吞噬等生物学活性。 荚膜：利于黏附 多糖抗原（磷壁酸抗原）：群特异性（A/B）,4.抗原构造,capsule,polysacch

4、aride (teichoic acid),SPA,SPA（staphylococcal protein A）,SPA（staphylococcal protein A）,协同凝集试验（coagglutination）,SPA功能 体内作用： SPA与IgG结合后所形成的复合物具有抗吞 噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小 板等多种生物活性。 体外作用：用于多种微生物抗原检测。,S. aureus 借助SPA抵抗调理作用,金黄色葡萄球菌（S.aureus） 表皮葡萄球菌（S.epidermidis） 腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）,5.分类,色素、生化反应,三种葡萄球菌的主要

5、性状,分类,凝固酶 阴性菌 阳性菌 噬菌体 群 23型 群引起葡萄球菌肠毒素食物中毒 DNA 16sRNA 分48个种和亚种,抵抗力是无芽胞细菌中最强的 对热、干燥、消毒剂、UV等因素均有较强抵抗力 耐盐，在1015%NaCl培养基中生长（选择） 对染料及龙胆紫敏感 对青霉素、金霉素、红霉素等抗生素均高度敏感，但对青霉素的耐药菌株90%,6.抵抗力,二、致病性,致病物质,毒素 葡萄球菌溶素 毒性休克综合征毒素1 杀白细胞素 肠毒素 表皮剥脱毒素 酶 凝固酶 耐热核酸酶 纤维蛋白溶酶 透明质酸酶 酯酶 表面结构蛋白 粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖、SPA,凝固酶（coagulase）,概念 使含有抗凝

6、剂的人或兔血浆发生凝固的酶类 游离凝固酶free coagulase 结合凝固酶bound coagulase 意义 鉴别有无致病性的重要指标 与金黄色葡萄球菌致病性相关 抵抗吞噬细胞的吞噬 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 使感染局限化和形成血栓。 决定了金黄色葡萄球菌引起化脓性感染时的感染特点：病灶局限、不易扩散、而且脓汁粘稠。,葡萄球菌溶素（staphylolysin）,损伤细胞膜的毒素（细胞毒素） 分 等，溶素为主要致病因子，溶解红细胞，破坏白细胞，血小板及多种其它组织细胞 攻击中性粒细胞和巨噬细胞 抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌侵袭力,杀白细胞素（panton-valentine，PV）

7、：破坏中性粒细胞和吞噬细胞、抗吞噬、增强病菌侵袭力。,肠毒素（enterotoxin）,约1/3临床分离金黄色葡萄球菌可产生 引起急性胃肠炎，即食物中毒 特点： 耐热，10030min 引起毒素性食物中毒 抗胃肠液中蛋白酶 作用机制：刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒,表皮剥脱毒素（exfoliative toxin）,引起机体发热，增加对内毒素的敏感性 引起发热、休克、肾衰、皮疹等多个器官功能紊乱，毒性休克综合征（TSS） 引起烫伤样皮肤综合征（staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS） 有丝氨酸蛋白酶功能，裂解表皮组织的棘状颗粒层，破坏细胞

8、间连接，表皮与真皮脱落烫伤样皮肤综合征（staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS） 患者皮肤弥漫性红斑水疱，表皮上层大片脱落,毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）,所致疾病 侵袭性感染： 局部感染疖、痈、毛囊炎、蜂窝组织炎、气管炎、脓胸 全身感染 败血症、脓毒血症 毒素性疾病： 食物中毒 假膜性肠炎（菌群失调症） 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征,毛囊炎,局部感染及烫伤样皮肤综合征,疖,脓疱病,1个1周大早产儿的烫伤样皮肤综合征,三、免疫性,有一定天然免疫力 机体免疫力降低时易感 感染后能获得一定的免疫力，但不强,小猫试验,四、微生物检查法,标本,脓

