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文档简介
思考:转基因技术实现了一种生物的某些性状 在另一种生物中表达。这些性状的表达与我们学过的基因的什么过程有关?,基因工程,专题,甲生物,乙生物,新类型生物,表达,生物产品,取出优秀基因,“剪切” “拼接”,基因工程,又叫 。是指 ,在DNA 上进行严格的设计,并通过 DNA ,赋予生物以 ,从而创造出更符合人们需要的新的 _和 。,DNA重组技术,分子水平,新的遗传特性,生物产品,按照人们的愿望,生物类型,体外,重组和转基因技术,基因工程的概念,基因工程,基本工具,1.限制酶,2.DNA连接酶,3.载体,原理,操作程序,1.目的基因的获取,2.基因表达载体的构建(核心),3.目的基因导入受体细胞,4.目的基因的检测与鉴定,PCR技术扩增,基因文库,人工合成,方法,组成,用同一种限制酶切割;用DNA连接酶链接,目的基因,启动子,终止子,标记基因,植物细胞,动物细胞,微生物细胞,农杆菌转化法,基因枪法,花粉管通道法,导入目的基因的植物细胞经植物组织培养形成植株,显微注射技术,导入受精卵中,用Ca2+处理,分子水平,个体水平,DNA分子杂交技术,分子杂交技术,抗原-抗体杂交技术,抗虫或抗病接种实验,基因重组,应用,植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆性等,动物基因工程:,基因工程药物:转基因工程菌,基因工程治疗,基因工程,基本工具,限制酶,DNA连接酶,载体,原理,操作程序,1.目的基因的获取,2.基因表达载体的构建(核心),3.目的基因导入受体细胞,4.目的基因的检测与鉴定,PCR技术扩增,基因文库,人工合成,方法,组成,用同一种限制酶切割;用DNA连接酶链接,目的基因,启动子,终止子,标记基因,植物细胞,动物细胞,微生物细胞,农杆菌转化法,基因枪法,花粉管通道法,导入目的基因的植物细胞经植物组织培养形成植株,显微注射技术,导入受精卵中,用Ca2+处理,分子水平,个体水平,DNA分子杂交技术,分子杂交技术,抗原-抗体杂交技术,抗虫或抗病接种实验,基因重组,应用,植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆性等,动物基因工程:,基因工程药物:转基因工程菌,基因治疗,区分下列相近概念,(1)载体与运载体,1)细胞膜上的载体蛋白: (如:主动运输和协助扩散) 2)细胞内的载体蛋白:如血红蛋白 3)基因工程中载体:,与目的基因结合,将基因送入受体细胞。如:质粒、噬菌体的衍生物、动病毒、植物病毒等。,同上 3)基因工程中载体,质体:,质粒:,(2)质体与质粒,是一类与碳水化合物的合成与贮藏密切相关的细胞器,它是植物细胞特有的结构。根据色素的不同,质体可分成三种类型:叶绿体(chloroplast)、有色体(chromoplst)和白色体(leucoplast)。,是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。,(3)逆转录与反转录,反转录是进行基因工程过程中,人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA,并以之为模板人工合成DNA的过程。,逆转录是某些RNA类病毒自主行为,在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程;,二者虽同为RNADNA的过程,但地点不同,相对性的来说,逆转录在体内,反转录在体外。,?酶,DNA聚合酶,?酶,DNA聚合酶,DNA链接酶,(4)DNA连接酶与DNA聚合酶的比较,DNA连接酶,DNA聚合酶,催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键,不需要模板,需要DNA的链为模板,游离的DNA片段双链上的两个缺口同时连接起来,将单个的脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链,DNA连接酶作为“针线”将目的基因与载体连接,没有参与,相同点,不 同 点,是否需要模板,是否参与基因工程,PCR全称为_,是一项 在生物_复制_的核酸合成技术。,多聚酶链式反应,体外,特定DNA片段,(6)PCR扩增与DNA分子复制,PCR技术的操作过程,a、变性(90-95):双链DNA模板在高温作用下,_断裂,形成_,b、复性(复性55-65):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部_,c、延伸(70-75):在Taq酶的作用下,合成与模板互补的_。,氢键,单链DNA,双链,DNA链,d.重复a.b.c步骤,(7)启动子、终止子、起始密码子、终止密码子,RNA聚合酶结合位点,外显子,内含子,终止子,启动子,真核细胞 一个基因: (DNA序列),转录的终止信号,起始密码子,U,A,终止密码子,mRNA,基因文库的概念:,将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。,基因文库,基因组文库:含有一种生物的全部基因,部分基因文库:只包含了一种生物的部分基因, 如:cDNA文库,(8)基因文库、基因组文库、部分基因文库,蛋白质工程的基本原理,1、目标:根据人们对 功能的特定需求,对蛋白质的 进行分子设计。 2、原理:改造基因(基因 或基因 ) 。 3、途径: 预期蛋白质功能设计 推测应 有的 序列找到对应的 序列。,蛋白质,结构,修饰,合成,预期的蛋白质结构,氨基酸,脱氧核苷酸,对天然蛋白质进行改造,你认为直接对蛋白质分
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