耳聋基因筛查示范应用项目实施方案

1、 耳聋基因筛查示范应用项目实施方案为建立耳聋基因筛查与新生儿听力筛查的联合工作模式，进一步提高我市听力筛查水平，减少听力障碍发生率，决定开展XX市耳聋基因示范应用项目预实验工作。根据我市实际情况，制定本实施方案。一、项目目的（一）通过项目实施，达到防残、减残，减少出生缺陷，提高人口素质的目的。（二）创新建立XX市新生儿听力筛查和耳聋基因筛查的联合工作流程、技术规范和管理办法。（三）在西部率先建成新生儿耳聋基因检测示范实验室；建立XX市新生儿耳聋基因突变数据库和样本库；在耳聋疾病早发现、早预防的科学研究和临床应用上，培养一批遗传性耳聋医学人才；推动“XX造”生物芯片走向世界，促进XX生物产业的发

2、展。二、项目实施原则（一）公益性原则。由政府购买，对高危人群和预实验区县2012年项目启动后出生新生儿实行免费遗传性耳聋基因筛查。（二）知情自愿选择原则。医务人员在采血前充分告知筛查的条件、方式、灵敏度等情况，高危人群和新生儿监护人自愿选择接受或不接受本次筛查。（三）保密性原则。任何筛查相关单位或个人不得在未获得被筛查对象或监护人授权的情况下对外公布筛查结果。三、项目技术采用博奥生物的遗传性耳聋基因芯片检测技术，对被筛查对象的GJB2、GJB3、SLC26A4和线粒体12SrRNA四个常见耳聋基因的9个突变位点进行检测。四、项目范围和经费（一）项目范围1.XX驿区、XX区和XX县3个预实验地区

3、，对今年所有出生的新生儿开展免费耳聋基因筛查。2.对全市20个区（市）县听力障碍高危人群进行耳聋基因筛查。高危人群包括：常规新生儿听力筛查未通过且有听力损失患儿；市残联登记的听障残疾人；经病残儿医学鉴定有听力损失且符合照顾再生育条件的男女双方及患儿。（二）经费承担1.区县财政：负责预实验区县新生儿筛查费用，由预实验区县政府财政承担。2.市县两级残联：负责高危人群筛查经费，由市县两级残保金支付。一圈层筛查经费由区残联承担，二圈层市县两级残联按5：5分担经费，三圈层市县两级残联按7：3分担经费。预实验区县财XX市县两级残联要落实好经费，制定符合实际的项目经费管理办法。五、项目管理成立项目组织机构，

4、组建指导组和专家组负责指导技术方案制定，监督基因检测的质量控制，评估项目的专业成果。由市卫健局负责具体组织协调工作。（一）成立指导组由XX市卫健局牵头，市残联、市财政局、市医管局、XX市妇女儿童中心医院、预实验区县卫健局、XX博奥有限公司相关人员共同组成XX市新生儿耳聋基因筛查示范项目指导组，负责项目的总体组织协调，明确各方职责，加强部门配合，确保项目顺利实施。指导组办公室设在市卫健局，负责项目的具体组织实施和监管（详见附表1）。（二）成立专家组由XX市卫健局、XX大学华西第一医院、XX大学华西第二医院、XX市妇女儿童中心医院和博奥公司等单位的卫生政策、卫生经济学、临床医学和遗传学专家组成，负

5、责指导技术方案的制定，监督基因检测的质量控制，实现科学研究的目标，组织评估项目的专业成果（详见附表1）。（三）监管和评估1.项目监管为保障项目顺利实施，对各环节实施监管控制：血液样品采集和分送由各产科执业机构实施，由同级妇幼保健机构进行质量控制管理；实验室检测由XX博奥有限公司负责质量控制；结果反馈咨询阶段由XX市妇女儿童中心医院进行组织管理。市县两级卫生行政部门对筛查机构的选择确定及人员、设备等各项要求进行督导管理。市县两级财政、残联对项目资金使用情况进行监管。实施中做到检测前知情告知（见附件4）。检测结果由市妇儿中心医院组织专家进行解答。对检测结果异常的人群联合残联实施预防干预。2.项目评