9、汁，血液，剩余食物，呕吐物等,分离培养,血浆凝固酶 发酵甘露醇 耐热核酸酶,直接涂片镜检,革兰阳性葡萄球菌,生长现象,色素，溶血，,生化反应,毒素检查,致病性葡萄球菌的鉴定依据：产生血浆凝固酶、耐热核酸酶、金黄色色素、溶血素、发酵甘露醇。,五、防治原则,防,注意 消毒隔离,注意 个人卫生,防止 医源性感染,防止 耐药性产生,治,抗菌素 药敏试验,自身菌苗疗法,凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase negative staphylococcus，CNS）,过去认为不致病，但目前已成为医源性感染的常见重要病原菌，且耐药菌株日益增多；当机体免疫功能低下或细菌进入非正常寄居部位时，CNS可引起多种感

10、染，各类感染中仅次于大肠埃希菌，居病原菌的第2位，造成诊治困难，引起临床微生物学工作者关注。 CNS十余种与致病有关，最多是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌。还包括溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、头葡萄球菌等30多种。 常引起泌尿系统感染、细菌性心内膜炎、败血症、术后及植入医用器械引起的感染。,第二节 链球菌属（steptococcus）,链球菌属分类 根据血平板上溶血现象分类 1.甲型溶血性链球菌：菌落外12mm宽草绿色不完全溶血环（ 溶血），为条件致病菌。 2.乙型溶血性链球菌：菌落外23mm宽透明的完全溶血环（溶血），致病力最强。 3.丙型链球菌：不溶血，不致病。,根据溶血现象分为3类,根据抗原结构

11、的分类 多糖抗原C抗原分群：A、B、C等20群，对 人致病的90%属A群 细胞壁 蛋白抗原M型抗原分型：A群100型、B群4型、 C群13型等 根据氧的需要分类 需氧链球菌 致病菌 兼性厌氧链球菌 厌氧链球菌 条件致病菌,溶血,溶血,反应,一、A群链球菌,一、A组链球菌 G+，球形，链状排列，革兰染色阳性(G+),单个菌体呈球形，G+，链状排列，无芽胞，无鞭毛，有菌毛，幼龄时有透明质酸荚膜，可自溶；与葡萄球菌比较，菌体略小，在其卵圆端连接,链球菌（革兰染色）,培养特性：,营养要求高：血平板或含血清培养基 液体培养易形成长链，为沉淀生长 血平板呈灰白色表面光滑小菌落，不同菌株溶血不一,生化反应,

12、分解葡萄糖，产酸不产气 不分解菊糖，不被胆汁溶解 （鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）,蛋白质抗原（表面抗原）型特异性， 主要为M抗原 胞壁多糖抗原（C抗原）群特异性 核蛋白抗原（P抗原）无特异性,抗原构造,分20个群， A群 致病菌 (溶血性链球菌或化脓性链球菌）,根据蛋白抗原 进一步分类 M抗原,荚膜,细胞壁,蛋白质,多糖,肽聚糖,细胞膜,细胞质,蛋白质抗原/表面抗原 多糖抗原/C抗原 核蛋白抗原/P抗原,链球菌抗原结构模式图,较弱 对青霉素敏感 耐药菌株少,抵抗力,致 病 性,致病物质 细胞壁成分 粘附素：脂磷壁酸（LTA） 增强细菌对细胞的黏附（表面受体） F蛋白（protein F）

13、 利于细菌在宿主体内定植和繁殖 M蛋白 抗吞噬 与人类心肌、肾小球基底膜有共同抗原， 引起超敏反应性疾病 肽聚糖,外毒素类 致热外毒素（红疹毒素）发热、红色皮疹（猩红热） 链球菌溶血素：根据对O2的稳定性分为SLO和SLS,SLO 含有-SH蛋白质，对O2敏感，还原后具有溶血作用 破坏红细胞、白细胞、血小板，对心肌、神经细胞也有毒性作用 抗原性强，23周出现抗“O”抗体，维持数月至1年，其效价1：400可做为新近感染或风湿活动指标 SLS 小分子糖肽，对O2稳定 血平板上溶血 无抗原性,侵袭性酶 透明质酸酶 扩散因子 分解细胞间质的透明质酸组织中扩散 链激酶（链球菌溶纤维蛋白酶） 有利于细菌扩

