生物安全二级(BSL-2)实验室标准操作手册培训ppt课件

1、主讲人：陈贤平 日 期：2013.07.03,生物安全二级（BSL-2）实验室 标准操作手册培训,生物安全实验室,概念 生物安全（biosafety）指避免危险生物因子造成实验室人员暴露，向实验室外扩散并导致危害的综合措施。 WHO定义为“保护工作人员避免接触与所进行实验工作（临床或研究）有关的微生物因子的生物安全原则和技术的实践,生物安全实验室,概念 生物安全实验室（biosafety laboratory）是通过实验室设计建造、实验设备的配置、个人防护装备的使用，通过严格遵守预先制定的标准操作程序和管理规范等综合措施，确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤害，确保周围环境不受其污染

2、的实验室,生物安全标识,生物安全标识,生物安全实验室,目 的 保 护操作人员 保护环境 保护样品,防护水平分为 一级、二级、三级、四级， BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4 ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4 （表示动物活体操作） 一级防护水平最低，四级防护水平最高,生物安全实验室,实验室生物安全防护水平分级,适用于操作在通常情况下不会引 起人类或者动物疾病的微生物,生物安全实验室/适用性,适用性,1】 一级（ BSL-1 ）实验室,适用于操作能够引起人类或者动物 疾病，但一般情况下对人、动物或环 境不构成严重危害，传播风险有限， 实验室感染后很少引起严重疾病，

3、并 且具备有效治疗和预防措施的微生物,生物安全实验室/适用性,2】 二级（BSL-2）实验室,适用于操作能够引起人类或者动物 严重疾病，比较容易直接或者间接在 人与人、动物与人、动物与动物间传 播的微生物,生物安全实验室/适用性,3】 三级（BSL-3）的实验室,适用于操作能够引起人类或者动物 非常严重疾病的微生物，以及我国尚 未发现或者已经宣布消灭的微生物,生物安全实验室/适用性,4】 四级（BSL-4）实验室,气溶胶aerosols 悬浮于气体介质中的粒径一般为 0.001m100m的固态或液态微 小粒子形成的相对稳定的分散体系,生物安全实验室/主要术语,主要术语,生物安全柜biologi

4、cal safety cabinet， BSC 具备气流控制及高效空气过滤装置的操 作柜，可有效降低实验过程中产生的有 害气溶胶对操作者和环境的危害,生物安全实验室/主要术语,气锁air lock 具备机械送排风系统、整体消毒灭菌条件、 化学喷淋（适用时）和压力可监控的气密 室，其门具有互锁功能，不能同时处于开 启状态。 缓冲间buffer room 设置在被污染概率不同的实验室区域间的 密闭室，需要时，设置机械通风系统，其 门具有互锁功能，不能同时处于开启状态,生物安全实验室/主要术语,高效空气过滤器（HEPA过滤器）high efficiency particulate air filte

5、r 通常以0.3m微粒为测试物，在规定的 条件下滤除效率高于99.97%的空气过滤 器,生物安全实验室/主要术语,实验室的走廊和通道应不妨碍人员和 物品通过 应设计紧急撤离路线，紧急出口应有 明显的标识,生物安全实验室/设计原则及基本要求,设计原则及基本要求,房间的门根据需要安装门锁，门锁应 便于内部快速打开 需要时（如：正当操作危险材料时）， 房间的入口处应有警示和进入限制,生物安全实验室/设计原则及基本要求,应评估生物材料、样本、药品、化学 品和机密资料等被误用、被偷盗和被 不正当使用的风险，并采取相应的物 理防范措施 实验室内温度、湿度、照度、噪声和 洁净度等室内环境参数应符合工作要 求

6、和卫生等相关要求,生物安全实验室/设计原则及基本要求,实验室设计还应考虑节能、环保及舒 适性要求， 应符合职业卫生要求和人机工效学要 求 实验室应有防止节肢动物和啮齿动物 进入的措施,生物安全实验室/设计原则及基本要求,门 应有可视窗并可锁闭，门锁及门的 开启方向应不妨碍室内人员逃生 墙壁、天花板、地面 应易清洁、不渗水、耐化学品和消 毒灭菌剂的腐蚀 地面 应平整、防滑，不应铺设地毯,生物安全实验室/设计原则及基本要求,不得循环使用动物实验室排出的空气 动物实验室的设计，如：空间、进出 通道、解剖室、笼具等应考虑动物实 验 及 动物福利的要求,生物安全实验室/设计原则及基本要求,生物安全实验室