6、估（1）定期召开协调会，了解项目实施进展，解决相关问题，并评估过程质量控制。（2）预实验地区定期上报项目进展情况，项目办公室定期到预实验地区检查，并根据检查结果以及近期的统计数据制作动态简报上报，同时下发各实施医疗机构和相关部门。（3）实施阶段评估：8月进行一次半程运行评估；12月进行年终评估，评估结果为下一年度的项目实施提供依据。六、项目单位（一）组织实施单位：XX市妇女儿童中心医院（XX市妇幼保健院）负责项目组织、人员培训、宣传教育和质量控制等。（二）血样采集单位：新生儿采血由预实验所在区县产科执业机构完成，血样运送至XX妇女儿童中心医院质量监控；高危人群分别由卫生、人口计生部门、残联组织

7、到所属区（市）县妇幼保健机构完成采血，血样由妇幼保健机构运送至XX博奥独立医学实验室。（三）技术实施单位：XX博奥独立医学实验室完成血样的核酸提取、基因扩增和芯片检测，并出具检测报告。（四）咨询单位：检测结果采取发放告知书和专家咨询两种形式。专家咨询由XX市妇女儿童中心医院负责组织相关专家，采取轮班制负责咨询。本实施方案自下发之日开始实施，有效期1年。附件：1.耳聋基因筛查血片采集技术规范2.耳聋基因筛查操作流程3.耳聋基因筛查知情同意书4.耳聋基因筛查信息流程附件1新生儿耳聋基因筛查血片采集技术规范血片采集是新生儿耳聋基因筛查技术流程中最重要的环节。血片质量直接影响实验室检测结果，开展新生儿

8、耳聋基因血片采集及送检的医疗机构应当按本技术规范要求完成血片采集工作。一、基本要求（一）采血机构设置。设有产科或儿科诊疗科目的医疗机构可开展新生儿耳聋基因筛查血片采集。（二）采血人员要求。1.具有与医学相关的中专以上学历，从事医学临床工作2年以上。2.接受过新生儿耳聋基因筛查相关知识和技能的培训并取得技术合格证书。培训内容包括：新生儿耳聋基因筛查的目的、原则、方法及网络运行；滤纸干血片采集、保存、递送的相关知识；新生儿耳聋基因病筛查相关信息和档案管理。二、采血机构和人员职责（一）积极开展新生儿耳聋基因筛查的宣传教育工作。（二）加强对本机构血片采集人员的管理和培训。（三）承担本机构新生儿耳聋基因

9、筛查有关信息的收集、统计、分析和上报工作。（四）血片采集人员在实施血片采集前，应当将新生儿耳聋基因筛查的目的、意义、条件、方式、灵敏度和费用等情况如实告知新生儿的监护人，并取得书面同意。（五）认真填写采血卡片，做到字迹清楚、登记完整。卡片内容包括：采血单位、母亲姓名、住院号、居住地址、联系电话、新生儿性别、孕周、出生体重、出生日期、采血日期和采血者等。（六）严格按照新生儿耳聋基因筛查血片采集步骤采集足跟血，制成滤纸干血片，并在规定时间内递送至新生儿耳聋基因筛查实验室检验。（七）因特殊情况未按期采血或不合格标本退回需要重新采血者，应当及时预约或追踪采集血片。（八）做好资料登记和存档保管工作，包括

10、掌握活产数、筛查数、新生儿采血登记信息、反馈的检测结果及确诊病例等资料，保存时间至少10年。三、血片采集步骤（一）血片采集人员清洗双手并佩戴无菌、无滑石粉的手套。（二）按摩或热敷新生儿足跟，并用75%乙醇消毒皮肤。（三）待乙醇完全挥发后，使用一次性采血针刺足跟内侧或外侧，深度小于3毫米，用干棉球拭去第1滴血，从第2滴血开始取样。（四）将滤纸片接触血滴，切勿触及足跟皮肤，使血液自然渗透至滤纸背面，避免重复滴血，至少采集2个血斑，在新生儿遗传代谢性疾病采血的基础上再采2个血斑，共5个血斑。（五）手持消毒干棉球轻压采血部位止血。（六）将血片悬空平置，自然晾干呈深褐色。避免阳光及紫外线照射、烘烤、挥发

