焦化废水降酚菌筛选鉴定降酚率论文.doc

焦化废水中苯酚降解菌的筛选与降解性能的研究【摘要】 中国是焦化产品生产、消费、出口大国,由焦化废水的排放所造成的环境污染问题和焦化废水的治理技术已成为整个焦化行业发展的瓶颈。2010年我国积极推动焦化产业的优化升级,由扩大产能规模为主向高附加值焦化产品深加工为主、向“低碳”、“绿色”方向转变,焦化废水的深度处理受到高度重视。焦化废水含挥发酚、多环芳烃、杂环化合物、焦油等有机成分,还含有氰、硫、氨氮等无机化合物,成分复杂、色度高、毒性大,是典型的难生物降解处理的有机废水。2010年7月1日起执行的炼焦工业污染物排放标准(GB 16171-2011)规定COD直接排放限值,现有企业由原来的150 mg/L改为100 mg/L,新建企业由原来的100 mg/L改为50 mg/L,对COD的排放要求越来越严格。酚类物质作为COD的主要贡献物,其降解效率对于焦化废水的达标排放尤为重要。本文就此开展以下内容研究：1.从理论方面探讨了构建用于处理焦化废水的基因工程菌的必要性和可行性。仅从活性污泥中分离筛选得到的菌株,对焦化废水的降解能力往往有限,利用基因操作技术对筛选得到的菌株进行遗传学改造,能大幅提高降解酶的活性并扩大降解底物范围。在焦化废水中.更多还原【Abstract】 China is the main country of the coking production, coking consumption and coking export. However, the outdated production techniques and equipments seriously polluted the water environment. In 2010, something has been done toactively promote the optimization and upgrading of coking industry in China. It is planned and ruled that the development mode would change from the mainly expanding capacity to the higher-valued coking products in the way of low carbon and green direction. The coking w.更多还原 【关键词】 焦化废水； 降酚菌； 筛选； 鉴定； 降酚率； 【Key words】 coking wastewater； phenol degrading bacteria； screening； identification； phenol degradation； 摘要 3-5 ABSTRACT 5-7 目录 8-11 符号说明 11-12 第一章:绪论 12-34 1.1 焦化废水的产生及处理 12-23 1.1.1 焦化废水的产生 12-13 1.1.2 焦化废水的水质分析 13-19 1.1.3 焦化废水处理技术 19-23 1.2 焦化废水中酚类的去除 23-28 1.2.1 酚的毒害及处理 23-24 1.2.2 生物处理含酚废水的研究现状 24-28 1.3 焦化废水基因工程菌的构建 28-30 1.3.1 基因工程菌的构建 28 1.3.2 构建焦化废水基因工程菌 28-30 1.4 课题的研究内容、研究方法及研究意义 30-34 1.4.1 研究内容 30 1.4.2 研究方法 30-31 1.4.3 研究意义 31-34 第二章:实验材料和方法 34-48 2.1 实验材料 34-39 2.1.1 菌源 34 2.1.2 药品 34-35 2.1.3 培养基配方及配置 35-38 2.1.4 仪器设备 38-39 2.2 实验方法 39-48 2.2.1 4-氨基安替比林法测定苯酚的浓度 39-42 2.2.2 比浊法测定微生物的生长量 42-44 2.2.3 革兰氏染色显微观察 44-48 第三章:苯酚降解菌的筛选 48-54 3.1 苯酚降解菌筛选方案(一) 48-50 3.1.1 培养基和培养条件 48 3.1.2 富集培养步骤及结果 48-49 3.1.3 分离培养步骤及结果 49-50 3.2 苯酚降解菌筛选方案(二) 50-52 3.2.1 培养基和培养条件 50 3.2.2 富集培养步骤及结果 50-51 3.2.3 分离培养步骤及结果 51-52 3.3 菌体染色观察及形态特征 52-53 3.3.1 菌体的染色观察 52 3.3.2 菌落形态特征 52-53 3.4 本章小结 53-54 第四章:苯酚降解菌的菌种鉴定 54-66 4.1 生理生化法鉴定菌株 54-63 4.1.1 过氧化氢酶试验 54-55 4.1.2 产吲哚试验 55-56 4.1.3 甲基红试验(M.R试验) 56-57 4.1.4 V.P试验(Vopes-Prokauer试验) 57-58 4.1.5 细菌动力学试验 58-59 4.1.6 细菌生长与氧的关系 59-60 4.1.7 明胶液化试验 60-61 4.1.8 淀粉水解试验 61-63 4.1.9 结果与讨论 63 4.2 细菌16S rDNA菌种鉴定 63-64 4.2.1 细菌16S rDNA菌种鉴定原理及步骤 63-64 4.2.2 细菌16S rDNA菌种鉴定结果 64 4.3 本章小结 64-66 第五章:苯酚降解菌的降酚率测定 66-76 5.1 四种不同菌株的降酚率测定 66-68 5.2.环境因子对苯酚降解的影响 68-73 5.2.1 温度对菌株D2降酚率的影响 69-70 5.2.2 酸碱度对菌