参归软肝胶囊对脾虚小鼠免疫功能的影响

1、参归软肝胶囊对脾虚小鼠免疫功能的影响李艳路西明王淑英王建刚【摘要】目的观察参归软肝胶囊SGR对脾虚小鼠免疫功能的影响。方法通过腹腔巨噬细胞吞噬实验及淋巴细胞转化实验使用脾虚型小鼠以刀豆素(nA)或脂多糖(LPS)作诱导剂，通过体内给药，体外实验的方法测定SGR对脾虚小鼠非特异性的吞噬细胞功能及特异性的细胞免疫、体液免疫功能的影响。结果给脾虚小鼠灌服受试药，能明显进步其腹腔巨噬细胞的吞噬才能和T、B淋巴细胞增殖反响(P0.05)。结论参归软肝胶囊能进步脾虚小鼠巨噬细胞吞噬才能、细胞免疫及体液免疫的功能。【关键词】参归软肝胶囊；脾虚小鼠；免疫功能AbstratbjetiveTstudytheeff

2、etsfSGRapsuleniunityfuntinfspleen-defiientie.ethdsThespleen-defiientiedelasinduedbynAandLPS.TheengulfingtestfabdinalphagyteandthetransfrtestflyphytesereadptedtbservetheeffetsftheapsulentheultipliatinratefT,Blyphytesinvitr.ResultsAfterfedithediine,theengulfingfabdinalphagytiellsandtheultipliatinratef

3、T,Blyphytesereinreasedarkedly(P0.05).nlusinSGRapsuleaniprvethefuntinsfnnspeifiiunity,ellulariunityandhuraliunityfthespleen-defiientie.KeyrdsSGRapsule;Spleen-defiieny;Iunefuntin参归软肝胶囊主要由丹参、当归、黄芪、川芎、白芍、郁金组成，有益气、活血养血、疏肝解郁功能。本实验通过腹腔巨噬细胞吞噬功能及淋巴细胞转化实验，观察参归软肝胶囊对脾虚小鼠非特异性的吞噬细胞功能及特异性的细胞免疫、体液免疫功能的影响，为该药的临床应用提供

4、实验根据。1材料1.1动物昆明小鼠，河南省实验动物中心提供，医动0002631。1.2药物大黄煎剂及参归软肝胶囊均由河南科技大学第一附属医院制剂室提供；nA为美国Siga公司产品；LPS为美国Siga公司产品；TT瑞士试剂公司产品；RPI1640培养基，日本产品；小牛血清，天津生化制品厂消费，批号060312。1.3检测仪器D-3022酶标仪，国营华乐电子管厂制；2培养箱，日本产；721分光光度计，上海第三分析仪器厂消费。2方法2.1分组小鼠60只，体重2022g，雌雄各半，随机分为6组，每组10只，0.2l/10gd-114,ig。正常对照组0.5%-Na；用大黄煎剂造模为脾虚小鼠，造模小鼠

5、分为模型组，复方鳖甲软肝片组，SGR低、中、高剂量组。模型组0.5%-Na；复方鳖甲软肝片对照组2.7gkg-1；SGR低、中、高3剂量组分别为生药kg-12.5，5.0，7.5g。2.2方法除正常对照组外，其余各组动物均按上述剂量每日灌服大黄煎剂40g生药kg-1，连续10d，给药组动物于第7天起按拟定剂量灌服相应受试药，连续14d。2.2.1SGR对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响1，2将小鼠处死，仰卧固定于工作台上，腹部碘伏部分消毒后，注入2l的1640培养液冲涮腹腔后，吸出腹腔液，滴0.1l液体于干净玻片上，滴加致敏酵母液按腹腔细胞酵母颗粒=110比例，4，湿盒内过夜，用1640培养液轻轻冲

6、洗，0.25%戊二醛固定，40倍光学显微镜下，随机计数200个腹腔巨噬细胞贴壁细胞中吞噬或吸附3个酵母以上的巨噬细胞数量。2.2.2SGR对nA，LPS诱导脾虚小鼠T、B淋巴细胞增殖反响的影响1，2在超净工作台中取小鼠脾脏,制成脾细胞悬液(2106l-1)，在96孔板上每孔加100l细胞悬液,分别参加nA(10gl-1)和LPS(20gl-1)100l。每个样品设3个重复孔。置37，5%2培养箱中培养66h。弃上清,每孔参加20l的TT，37孵育4h,再参加DS振荡。采用酶标仪测D值，=570n。细胞增殖反响率%=实验孔平均D值/对照孔平均D值100%3结果3.1对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响结

7、果见表1。模型组结合致敏酵母3个以上的百分数低于正常对照组P0.05，受试药3个剂量组均高于模型组P0.05。3.2对nA，LPS诱导T，B淋巴细胞增殖反响的影响结果见表2。3.2.1nA模型组低于正常对照组P0.05，受试药各组高于模型组P0.05和P0.01。3.2.2LPS模型组低于正常对照组P0.05，各受试药组均高于模型组P0.05。表1SGR胶囊对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响略与正常对照组比拟，P0.05；与模型组比拟，*P0.05；n=10表2SGR胶囊对nA,LPS诱导下B淋巴细胞增殖反响的影响略与正常对照组比拟，P0.05；与模型组比拟，*P0.05,*P0.01；n=104讨

8、论西医缺乏成熟有效的肝纤维化治疗药物。故研制高效、低毒抗肝纤维化的新药意义重大。中医治疗肝纤维化、肝硬变成为国内外学者研究热点。中医理论认为，肝纤维化成因多，应从舒肝、活血、祛淤、健脾、扶正补虚等多方面进展治疗，可进步疗效3。据此设计的参归软肝胶囊SGR主要由丹参、黄芪、川芎、白芍、郁金组成，有益气、活血养血、疏肝等多种成效。其中，人参具有增强机体非特异性抵抗力，进步机体适应性，促进病理过程恢复正常的功能，增强网状内皮系统及白细胞的吞噬功能；当归能显著增强动物腹腔巨噬细胞的吞噬功能，促进非特异性免疫功能；丹参能增加吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数，在支气管哮喘伴肺气肿患者的T淋巴细胞数目增高；黄芪能增

9、加小鼠网状内皮系统吞噬功能4。腹腔巨噬细胞吞噬功能实验可观察SGR非特异性免疫功能，SGR对nA，LPS诱导T，B淋巴细胞增殖反响的影响可观察SGR对特异性免疫功能的影响。给脾虚小鼠分别灌服SGR2.5，5.0，7.5g生药/kg，观察腹腔巨噬细胞吞噬功能实验和其对nA，LPS诱导T，B淋巴细胞增殖反响的影响，结果说明：SGR能不同程度的进步其腹腔巨噬细胞的吞噬才能，进步其特异性细胞免疫及体液免疫功能，该结果与中医理论扶正、补虚观点相一致，为SGR临床应用提供实验根据。【参考文献】1梁文杰，刘东青，单保恩，等.北豆根提取物对小鼠和人淋巴细胞及巨噬细胞作用的体外实验研究J.中国免疫学杂志，2022，21(1)：56.2李雁,闫晓天.益中蠲毒浓缩丸对脾虚小鼠免疫功