11、性化学物质等污染。（七）及时将检查合格的滤纸干血片置于密封袋内，密闭保存在28冰箱中，有条件者可0以下保存。（八）所有血片应当按照血源性传染病标本对待，对特殊传染病标本，如艾滋病等应当作标识并单独包装。四、采血工作质量控制（一）血片采集的滤纸应当与试剂盒标准品、质控品血片所用滤纸一致。（二）采血针必须一人一针。（三）正常采血时间与新生儿遗传代谢性疾病同时。（四）合格滤纸干血片应当为：1.至少2个血斑，且每个血斑直径大于8毫米。2.血滴自然渗透，滤纸正反面血斑一致。 3.血斑无污染。4.血斑无渗血环。（五）滤纸干血片应当在采集后及时递送，最迟不宜超过5个工作日。（六）有完整的血片采集信息记录。高

12、危人群耳聋基因筛查采血技术规范采血是高危人群耳聋基因筛查技术流程中重要的环节。采血质量直接影响实验室检测结果，开展高危人群耳聋基因静脉血样采集及送检的医疗机构应当按本技术规范要求完成静脉血样采集工作。一、基本要求（一）采血机构设置。指定的医疗机构均可开展高危人群耳聋基因筛查静脉血样采集。（二）采血人员要求。具有与医学相关的中专以上学历，从事医学临床工作。二、采血机构和人员职责（一）加强对本机构静脉采血人员的管理和培训。（二）承担本机构高危人群耳聋基因筛查有关信息的收集、统计、分析和上报工作。（三）血样采集人员在实施静脉采血前，应确认采血对象的身份与告知书签署者一致。（四）认真填写采血卡片，做到

13、字迹清楚、登记完整。卡片内容包括：采血单位、姓名、年龄、性别、联系电话、采血日期等。（五）严格按照高危人群耳聋基因筛查静脉血采集步骤采血，并在规定时间内递送至高危人群耳聋基因筛查实验室检验。（六）因特殊情况未按期采血或不合格标本退回需要重新采血者，应当及时预约或追踪重新采血。（七）做好资料登记和存档保管工作，包括掌握筛查数、高危人群采血登记信息、反馈的检测结果等资料。三、血样采集步骤（一）采样者带好口罩、帽子，严格实施无菌操作，以防感染。（二）选择血管，常用肘窝静脉、肘正中静脉、前臂内侧静脉。（三）采血对象取坐位或卧位，手臂伸直平放在床边或台面，腕下垫枕上，暴露穿刺部位，找好合适采血静脉后，在

14、静脉穿刺部位上方4-7厘米处扎紧压脉带，捆绑时间不应超过1分钟。（四）嘱咐采血对象握紧拳头，使静脉充盈显露。当轻压或轻拍时能感觉其回弹的静脉既为合适血管。最常用的选择部位是血管丰富并血管贴近皮肤表层的肘前区域。（五）以穿刺点为圆心，用复合碘伏棉签由内向外螺旋形涂抹5厘米以上穿刺部位，消毒过的地方不能重复涂抹， 在涂抹的过程中棉签必须也要同时旋转。如果手臂皮肤不足够干净的则需重新擦拭。（六）在洁净后不要触摸穿刺部位。（七）使针与皮肤成15度30度，在静脉上或旁侧刺入皮下，在沿静脉走向潜行刺入静脉，待回血后，将针头顺势探入少许固定不动，以免采血时针头滑出，但不可用力深刺，以免造成血肿。（八）将一次

15、性静脉采血针套在持针器上并旋紧，摘掉静脉采血针上的保护套，以左手拇指固定静脉穿刺部位下X，右手拇指和中指持注射器针筒，食指固定针头下座，使针头斜面和针筒刻度向上（九）抽血至所需2ml，放松压脉带，用无菌棉签压住进针拔针，将采样对象前臂屈曲压迫3-5分钟。（十）若未能抽出血液则向深处刺入，采用边退针边抽吸至有血液抽吸出为止，或者调整穿刺方向、深度或重新穿刺。（十一）将血液注入事先准备好的EDTA抗凝管中，采血管须轻轻颠倒混匀6-8次，使血液与抗凝剂充分混匀，防治凝固。（十二）迅速把针头放入专用利器容器内，针管放入医疗垃圾袋中。在采血管上写上样品号或贴上样品条码，检查确认样品号和检验编号吻合后，在