7、,二级生物安全实验室BSL2,BSL-2实验室在建筑物中的位置通 常无特别要求； 可根据实验活动的需要确定； 当建筑条件允许时，宜设于人流、 物流相对较少的僻静处，自成隔 离区域,生物安全实验室/ BSL-2实验室,位 置,生物安全实验室/BSL2实验室,常 压 状态 负 压 状态 负压状态的生物安全防护性能 高于常压状态。 选择 根据需要,类 型,生物安全实验室/BSL2/常压状态,无特别要求” 生物安全柜 洗眼器/洗手池 标志 实验室主入口的门、放置生物安全柜 实验间的门应可自动关闭 实验室主入口的门应有进入控制措施,常压状态,若房间面积足够，宜在进口处设置隔断，形成前室和核心工作间,核心

8、实验间,前室,衣柜,边台,双扉传递窗,生物安全实验室/BSL2/常压状态,实验室工作区域外应有存放备用物品的条件,生物安全实验室/BSL 2/负压状态,平面设置 / 布局 压力梯度 气流组织 人流组织 物流组织,负压状态建设要点,生物安全实验室/BSL 2/负压状态】平面布局要点,应符合 人流组织 物流组织 其他各环节 的生物安全性要求,生物安全实验室/BSL 2/负压状态】 平面设置,更衣室缓冲间主实验室 准备间/洗消间淋浴室样品库 使用独立空调时应设（预留）机房，无需设污物专用走廊 及 二更衣室,基本平面结构示意图,更衣室,缓冲间,核心工作间,准备间,边台,传递窗,生物安全实验室/BSL

9、2/负压状态,生物安全实验室/负压状态BSL 2/平面布局,人流进入路线 公共清洁区 更衣室 缓冲间 污染区,生物安全实验室/负压状态BSL2/平面布局】人流退出路线,污染区 缓冲间 淋浴间 公共清洁区 更衣室,生物安全实验室/负压状态BSL2/平面布局】 物品进、出路线,清洁区 双扉传递窗 污染区,生物安全实验室/负压状态BSL 2/平面布局,平面结构示意图淋浴,更衣室,缓冲间,核心工作间,准备间,边台,传递窗,淋浴间,淋浴,平面结构示意图样品库,更衣室,缓冲间,核心工作间,准备间,边台,传递窗,淋浴间,样品库,样 品 库,生物安全实验室/负压状态BSL 2/平面布局,平面结构示意图机房,更

10、衣室,缓冲间,核心工作间,准备间,边台,传递窗,机房,生物安全实验室/负压状态BSL 2/平面布局,生物安全实验室/负压状态BSL 2/平面布局,平面设置 缓冲间,是指具有不同空气指标（气压、洁净度、温度、相对湿度）的区域之间相贯通时空气相互交换的减缓区，其作用仅在于最大程度地减少区域空气指标的损失,平面设置 缓冲间,在BSL-2实验室中，缓冲室最重要的作用是减少相邻相通房间负压差（Pa）的损失，起缩小泄压区的作用，使不同区域之间的空气交换量降低到最小程度；其次是减少洁净度等其他空气指标的损失,生物安全实验室/负压状态BSL 2/平面布局,平面设置 缓冲间,缓冲室越小效果越好。在满足正常人流、

11、物流的情况下，应尽量缩小建筑尺度；因此，缓冲室的面积通常取1300mm13001500mm左右即可,生物安全实验室/负压状态BSL 2/平面布局,生物安全实验室/负压状态BSL2/平面布局,生物安全实验室/负压状态BSL2/平面布局,生物安全实验室/负压状态BSL2/平面布局,各区域平面结构应规整,空气处理 核心措施 气流组织 保护实验人员 （定向气流） 负压梯度 保护外部环境 洁净度 保护样品,生物安全实验室/负压状态BSL2/核心措施,实验室区域整体气流组织,清洁区,缓冲区,污染区,排出,生物安全实验室/负压状态BSL2/气流组织,主实验室气流组织,清洁空气送入,操作人员,生物安全柜后排出

