莨菪烷类抗胆碱药物又课件

第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析TheAnalysisofAnticholinergicAgent第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析1莨菪烷类抗胆碱药物又课件2莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷含氮的生物碱(氨基)莨菪烷(Tropane)莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷含氮的生物碱(氨基)莨菪烷(T3莨菪烷类抗胆碱药物又课件4莨菪烷类抗胆碱药物的分析结构莨菪烷类抗胆碱药物莨菪烷衍生的氨基醇与各种不同有机酸缩合酯+生物碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析结构莨菪烷类抗胆碱药物莨菪烷衍生的氨5莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪醇含氮的醇(莨菪醇)莨菪醇(Tropine)莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪醇含氮的醇(莨菪醇)莨菪醇(Tr6莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物硫酸莨菪碱硫酸阿托品莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物硫酸硫酸7莨菪烷类抗胆碱药物的分析性质区别硫酸莨菪碱硫酸阿托品熔点、溶解度、旋光度、分子量莨菪烷类抗胆碱药物的分析性质区别硫酸硫酸熔点、溶解度、旋光度8莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸山莨菪碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸山莨菪碱9莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸东莨菪碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸东莨菪碱10莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物丁溴酸东莨菪碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物丁溴酸东莨菪碱11二、主要性质1.水解性（酯水解生成醇和酸）阿托品莨菪醇莨菪酸2.碱性与生物碱沉淀剂产生有色沉淀

阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子，较强的碱性，易于酸成盐，如阿托品pKb1为4.35.二、主要性质1.水解性（酯水解生成醇和酸）阿托品12二、主要性质二、主要性质13一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)原理：莨菪烷类生物碱结构中的酯键水解后生成莨菪酸，经发烟硝酸加热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化钾的醇溶液和固体氢氧化钾作用脱羧，转化成具有共轭结构的阴离子而显深紫色。二、鉴别试验托烷生物碱类的特征反应，鉴别阿托品和莨菪碱类一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)原理：莨菪烷14一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇2～3滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。二、鉴别试验莨菪酸硝基化脱羧化共轭结构深紫一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)取供试品约115二、氧化反应(与硫酸-重铬酸钾的反应）二、鉴别试验二、氧化反应(与硫酸-重铬酸钾的反应）二、鉴别试验16三、沉淀反应生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀二、鉴别试验生物碱沉淀试剂反应条件及结果碘化铋钾试液橙红或棕红色沉淀碘化钾碘试液棕色或棕褐色沉淀碘化汞钾试液在酸性或碱性溶剂中生成白色或淡黄色沉淀三硝基苯酚试液结晶性沉淀并有特定熔点硅钨酸试液白色、淡黄色或黄棕色沉淀磷钨酸试液酸性或中性溶液中，淡黄色沉淀三、沉淀反应生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性17三、沉淀反应二、鉴别试验三、沉淀反应二、鉴别试验18四、光谱鉴别法紫外光谱法一般通过比较药物的或吸收光谱的一致性以及吸光系数来进行鉴别二、鉴别试验四、光谱鉴别法紫外光谱法一般通过比较药物的二、鉴别试验19四、光谱鉴别法红外光谱法ChP收载的原料药一般都采用红外光谱法进行鉴别二、鉴别试验四、光谱鉴别法红外光谱法ChP收载的原料药一般都采用红外光谱20五、色谱鉴别法色谱法一般用于已知生物碱的鉴别，主要有TLC、HPLC、GC、PC等二、鉴别试验五、色谱鉴别法色谱法一般用于已知生物碱的鉴别，主要有TLC、21六、硫酸盐和溴化物的反应药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在通过加沉淀试剂如硝酸银等生成溴化银沉淀或加入氯试剂生成溴溶于三氯甲烷而显色二、鉴别试验六、硫酸盐和溴化物的反应药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在通22Chp氢溴酸东莨菪碱的鉴别：六、硫酸盐和溴化物的反应Chp氢溴酸东莨菪碱的鉴别：六、硫酸盐和溴化物的反应23三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺洋金花粗粉乙醇/渗漉渗漉液减压蒸馏浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3,CHCl3/提取总生物碱Na2CO3,CHCl3/分离东莨菪碱HBr/成盐氢溴酸东莨菪碱（粗品）75%C2H5OH/精制成品根据其制备工艺，本品可通过酸度、其它生物碱、和易氧化物质检查进行控制三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺洋金花粗粉乙醇/24一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查酸度东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱盐、通过其5%的水溶液pH为4.0~5.5，可控制酸性杂质三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查酸度东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几25一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及26一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及27一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查其它生物碱本品水溶液加入氨水试液不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，则易产生混浊。三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查其它生物碱本品水溶液加入氨水试液不28本品水溶液一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查检查方法：本品水溶液一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查检查方法：29其他生物碱ab其他生物碱ab30二、硫酸阿托品硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光度测定法对莨菪碱杂质进行检查ChP用HPLC法检查其中有关物质，通过峰面积的比值及保留时间来控制杂质限度三、特殊杂质与检查二、硫酸阿托品硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体31第四节含量测定莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂量较少，因此测定方法要专属、灵敏:

酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色谱法第四节含量测定莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂32UV

酸性染料比色法在一定的pH条件下，某些生物碱药物可与某些酸性染料结合而呈色，进而可用分光光度法进行测量第四节含量测定UV酸性染料比色法在一定的pH条件下，某些生物碱药物可与某33酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行含量测定第四节含量测定酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚34莨菪烷类抗胆碱药物又课件35酸性染料比色法第四节含量测定酸性染料比色法第四节含量测定36影响因素

水相最佳pH值：使得BH+和In-最多第四节含量测定影响因素水相最佳pH值：使得BH+和In-最多第四节含37影响因素

水相最佳pH值：使得BH+和In-最多pH过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低影响离子对的形成；pH过高，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成，因此须有一个最佳pH值存在，使离子对生成最有利。其选择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有机相的分配系数而定第四节含量测定影响因素水相最佳pH值：使得BH+和In-最多pH过低抑制38影响因素

酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以。但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定结果。第四节含量测定影响因素酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量39影响因素有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。第四节含量测定影响因素有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想一般应选择对有40影响因素水分的影响：第四节含量测定影响因素水分的影响：第四节含量测定41影响因素酸性染料里面的有色杂质影响结果，先用萃取溶剂萃取除去第四节含量测定影响因素酸性染料里面的有色杂质影响结果，先用萃取溶剂萃取除去42应用示例第四节含量测定本法主要适用于紫外吸收弱、标示量低的有机碱性药物（生物碱）制剂的含量或含量均匀度的测定。应用示例第四节含量测定本法主要适用于紫外吸收弱、标示量低43应用示例硫酸阿托品片的含量测定应用示例硫酸阿托品片的含量测定44应用示例硫酸阿托品片的含量测定应用示例硫酸阿托品片的含量测定45应用示例硫酸阿托品片的含量测定应用示例硫酸阿托品片的含量测定46应用示例硫酸阿托品片的含量测定应用示例硫酸阿托品片的含量测定47二、非水溶液滴定法第四节含量测定二、非水溶液滴定法第四节含量测定48二、非水溶液滴定法第四节含量测定二、非水溶液滴定法第四节含量测定49二、非水溶液滴定法第四节含量测定二、非水溶液滴定法第四节含量测定50三、高效液相色谱法第四节含量测定三、高效液相色谱法第四节含量测定51莨菪烷类抗胆碱药物又课件52三、高效液相色谱法第四节含量测定三、高效液相色谱法第四节含量测定53三、高效液相色谱法第四节含量测定三、高效液相色谱法第四节含量测定54应用示例第四节含量测定应用示例第四节含量测定55莨菪烷类抗胆碱药物又课件56LC-PDA-MS法用于曼陀罗毒害事件体内样品中阿托品和东莨菪碱的法医鉴定LC-PDA-MS测定条件体内组织样品的制备分析结果应用示例第五节体内莨菪烷类药物分析LC-PDA-MS法用于曼陀罗毒害事件体内样品中阿托品和东莨57第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析TheAnalysisofAnticholinergicAgent第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析58莨菪烷类抗胆碱药物又课件59莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷含氮的生物碱(氨基)莨菪烷(Tropane)莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷含氮的生物碱(氨基)莨菪烷(T60莨菪烷类抗胆碱药物又课件61莨菪烷类抗胆碱药物的分析结构莨菪烷类抗胆碱药物莨菪烷衍生的氨基醇与各种不同有机酸缩合酯+生物碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析结构莨菪烷类抗胆碱药物莨菪烷衍生的氨62莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪醇含氮的醇(莨菪醇)莨菪醇(Tropine)莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪醇含氮的醇(莨菪醇)莨菪醇(Tr63莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物硫酸莨菪碱硫酸阿托品莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物硫酸硫酸64莨菪烷类抗胆碱药物的分析性质区别硫酸莨菪碱硫酸阿托品熔点、溶解度、旋光度、分子量莨菪烷类抗胆碱药物的分析性质区别硫酸硫酸熔点、溶解度、旋光度65莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸山莨菪碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸山莨菪碱66莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸东莨菪碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸东莨菪碱67莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物丁溴酸东莨菪碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物丁溴酸东莨菪碱68二、主要性质1.水解性（酯水解生成醇和酸）阿托品莨菪醇莨菪酸2.碱性与生物碱沉淀剂产生有色沉淀

阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子，较强的碱性，易于酸成盐，如阿托品pKb1为4.35.二、主要性质1.水解性（酯水解生成醇和酸）阿托品69二、主要性质二、主要性质70一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)原理：莨菪烷类生物碱结构中的酯键水解后生成莨菪酸，经发烟硝酸加热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化钾的醇溶液和固体氢氧化钾作用脱羧，转化成具有共轭结构的阴离子而显深紫色。二、鉴别试验托烷生物碱类的特征反应，鉴别阿托品和莨菪碱类一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)原理：莨菪烷71一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇2～3滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。二、鉴别试验莨菪酸硝基化脱羧化共轭结构深紫一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)取供试品约172二、氧化反应(与硫酸-重铬酸钾的反应）二、鉴别试验二、氧化反应(与硫酸-重铬酸钾的反应）二、鉴别试验73三、沉淀反应生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀二、鉴别试验生物碱沉淀试剂反应条件及结果碘化铋钾试液橙红或棕红色沉淀碘化钾碘试液棕色或棕褐色沉淀碘化汞钾试液在酸性或碱性溶剂中生成白色或淡黄色沉淀三硝基苯酚试液结晶性沉淀并有特定熔点硅钨酸试液白色、淡黄色或黄棕色沉淀磷钨酸试液酸性或中性溶液中，淡黄色沉淀三、沉淀反应生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性74三、沉淀反应二、鉴别试验三、沉淀反应二、鉴别试验75四、光谱鉴别法紫外光谱法一般通过比较药物的或吸收光谱的一致性以及吸光系数来进行鉴别二、鉴别试验四、光谱鉴别法紫外光谱法一般通过比较药物的二、鉴别试验76四、光谱鉴别法红外光谱法ChP收载的原料药一般都采用红外光谱法进行鉴别二、鉴别试验四、光谱鉴别法红外光谱法ChP收载的原料药一般都采用红外光谱77五、色谱鉴别法色谱法一般用于已知生物碱的鉴别，主要有TLC、HPLC、GC、PC等二、鉴别试验五、色谱鉴别法色谱法一般用于已知生物碱的鉴别，主要有TLC、78六、硫酸盐和溴化物的反应药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在通过加沉淀试剂如硝酸银等生成溴化银沉淀或加入氯试剂生成溴溶于三氯甲烷而显色二、鉴别试验六、硫酸盐和溴化物的反应药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在通79Chp氢溴酸东莨菪碱的鉴别：六、硫酸盐和溴化物的反应Chp氢溴酸东莨菪碱的鉴别：六、硫酸盐和溴化物的反应80三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺洋金花粗粉乙醇/渗漉渗漉液减压蒸馏浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3,CHCl3/提取总生物碱Na2CO3,CHCl3/分离东莨菪碱HBr/成盐氢溴酸东莨菪碱（粗品）75%C2H5OH/精制成品根据其制备工艺，本品可通过酸度、其它生物碱、和易氧化物质检查进行控制三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺洋金花粗粉乙醇/81一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查酸度东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱盐、通过其5%的水溶液pH为4.0~5.5，可控制酸性杂质三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查酸度东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几82一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及83一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及84一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查其它生物碱本品水溶液加入氨水试液不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，则易产生混浊。三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查其它生物碱本品水溶液加入氨水试液不85本品水溶液一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查检查方法：本品水溶液一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查检查方法：86其他生物碱ab其他生物碱ab87二、硫酸阿托品硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光度测定法对莨菪碱杂质进行检查ChP用HPLC法检查其中有关物质，通过峰面积的比值及保留时间来控制杂质限度三、特殊杂质与检查二、硫酸阿托品硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体88第四节含量测定莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂量较少，因此测定方法要专属、灵敏:

酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色谱法第四节含量测定莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂89UV

酸性染料比色法在一定的pH条件下，某些生物碱药物可与某些酸性染料结合而呈色，进而可用分光光度法进行测量第四节含量测定UV酸性染料比色法在一定的pH条件下，某些生物碱药物可与某90酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行含量测定第四节含量测定酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚91莨菪烷类抗胆碱药物又课件92酸性染料比色法第四节含量测定酸性染料比色法第四节含量测定93影响因素

水相最佳pH值：使得BH+和In-最多第四节含量测定影响因素水相最佳pH值：使得BH+和In-最多第四节含94影响因素

水相最佳pH值：使得BH+和In-最多pH过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低影响离子对的形成；pH过高，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成，因此须有一个最佳pH值存在，使离子对生成最有利。其选择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有机相的分配系数而定第四节含量测定影响因素水相最佳pH值：使得BH+和In-最多pH过低抑制95影响因素

酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以。但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定结果。第四节含量测定影响因素酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量96影响因素有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想一般