辣椒炭疽病菌检测技术规程编制说明

1、湖南省地方标准辣椒炭疽病菌检测技术规程编制说明一、任务来源辣椒全国种植面积约2600万亩，在蔬菜中位列第二，但是经济价值位居蔬菜的第一位。辣椒包括甜椒、泡椒、线椒、尖椒等不同类型，在我国不同地域均有分布和种植。而湖南省辣椒播种面积260万亩以上，且以本地辣椒以线椒、牛角椒、朝天椒为主，在洞庭湖区，牛角椒种植较多；而湘中、湘西地区，线椒是主栽品类。随着辣椒产业链的优化和发展，辣椒从品种选育、种子销售、种植栽培、生产加工和销售等相关环节逐步打通，促进辣椒产业的迅速发展。设施辣椒种植和南菜北运更是全年辣椒生产提供了有力保障。随着辣椒产业发展，裸地栽培和设施种植在生产过程中，经常遭遇主要病虫害的侵袭，

2、导致使用化学农药频繁使用和农产品农药残留超标，土传病害等连作障碍变得更加严重；特别是炭疽病菌导致的果实病害严重影响辣椒产量和质量，导致经济价值和商品价值受损。随着全球气候变暖，辣椒抗性品种对炭疽病菌的抗性丧失时有发生，导致辣椒炭疽病菌异常成灾，严重影响辣椒生产；另外，田间防治时发现相同化学农药田间防治效果明显差异等问题突出。究其原因，主要是湖南省辣椒产区主要包括5种炭疽病菌、而且不同炭疽病菌对化学农药的敏感性差异约60-200倍之间，可能是化学农药防治效果不佳的主因；相同炭疽病菌存在生物学、致病性的差异，是田间抗性品种抗性丧失的重要因子；田间调查和室内分离鉴定证实，田间炭疽病菌60%左右多为复

3、合侵染，是田间用药和品种栽培科学布局的重要障碍。为了更好地防控我省辣椒炭疽病菌，多年来团队研究人员通过田间采样、分离纯化和多种鉴定方法手段，明确我省主要包括5种炭疽病菌，存在明确致病力差异，而且不同地域优势种群明显不同；另外发现胶孢炭疽病菌存在种内分化；发现不同区域不同品种种植混载给炭疽病菌流行发生提供了更多机会。为此，针对性、高效、快速准确检测辣椒炭疽病菌病原，是实现辣椒炭疽病菌的科学控制，构建相应的防控策略的重要科学依据，符合辣椒炭疽病菌综合防控技术体系的建立和抗性育种的需要，是保障我国辣椒产业稳定发展的迫切需要。为进一步规范辣椒炭疽病菌科学检测，2019年向湖南省农业农村厅提出了辣椒炭疽

4、病菌检测技术规程地方标准制定申请，并于2020年获省市场监督管理局批准，湖南省地方标准辣椒炭疽病菌检测技术规程列入2020年度湖南省地方标准制修订项目计划（湘市监标函2020 21号），由湖南省植物保护研究所组织编写与制定。2019年，湖南省植物保护研究所成立了标准起草组。标准起草组制定了工作计划并召开了首次起草组工作人员会议，讨论了修订要点，确定了工作任务，明确了工作时间进度。综合地方标准制定工作小组人员近年的研究成果，按照辣椒炭疽病菌检测技术规程的技术内容、工作进度计划等要求，编写了辣椒炭疽病菌检测技术规程地方标准草案。二、标准制定的目的和意义目的：明确我省辣椒炭疽病菌的种类、地理分布和种

5、内病原菌的遗传分化等，实现高效、快速、准确的辣椒炭疽病菌检测，为了辣椒炭疽病的科学防控、抗性育种提供针对性策略，促进建立辣椒炭疽病绿色防控技术体系的建立，是保障我国辣椒产业稳定发展的迫切需要。意义：本规程是对多年来辣椒炭疽病防控工作的系统总结与规范。在团队多年协作下，已建立了辣椒炭疽病菌的ITS-PCR、SSR-PCR和NIS-PCR相结合的快速、高效、精准诊断技术体系，明确了辣椒炭疽病菌的优势种群和田间种群地理分布，确定了田间病原菌复合侵染是其防控困难和抗性丧失的主要原因，发现了炭疽病菌种群内存在致病性、化学药剂敏感性等差异，并形成了相应的技术平台，组建了一支相对稳定的辣椒炭疽病菌研究人才队