14、散 链道酶（链球菌DNA酶）,感染特点：感染病灶与周围界限不清，易于扩散，脓汁稀薄,所致疾病：,A群链球菌,淋巴管炎，,猩红热,超敏反应性疾病,化脓性感染,中毒性疾病,蜂窝组织炎，,扁桃体炎等,风湿热,急性肾小球肾炎,链球菌感染沿淋巴管扩散,丹毒,猩红热,草莓色舌,弥散的红色皮疹,甲型链球菌,感染性心内膜炎,D群链球菌,龋齿,条件致病,免疫性,可刺激机体产生各种抗体 抗M蛋白抗体有保护作用 型别间无交叉免疫 猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫,微生物学检查法,标本,直接涂片镜检,革兰阳性链球菌,分离培养,脓汁，血液，咽喉拭子,与金葡菌的鉴别,与肺炎链球菌的鉴别,血清学检查,抗“O”试验（AS

15、O test）：链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中和后，在加入SLO 乳胶试剂，因 病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗体与乳胶试剂反应，产生清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。 原理：中和试验 方法：间接凝集 结果：效价400单位 意义：风湿热及其活动性的辅助诊断,防治原则： 积极治疗儿童链球菌感染,治疗首选青霉素G ，避免链球菌感染完全可减少风湿热和肾小球肾炎的发病。,二、肺炎链球菌,1、形态染色 G+菌，菌体呈矛头状，成对排列，钝端相对，锐端相背，有荚膜，无芽胞，无鞭毛。 2 、培养 要求较高，在血平板上产生草绿色溶血环（溶血）与甲链相似，有自溶现象。 3 、

16、与甲链的鉴别方法 菊糖分解（+）、胆汁溶菌（+）Optpchin实验（+）。 4、 测定C反应蛋白 C多糖存在于该菌细胞壁上的特异性多糖，能被人血清中的C反应蛋白（CRP）所沉淀，CRP正常人只含微量，急性炎症时剧增，故可用C多糖测定CRP。 5、 分型原则 根据荚膜多糖抗原可分为84个血清型和若干亚型 6、抵抗力 较弱 7、致病性 肺炎链球菌是一种条件致病菌，可以引起大叶性肺炎 及继发感染,矛头状：平面相对 尖面相背,革兰染色阳性，双球菌,Streptococcus pneumoniae,生长现象,有厚荚膜,无芽胞,无鞭毛,致病物质：,致病性与免疫性,荚膜 肺炎链球菌溶素O 脂磷壁酸 神经氨

17、酸酶,所致疾病：,免疫性：,建立同型免疫 产生型特异的荚膜多糖抗体,大叶性肺炎,微生物检查法,直接涂片镜检：,G+有荚膜的双球菌,分离培养：,与甲链鉴别,菊糖分解试验 胆汁溶菌试验 Optochin敏感试验 动物试验,痰中肺炎链球菌占很大比例,防治原则：,多价肺炎球菌荚膜多糖菌苗,预防,治疗,抗生素,三、其它链球菌,B群链球菌（GBS）无乳链球菌 GBS正常寄居阴道与直肠，带菌率30% 新生儿感染（经产道或呼吸道）败血症及脑膜炎死亡率高。 D群链球菌牛链球菌、马肠链球菌、（肠球菌：现已单独列出为肠球菌属） 条件致病菌，为医院感染的重要致病菌，常见尿路感染。 甲型溶血性链球菌 条件致病菌，可引起

18、亚急性细菌性心内膜炎(SBE) ( 由此菌引起的SBE占全部病例50%) 变异链球菌与龋齿发病有关。,第三节 肠球菌属,粪肠球菌、屎肠球菌等29个种 G+，正常菌群 医院感染的重要病原菌，耐药严重 可致：尿路感染、腹盆腔感染、败血症、心内膜炎,第四节 奈瑟菌属 （Neisseria）,脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis),生物学性状 形态染色： G ，呈肾型，成双排列 （凹面相对，凸面相背），有荚膜及菌毛 培养特性 营养要求较高，血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板，形成光滑透明“露滴样”菌落 专性需氧，510%CO2，37（40 30均不生长）pH7.47.6 易产生自溶酶 生化反应：氧

