DNA印迹杂交
NorthernBlot湖南师范大学生命科学学院刘如石博士副教授一实验目的1掌握Northernblot的实验原理与操作技术2了解Northernblot的实验在分子生物学与转基因领域的应用二实验原理....NorthernBlot湖南师范大学生命科学学院刘如石博士副教授.一、实验目的。
DNA印迹杂交Tag内容描述:<p>1、NorthernBlot 湖南师范大学生命科学学院刘如石博士 副教授 一 实验目的 1 掌握Northernblot的实验原理与操作技术 2 了解Northernblot的实验在分子生物学与转基因领域的应用 二 实验原理 在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳 然后将分离的RNA转移到尼龙膜 然后用放射性标记的探针进行杂交检测 最后进行放射性自显影 用途 检测样品中是否含有基因的转录产物。</p><p>2、,1,NorthernBlot,湖南师范大学生命科学学院刘如石博士/副教授,2,.,一、实验目的:1、掌握Northernblot的实验原理与操作技术;2、了解Northernblot的实验在分子生物学与转基因领域的应用。,3,.,二、实验原理:在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,然后将分离的RNA转移到尼龙膜,然后用放射性标记的探针进行杂交检测,最后进行放射性自显影。用途:检测样。</p><p>3、分子生物学方法之 Northern印迹杂交技术 原理 核酸分子杂交 molecularhybridization 利用不同来源但互补配对的核酸单链之间 包括DNA DNA DNA RNA RNA RNA 能够特异性结合形成杂合双链的特性 从而对目的核酸分子进行定性和定量分析的技术 NorthernBlotting 检测RNA Northern杂交是用于RNA定量和定性分析的常用技术 它是将RNA分。</p><p>4、Northern Blot,湖南师范大学生命科学学院 刘如石 博士/副教授,一、实验目的: 1、掌握Northern blot的实验原理与操作技 术; 2、了解Northern blot的实验在分子生物学 与转基因领域的应用。,二、实验原理: 在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,然后将分离的RNA转移到尼龙膜,然后用放射性标记的探针进行杂交检测,最后进行放射性自显影。用途:检测样品。</p><p>5、NorthernBlot,/副教授,1,学习交流PPT,一、实验目的:1、掌握Northernblot的实验原理与操作技术;2、了解Northernblot的实验在分子生物学与转基因领域的应用。,2,学习交流PPT,二、实验原理:在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,然后将分离的RNA转移到尼龙膜,然后用放射性标记的探针进行杂交检测,最后进行放射性自显影。用途:检测样品中是否含有基因的。</p><p>6、蛋白免疫印迹杂交(蛋白免疫印迹杂交(Western Blot)技术手册)技术手册 蛋白免疫印迹杂交(Western Blot WB)是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离,再转移到杂 交膜(blot)上,然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。WB 是进行蛋白质分析最流行和 成熟的技术之一。本指南讨论 Western Blot 操作方法及常见问题分析,有助于成功完成。</p><p>7、蛋白免疫印迹杂交(蛋白免疫印迹杂交(Western Blot)图图示示 蛋白免疫印迹杂交(Western Blot ,WB)是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离,再转 移到杂交膜(blot)上,然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。WB 是进行蛋白质分 析最流行和成熟的技术之一。 培养细胞总蛋白提取试剂 哺乳动物组织总蛋白提取试剂。</p><p>8、第八章印迹杂交技术,Molecularhybridization,指将样品(核酸或蛋白质)分离并转移到固相载体上,然后在载体上利用特异性的反应来检测样品的一种方法。,印迹技术(blotting),印迹法分类:,SouthernBlotingDNA杂交NorthernBlotingRNA-DNA杂交WesternBloting蛋白质印迹,核酸分子杂交的基本原理,核酸变性:在某些理化因素作用下,核。</p><p>9、第十二章第十二章 印迹杂交印迹杂交技术技术 Molecular hybridizationMolecular hybridization 指将指将电泳分离的电泳分离的样品(核酸或蛋样品(核酸或蛋 白质白质)从凝胶转移到印迹膜上)从凝胶转移到印迹。</p><p>10、加 入3.6ml 10 X Denaturing Gel buffer, 轻轻振 荡混匀。注意尽量遵免产生气泡。 G) 将捻肤倒入制肤扳中, 插 上梳子。 注: 肤 的辱度不 能超 过0.5cm 。 肤在室温下完全凝固后,将胶转移列电泳槽中, 加入1 X MOPS Gel Running buffer 盖 过肤 面 约 1cm。 检杏点样孔。 4. RNA 样品的制备: 在R。</p><p>11、基本概念及原理 Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法 一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段 将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上 经干烤或者。</p><p>12、核酸印迹杂交技术 蓝白斑筛选技术 组内贡献: 核酸印迹杂交技术 简介:核酸杂交方法是一种分子生物学的标准技术,用于检测 DNA或RNA分子的特定序列(靶序列)。 经典的核酸杂交方法是将DNA或RNA先转移并固定到硝酸纤 维素或尼龙膜上,与其互补的单链DNA或RNA探针用放射性或非 放射性标记,在膜上杂交时,探针通过氢键与其互补的靶序列结 合,洗去未结合的游离探针后,经放射自显影或显色反应检测特 异结合的探针。 经典的核算杂交方法主要包括:DNA印迹杂交(Southern blot)RNA印迹杂交(Northern blot)以及斑点杂交和原位杂交。 这里主要。</p><p>13、第三节 核酸分子杂交技术,DNA印迹与杂交技术 RNA印迹与杂交技术,一、 分子杂交的基本方法,Southern 印迹法 Northern 印迹法 斑点印迹杂交 原位杂交 Western 印迹法 液相杂交,固相杂交,二、核酸分子杂交的基本原理,具有互补序列两条单链核酸分子在一定条件下 按碱基互补配对原则退火形成双链的过程。 杂交的双方是待测核酸和已知核酸序列,已知核酸序列称探针。,Hybridization of Nucleic Acids,RNA,DNA1,DNA2,DNA,Southern hybridization,Northern hybridization,探针,(一)DNA变性与复性,DNA变性 1、定义:某些理化因素导致两条DNA链间。</p><p>14、第三节核酸分子杂交技术,DNA印迹与杂交技术RNA印迹与杂交技术,一、分子杂交的基本方法,Southern印迹法Northern印迹法斑点印迹杂交原位杂交Western印迹法液相杂交,固相杂交,二、核酸分子杂交的基本原理,具有互补序列。</p><p>15、第三节核酸分子杂交技术,DNA印迹与杂交技术RNA印迹与杂交技术,1,一、分子杂交的基本方法,Southern印迹法Northern印迹法斑点印迹杂交原位杂交Western印迹法液相杂交,固相杂交,2,二、核酸分子杂交的基本原理,具有互补序列两条单链核酸分子在一定条件下按碱基互补配对原则退火形成双链的过程。杂交的双方是待测核酸和已知核酸序列,已知核酸序列称探针。,3,Hybridiz。</p>