6、伍。该规程的应用，对于规范辣椒炭疽病菌检测与种类鉴定，制定合理的化学农药控制策略和针对性的抗性育种，促进辣椒产业健康和可持续发展具有重要意义。三、编制原则和依据（一）编制原则1、科学性原则标准制定过程中充分收集各方面的意见，标准中的数量指标都有翔实的检测数据，以国家强制性规范要求做依据，确保指标的设置具有科学性。2、统一性原则统一规范了辣椒炭疽病菌检测技术规程的术语和定义、工作原理、采样要求、检测技术、结果判断、检测流程，样品建档管理等内容，实施统一的标准，保证防治结果的可靠性和准确性。3、实用性原则辣椒炭疽病菌检测技术规程的制定注重科学性、高效性、精准性和实用性，明确了工作原理、采样要求、检

7、测技术、结果判断、检测流程，样品建档管理等方面的技术规范，成为辣椒炭疽病可持续绿色防控不可或缺的重要技术规范。4、可操作性原则标准严格贯彻国家有关法律法规和强制性标准，各项技术要求及数据，结合多年来的防控报告，具有较强的可操作性和重复性。（二）编制依据标准编写遵循GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写编写要求，坚持引用最新的国家标准。在指标的选取上，参考了相关的国家标准，做到了规范性技术要素和技术指标选取科学合理、有据可依。主要引用的规范性文件如下：GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法四、编制过程辣椒炭疽病菌检测技术规程地方标准2020年3月立项批复后

8、，4月开始标准起草筹备工作，由湖南省植物保护研究所主导地方标准的起草任务，抽调本所标准化工作人员，与湖南省标准化协会共同组成标准制定工作小组，承担辣椒炭疽病菌检测技术规程的制定起草工作。起草编制过程如下：（一）前期试验标准编写组于2014年至2020年，对湖南省和全国其他辣椒产区进行采样，分离纯化、种类鉴定和生物学比较分析，根据其研究成果进行系统总结，初步形成了适合湖南省乃至国内其他省区辣椒炭疽病菌检测技术规程，获得了相应的科学数据。（二）检测指标2020年5月-2020年7月，开展样品的针对性检测，初步形成了辣椒炭疽病菌检测技术规程，构建了标准草案的框架。（二）标准起草2020年4月成立标准

9、编制组，由来自湖南省植物保护研究所的专家和技术人员组成，召集了湖南省蔬菜研究所、临澧县农技推广中心、江永县农业农村局、新化县植保植检站、益阳市资阳区植保植检站、岳阳市农业农村局等，共同讨论了辣椒炭疽病菌样品收集、DNA提取、PCR检测等技术方面的意见，认真听取专家对标准制定的建议，起草完成稻曲病菌分子检测技术规程初稿。2020年8月份，标准编制工作组根据标准草案进行研讨完善，形成了标准征求意见稿。五、标准主要技术内容说明（一）框架结构辣椒炭疽病菌检测技术规程由9章和2个规范性附录组成，基本框架为范围、规范性引用文件、术语和定义、工作原理、采样要求、DNA提取、检测技术、结果判断、检测流程和样品

10、建档管理。（二）主要内容说明标准第3章“术语和定义”对辣椒炭疽病菌进行了科学定义。标准第4章“工作原理”对炭疽病菌分子检测进行了界定。标准第5章“仪器设备与试剂”对检测所需的仪器设备和试剂进行了介绍和规范。标准第6章“采样”对样品收集进行了规范。标准第7章“操作方法”对样品DNA制备、PCR检测进行了规范，在标准的制定过程中严格按照国家标准相关规定，对各项指标进行严格把关，确保检测数据科学，可靠，同时描述清晰，操作简便易行，具有较强的可操作性。标准第8章“结果判定”对辣椒炭疽病菌分子检测的结果进行了规范。标准第9章“样品保存与处理”对检测完的样品的保存与处理进行了规范。六、经济效益与社会效益本标准的制订，对辣椒炭疽病菌检测技术提供高效、快速、精准的科学指导，为抗性育种和品种合理布局提供科学依据，为农业服务部门提供更新、更全面、更科学的技术支持。另外，标准的制订，对于规范辣椒炭疽病菌检测技术，减少化学农药的使用，促进辣椒产业可持续发展具有重要意义。经过编写人员的共同努