19、化酶及触酶（+），分解葡萄糖和麦芽糖 抗原和分类：根据荚膜多糖群特异性抗原的不同可分为13个血清群，根据膜蛋白不同，各血清群又可分为若干血清型 抵抗力：很弱,抗原构造与分类,荚膜多糖群特异性抗原 分群 外膜蛋白型特异性抗原 分型 脂多糖抗原 核蛋白抗原,抵抗力,很弱,四怕 热 寒冷 干燥 消毒剂,革兰阴性双球菌,肾形或豆形,脑膜炎奈瑟菌形态,培养特性,脑膜炎双球菌的致病特点是冬末春初好发，存在于鼻咽部，儿童由于血脑屏障发育不完全，发病率较高 致病物质 荚膜：抗吞噬，增强侵袭力 菌毛：有利于细菌黏附和侵入 内毒素：引起小血管、毛细血管坏死、出血，导致皮肤淤斑、肾上腺出血、微循环障碍、DIC、中毒

20、性休克等。,致病性与免疫性, 致病过程：细菌飞沫呼吸道鼻 咽部黏膜血流 脑脊 髓膜化脓性炎症 内毒 素,所致疾病流行性脑脊髓膜炎 人是唯一宿主：5-15%正常人鼻咽带菌（流行期70-80%，我国A群为主 传染源：带菌者、病人 传播途径：飞沫传播，经呼吸道感染 潜伏期：2-3天 临床类型 普通型：高热、出血性皮疹、脑膜刺激症状 爆发型：内毒素休克、DIC，24h之内死亡 慢性败血症型：少数成人病程迁延数日 前两种以儿童多见 免疫性 体液免疫为主,皮肤瘀斑,微生物学检查,标本,分离培养与鉴定,病人：脑脊液、血液、皮疹液 带菌者：鼻咽拭子 标本保温保湿送检，最好床边接种立即送检，培养基预温,直接涂片

21、镜检,中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊断。,巧克力（色）培养基,快速诊断,对流免疫电泳，SPA协同凝集试验,防治原则,儿童 注射流脑荚膜多糖疫苗进行特异性预防,提高免疫力、接种疫苗、治疗首选青霉素G,二、淋病奈瑟菌（gonococcus） 淋球菌,生物学特性 形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似， G双球菌，咖啡豆状， 有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛 脓汁标本中 急性病人：细菌位于中性粒细胞内 慢性病人：细菌位于细胞外,电镜,培养特性：与脑膜炎奈瑟菌相似，专性需氧,营养要求更高，只能在巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S型菌落,对热、冷、干燥和消毒剂极度敏感 1%石炭酸 3 mi

22、n或1:4000硝酸银2 min即死亡 本菌能自溶,生化反应：氧化酶（+），只分解葡萄糖，不分解麦芽糖等其它糖类 抗原及分类：以外膜蛋白抗原分16个血清型 抵抗力：极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似）,致病物质,菌毛：粘附作用；抵抗吞噬。 外膜蛋白：有助于粘附。 IgA蛋白酶：能破坏黏膜表面sIgA。 内毒素：损害人体黏膜的重要因素。,1.淋病,人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主，属性传播疾病（exually transmitted disease ，STD） 主要通过性接触引起泌尿道和生殖系统炎症。,所致疾病,gonorrhea,（化脓性炎症）,潜伏期2-5天,2.新生儿淋菌性结膜炎/新生儿脓漏眼,新生儿由产道感染有淋病性阴道炎或子宫颈炎的孕妇，胎儿经产道娩出时可被感染。,3.淋病奈瑟菌性结膜炎及幼女阴道炎,所致疾病,通过毛巾、浴池间接感染。,人类对淋病奈瑟菌的感染无天然抵抗力 免疫力不持久,免疫性,微生物学检查法,标本,用无菌棉拭沾取,直接涂片镜检,中性粒细胞内发现革兰阴性双球菌，有诊断价值,分离培养与鉴定,标本采集后应注意保暖保湿，立即送检接种,子宫颈口表面分泌物,泌尿生殖道脓性分泌物,巧克力色