16、置于干燥试管架中，在46冰箱中暂存。（十三）将一次性静脉采血针统一进行消毒、毁形处理，将真空采血管、消毒棉签等按医疗废物作特殊处理，并做好相关登记工作。（十四）标本采集后当天必须送达实验室。所有血样应当按照血源性传染病标本对待，对特殊传染病标本，如艾滋病等应当作标识并单独包装。四、静脉采血注意事项及质量控制（一）采样前消除采样对象不必要的疑虑和恐惧心理，做好晕血晕针者的心理护理。在采血过程中，尽量分散其注意力，随时观察其变化，一旦出现不良反应，立即采取相应的处理措施。（二）采血后发生晕厥或眩晕，可让其平卧休息片刻即可恢复，必要时可针刺（或拇指掐）人中及合谷等穴位；若因低血糖诱发眩晕，可立即静脉

17、葡萄糖或口服糖水即可，如有其它情况，应立即找医生共同处理。（三）严格实施无菌操作，以防感染。（四）对于穿刺部位已消毒而静脉暴露不显著者，若需要进一步确定穿刺部位的，操作中务必将接触皮肤的手指部位用碘伏等消毒药品加以涂抹，方可直接触摸皮肤，达到无菌操作目的。（五）进针角度越大，越易刺穿血管，针梗进入皮肤越多，划伤血管的距离越长，切忌用力过猛或静脉内反复穿刺，以防损伤血管。（六）抽血时，只能向外抽，不能向静脉内推，以防空气注入形成气栓，造成严重后果。（七）穿刺后指导采血对象正确压迫针眼部位和方法，防治局部血栓形成。（八）防止血样溶血，造成溶血的原因有注射器和容器不干燥、不清洁；压脉带捆扎时间太长、

18、淤血过久、穿刺不顺损伤组织过多、抽血速度太快、血液注入容器时未取下针头或用力推出产生大量气泡、抗凝血用力震荡等因素。（九）血样不能及时检测或需保留以复查时，一般应存放于4-6冰箱。（十）对于不合格样品应做好登记工作，确定复查时间（十一）对于采血部位瘀斑青紫者，做好耐心细致的解释工作，嘱咐24小时内局部冷敷、24小时后湿热毛巾热敷。附件2新生儿耳聋基因筛查操作流程 听力筛查、诊断有听力损失听力筛查、诊断无听力损失电话通知 同意筛查签字后采血足跟采血制成滤纸干血片开展新生儿耳聋基因筛查健康教育书 听力筛查、诊断有听力损失听力筛查、诊断无听力损失电话通知 同意筛查签字后采血足跟采血制成滤纸干血片开展

19、新生儿耳聋基因筛查健康教育书 面 告 知不同意筛查血片递送通知采血机构重采各区（市）县妇幼保健院血片清点、验收合格血片“一卡通”信息比对不合格血片送至指定实验室实验结果报告无检测基因位点突变XX市妇女儿童中心医院检测基因位点突变根据结果提出干预措施建档、随访根据结果提出干预措施建档、随访多基因检测专家咨询多基因检测专家咨询儿童保健系统管理儿童保健系统管理提出干预措施提出干预措施高危人群耳聋基因筛查操作流程同意筛查同意筛查指定采血机构采血组织、开展高危人群耳聋基因筛查健康教育书 面 告 知不同意筛查听力保健健康宣传样品递送 样品清点、验收耳聋基因数据库送至指定实验室实验结果提出建议和指导专家咨询

20、建档、随访凭条码电话查询结果zhonzhongcai 市残联、市卫生、市计生委卫生、计生残联市妇女儿童中心医院采血新生儿听力联合筛查办公室附件3XX市新生儿耳聋基因筛查知情同意书母亲姓名新生儿性别出生日期住院病历号1、耳聋基因筛查可以早期发现药物敏感性个体及遗传性耳聋个体（包括因早期听力损失不明显而被听力筛查漏诊的遗传性耳聋个体），显著提高新生儿听障及耳聋高危检出率。 2、新生儿基因筛查运用遗传性耳聋基因芯片进行检测，该法是目前高效、敏感的检测方法之一，可以同时对中国最常见的四个耳聋相关基因（GJB2、SLC26A4、GJB3 及 mtDNA 12srRNA）的 9 个突变热点位点进行筛查。

