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文档简介
1、酵母菌的形态观察,一、目的要求 1.观察酵母菌的形态及出芽生殖方式,学习区分酵母菌死活细胞的实验方法 2.掌握酵母菌一般形态特征及其与细菌的区别,二、基本原理 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,其大小通常比常见细菌大几倍甚至几十倍,大多数酵母以出芽方式进行无性繁殖,有的分裂繁殖;有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验是通过美蓝染液水浸片来观察酵母的形态和出芽生殖方式。 美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色,用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型,因此具有还原能力的酵母活细胞是无色的而死细胞或代谢作
2、用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞或活细胞进行鉴别,并可计算其成活率。,三、器材 1.菌种:酿酒酵母培养约2d的麦芽汁斜面培养物 2.溶液或试剂 :0.05%和0.1%吕氏碱性美蓝染色液,革兰染色用碘液 3.仪器或其他用具: 显微镜,载玻片,盖玻片等,四、操作步骤 1.美蓝浸片的观察 (1)在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液,然后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中,混合均匀。 (2)用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。 (3)将制片放置约3分钟后镜检,先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况,并根据颜色来区别死活细胞。 (4)染色约0.5小时后再次进行观察,注意死细胞数量是否增加。 (5)用0.05%吕氏碱性美蓝染液重复上述操作。,2.水-碘液浸片的观察 在载玻片中央加一小滴革兰染色用碘液,然后在其上加3小滴水,取少许酵母菌苔放在水-碘液中混匀,盖上盖玻片后镜检。,六.实验报告 1.结果 绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。 2.思考题 (1)吕氏美蓝染液浓度和作用时间的不同,对酵母菌死细胞数
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