12、,生物安全柜,生物安全实验室/负压状态BSL2/气流组织,生物安全实验室/负压状态BSL2/气流组织,人 员,核心实验间气流组织,排风口,送风口,生安柜,空气调节 主实验室为 对侧上送下排,生物安全实验室/BSL 2/负压状态,生物安全实验室/BSL 2/负压状态,主实验室为 对侧上送下排/上排 均匀单向流,空气调节,送 风 口,排 风 口,宜采用全新风系统,生物安全实验室/BSL 2/负压状态】 空气调节,主实验室相对压强宜为 -20Pa -30Pa 相邻相通房间压差为10Pa以上 洁净度为 7级8级,生物安全实验室/负压状态BSL2/生物安全柜,生物安全柜,BSC-II-A1型,BSC-I

13、I-A2型,BSC-II-B1型,BSC-II-B2型,BSC-II-A1型,实验区有垂直层流 前窗进风气流平均流速0.38m/s 可向室内排风 循环气流比例为70% 有正压污染区 不能用于挥发性有毒化学物、放射性物质的实验操作,生物安全实验室/负压状态BSL2/生物安全柜,实验区有垂直 层流 前窗进风气流平 均流速0.50m/s 可向室内排风 循环气流比例为 70% 正压污染区被负 压区域包围,无外接风道,有外接风道,BSC-II-A2型,生物安全实验室/负压状态BSL2/生物安全柜,BSC-II-B1型,实验区有垂直层流 前窗进风气流平均 流速0.50m/s 用风道连接排至室外 循环气流比

14、例为30% 正压污染区被负压区 域包围,生物安全实验室/负压状态BSL2/生物安全柜,实验区有垂直层流 前窗进风气流平均 流速0.50m/s 用风道连接排至室外 循环气流比例为 0 全排 正压污染区被负压 区域包围,BSC-II-B2型,生物安全实验室/负压状态BSL2/生物安全柜,生物安全实验室/负压状态BSL2/生物安全柜,A1型、A2型 排风方式,室内循环,室外排风 外置风机 排风管套筒连接,生物安全实验室/负压状态BSL2/生物安全柜,排风管套筒接 避免干扰生物 安全柜自身的 气流,套筒,排风管,生安柜,四种都可以 通常选择 BSC-II-A2型 原因： 安全符合 安装简单： 可直接排

15、在室内,生物安全实验室/负压状态BSL2/生物安全柜,生物安全柜选择,排至室内 生物安全柜排风在室内循环，室 内应具备换气条件 排至室外 排风管应独立于建筑物其他公共 通风系统管道； 可以连接本实验室通风系统排风管,生物安全实验室/负压状态BSL2/生物安全柜,说明,实验设备布置,生物安全柜 与出入口不紧邻的墙体 通讯设备 生物安全柜 对面 洗手、洗眼装置 门口 孵箱 靠近邻室气瓶处 高压过灭均器 靠近传递窗,生物安全实验室/负压状态BSL2/设备布置,主实验室设备布置,生安柜,离心机,箱培养,洗眼/手,灭菌器,传递窗,传真机,生物安全实验室/负压状态BSL2/设备布置,实验室核心间内 一台

16、实验室所在建筑 一台,生物安全实验室/负压状态BSL2/设备布置,高压灭菌器,洗手、洗眼装置,水 上下水 下水处理？ 消毒液 一次性洗眼瓶,生物安全实验室/负压状态BSL2/面积,建筑面积（参考,以一台生物安全柜计 总面积宜为35平方米55平方米 主实验室宜为10平方米15平方米。 增加一台生物安全柜，加10平方米。 缓冲间可在1.3米1.3米/1.5米左右,建筑结构,墙体 内表面光洁、防水、耐腐蚀、易 于清洁消毒，所有缝隙必须密封。 地面 应无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀。 阴角 均采用圆弧线条密封。 缓冲间 的门均应自动联锁,生物安全实验室/负压状态BSL2/建筑结构,建筑结构 阴角 均采用 圆弧线条密封,生物安全实验室/负压状态BSL2/建筑结构,其他设置,安全区域 醒目位置 设 压力显示 报警装置,生物安全实验室/负压状态BSL2