21、3、基因筛查的实施是在新生儿出生后在采遗传代谢性疾病时采取少许足跟血或采取脐带血制成血片，质检合格后，送指定实验室进行测试。4、基因筛查结果分两种情况： = 1 * GB3 阴性，未发现受检的相关耳聋突变基因。如果听力筛查为“通过”，则进入听力随诊程序；如果听力筛查为“未通过”，应进一步行诊断性听力学检测及基因测序检测；阳性：即受检基因中携带至少一个耳聋相关突变基因，而听力筛查结果可为“通过”或“未通过”。此类结果提示受检者可能与遗传性耳聋或药物敏感性耳聋密切相关，需结合听力筛查结果进一步进行诊断性听力学检测及基因测序检测。基因筛查结果异常者均将得到检测结果卡片，并得到相关咨询。先天性听力损失

22、中50%是由于遗传因素引起，还有50%是由于其他原因引起，即使目前耳聋基因筛查和听力筛查通过，在孩子成长过程中如发现听力异常时也应及时就医。5、耳聋基因筛查费用，由政府财政免费提供。知情选择我已了解新生儿疾病筛查的内容，包括筛查的项目、条件、方式、灵敏度和费用等。我愿意 不愿意 给我的孩子做耳聋基因筛查。监护人 签名 日期年月日 医（护）人员签字： 日期：年月日 XX市新生儿耳聋基因筛查流程标本采集：在生产的产科医院，由医护人员完成血片采集。实验检测：送指定实验室完成耳聋基因检测。结果查询：采血40天后，可电话或网络查询结果。基因筛查结果分2种情况：阴性：提示未携带常见的9项耳聋基因突变，又可

23、以分为2种情况：如同时常规听筛通过，则进入听力保健随诊程序。如同时常规听筛未通过，则需做进一步相关检测。阳性：提示至少携带常见的9项耳聋基因突变之一，又可以分为2种情况：如同时常规听筛通过，此类结果提示新生儿携带遗传性耳聋基因突变，或药物性耳聋/迟发性耳聋高危个体，需进一步进行听力保健相关咨询。如同时常规听筛未通过，此类结果提示新生儿患有遗传性耳聋，需进一步诊断。4、结果咨询：如果筛查结果阳性，我们将及时通知您，做进一步的相关咨询或检测。高危人群知情告知书尊敬的朋友： 您好！2012年XX市残联与XX市卫健局、XX市人口和计划生育委员会等相关单位，合作实施“XX市高危人群致聋基因筛查项目”，为

24、听力高危人群开展免费致聋基因筛查。耳聋致病因素很多，约40%的耳聋由环境因素导致，如宫内缺氧、难产、新生儿黄疸等；60%由遗传因素导致，即遗传性耳聋。其中70-80%的遗传性耳聋个体可发现致聋基因突变。本项目仅需您提供2ml静脉血（不会对您的身体造成任何伤害），即可为您检测致聋基因，明确耳聋的病因，预防和控制耳聋的发生发展，具体表现如下：（1）对于药物性耳聋，查明病因，保护残存听力，预防家人及下一代耳聋；（2）对于大前庭导水管综合征耳聋，查明病因，保护残存听力，预防家人及下一代耳聋；（3）对于儿童听障，查明病因，早期进行医学康复治疗，保护残留听力，指导孩子日常生活，提高生活条件；（4）对青年听障的未来婚配生育起重要指导作用，预防下一代发生耳聋残疾；（5）对于听障夫妇或有再生育要求的年轻夫妇，可提供遗传咨询和指导，符合适应证者，可在妊娠早期通过产前诊断预判胎儿的听力情况，预防聋儿出生；（6）对于老年听障，查明病因，指导听力保护措施，预测家人耳聋风险，预防耳聋发生。请您认真填写此表