微生物样本采集的标准化与规范化PPT课件

微生物样本采集的标准化与规范化1基本原则（一） 采集标本前局部应做好准备工作，标本必须直接采自病变部位。 尽可能在合适的时间采集。例如：清晨的痰和尿液含菌量较多，因此是采集的最佳时间。了解感染性疾病的自然过程有助于决定采集何种标本及采集时间。必要的免疫学知识对解释血清学结果十分有用。 应尽量采集足量的标本送实验室。例如：成人的血培养标本每次宜采集 10ml以上。2基本原则（二） 使用合适器械及运送容器很重要，所有标本都应使用无菌容器；棉拭子常与运送培养基配合使用，但棉拭子不宜用作厌氧菌培养。任何送厌氧培养的标本应做到在厌氧环境下运送。 培养标本尽可能在应用抗菌药物前采集，解释培养结果时也应考虑抗菌药物使用史。有些细菌如淋病奈瑟球菌、化脓性链球菌、流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟球菌等对抗菌药物非常敏感。 对送检标本有特殊要求时，应在化验单上清楚标明，或直接与实验室联系。3常见标本类型 血液、骨髓、脓液 痰、尿、便 胸水、腹水、脑脊液、胆汁、胰液 伤口：引流液、分泌物 病变组织：炎性组织、坏死组织、脓苔 特定部位穿刺液：胰腺周围、囊肿内部 中心静脉插管 体内留置各种引流管41.血培养 疑为菌血症、败血症和脓毒血症的患者，一般在发热初期和发热高峰期采集，如已用抗菌药物治疗的患者，应在下次用药前采集。560 30 60Time (min)Temp体温Chills寒战Blood Cultures血培养BACTEREMIALEVEL菌血症的水平7采血套数89表皮葡萄球菌的临床意义2 3套血培养，有助于污染的判断。Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333采集 1套无法判断是病原菌还是污染菌。1011厌氧瓶平均报阳时间快于需氧瓶12采血量 (ml)与检出率的关系Overall血培养物每增加一毫升，真性菌血症成年人微生物的检出率增加 3但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳比例为 1： 4 1： 1013皮肤消毒剂： 推荐使用碘酊、次氯酸和洗必太或碘伏。 碘酊、次氯酸和洗必太的消毒效果要优于碘伏。 消毒剂需要有足够的作用时间以保证消毒效果（碘酊作用 30s；碘伏作用 1.52 min）。 洗必泰的作用时间和碘酊一样，但是没有过敏反应，因此不必擦去，但不能用于小于 2个月的婴儿。 14操作方法 以 75%酒精消毒培养瓶胶塞，等待 1分钟。消毒静脉穿刺部位：以碘酊拭子从穿刺中心开始向四周同心消毒，待干；以 75%酒精脱碘；不要再接触穿刺部位；抽血 8-10 毫升 /次，注入培养瓶；直接在培养瓶上注明患者姓名、送检日期， 2小时内送检。 培养瓶消毒程序：用 75酒精擦拭血培养瓶橡皮塞（不能用含碘消毒剂），作用 60s。用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面残余液体然后注入血液。 15需氧和厌氧血培养瓶血培养标本采集流程16采集次数 急性脓毒血症 10分钟内从不同部位抽血 2-3次； 急性感染性心内膜炎 从不同部位抽血 3次，每次相隔 1-2小时； 亚急性感染性心内膜炎 从不同部位抽血 3次，每次相隔 15分钟以上，如果 24小时内培养为阴性，则同上再抽血培养 3次。 不明原因发热 从不同部位抽血 2-3次，每次相隔1小时以上；如果 24小时内培养为阴性，则同上再抽血培养 2-3次。172.呼吸道标本 下呼吸道标本1）支气管肺泡灌洗液，支气管刷或液，气管吸出物（可避免正常菌群污染，应首选）：将吸出物或洗液置入 “U”形管中；将支气管刷置入有盐水的无菌容器中。标本量 1毫升。 2小时，室温， 1次 /天。182）咯出痰 在护士或医师的指导下收集痰标本；让患者用水漱口以去除口腔粘膜表面的正常菌群；指导患者深咯，收集下呼吸道痰 (不要鼻后液体 )。留入无菌容器。 2小时，室温，1次 /天。乳酪样痰、粘液痰、 鲜血痰、 唾液血痰 193）诱导痰嘱患者刷牙 (主要是牙龈和舌头 )后用水漱口；使用喷雾器，让患者吸入 3-10%的无菌盐水 25毫升；将诱导出的痰液收集入洁净或无菌容器中。其它同前。20标本要求 最理想的标本为： 10个鳞状细胞 / 100倍视野， 25个多核白细胞。 标本最小量：细菌， 1毫升；真菌， 3-5毫升；分枝杆菌， 5-10毫升。鳞状上皮细胞 革兰染色 200 白细胞 革兰染色 200 21结核杆菌检查标本留取 浓缩集菌法查抗酸杆菌：可嘱患者咯晨痰 1-2口或更多于洁净干燥容器中。 结核菌培养：应停患者当晚抗结核药物一次，次晨咳痰 1-2口送检。22上呼吸道：1）口腔：用拭子去除损伤表面的分泌物或碎屑，弃去拭子；用另一拭子用力抹取损伤部位，不要接触正常组织。用拭子肉汤培养基运送， 2小时，室温， 1次 /天，不鼓励采集表层组织标本检测细菌，应选用供活检的标本或用针抽吸出的标本。可检测放线菌及诺卡菌。232）鼻：预先用无菌盐水湿润拭子，将拭子插入鼻孔 2厘米；靠着鼻粘膜旋转拭子。 2小时，室温， 1次 /天，前鼻部培养可用于检测葡萄球菌和链球菌携带者，可用鼻窥器。243）鼻咽：经鼻轻柔插入拭子至后鼻咽部；缓慢旋转拭子 5秒以吸附分泌物；取出拭子置入肉汤培养基或立刻送至细菌室。肉汤拭子 2小时，室温；拭子： 15分钟，室温， 1次 /天。4）咽用压舌板压舌；用无菌拭子在后咽部、扁桃体和其它感染部位采集标本；怀疑白喉可用无菌拭子从患者病变部位假膜及其边缘取材立刻送检。肉汤拭子 2小时，室温；拭子： 1小时，室温， 1次 /天。25咽拭子标本采集263. 尿 外尿道多寄居有正常菌群，故采集尿液时更应注意无菌操作，常用清洁中段尿作为送检标本。中段尿用于细菌培养，最好用晨尿。诊断泌尿系感染的细菌学标准一般为菌落计数 105CFU/ml。针对于老年人多重症及卧床患者排尿困难，可相应采用导尿管采集标本。采集和容器为无菌尿瓶，标本量 1毫升，条件 2小时，室温， 1次 /天。271）女性中段尿：用肥皂和水彻底清洗尿道口；用湿润纱垫擦拭；分开阴唇，排尿；排出几毫升后收集中段尿，不终止排尿。2）男性中段尿：用肥皂和水清洗阴茎头；用湿润纱垫擦拭；卷起包皮，排尿；排出几毫升后以无菌螺盖瓶直接收集中段尿，不终止排尿。283）插导尿管：用肥皂和水彻底清洗尿道口；用湿润纱垫擦拭；以无菌术将导尿管插入膀胱；排出约 15毫升尿后，将尿收集至无菌容器中。此操作过程有可能将尿道细菌带入膀胱，增