血型鉴定常见的疑难问题分析及处理PPT课件

* 1血型鉴定常见的疑难问血型鉴定常见的疑难问题分析及处理题分析及处理* 2概述概述随着输血医学的发展，输血安全问题日益引起随着输血医学的发展，输血安全问题日益引起各方面的关注，输血安全主要体现在两方面内容各方面的关注，输血安全主要体现在两方面内容，一是经血传播疾病问题，二是血液免疫学方面，一是经血传播疾病问题，二是血液免疫学方面的问题即血型血清方面的问题。的问题即血型血清方面的问题。* 3概述概述n 血型血清学不同于一般的血型血清学不同于一般的 临床医学检验临床医学检验 ，有其自身特，有其自身特点。一般临床医学检验的工作流程十分明了，即接受点。一般临床医学检验的工作流程十分明了，即接受临床医生的申请，按各项检验的操作规程完成其申请临床医生的申请，按各项检验的操作规程完成其申请内容并反馈结果。而血型血清学方面的检查则与此有内容并反馈结果。而血型血清学方面的检查则与此有很大的不同，临床医生及各医院输血科向血站和血液很大的不同，临床医生及各医院输血科向血站和血液中心血型参比实验室提出的检测申请不外有以下几种中心血型参比实验室提出的检测申请不外有以下几种情况情况 : * 4血型参比实验室涉及的检测内容血型参比实验室涉及的检测内容n 血型鉴定困难血型鉴定困难n 交叉配血困难交叉配血困难n 输血反应原因分析输血反应原因分析n 其它：如母婴血型不合新生儿溶血病检测其它：如母婴血型不合新生儿溶血病检测、 coombs试验、血小板抗体检测等。试验、血小板抗体检测等。 * 5ABO血型常规定型方法血型常规定型方法 玻片法、纸片法玻片法、纸片法 试管法试管法 微量板法微量板法 微柱凝集法微柱凝集法* 6疑难血型鉴定常用的辅助实验疑难血型鉴定常用的辅助实验n 吸收试验吸收试验n 放散试验（常用热放散）放散试验（常用热放散）n DTT（二硫苏糖醇）处理自身凝集红细胞（二硫苏糖醇）处理自身凝集红细胞n 唾液血型物质测定（中和试验）唾液血型物质测定（中和试验）n 分子生物学技术进行基因型检测分子生物学技术进行基因型检测* 7血型血清学的工作特点血型血清学的工作特点n 鉴定技术因不同情况而异，没有一个固定的格式，因此在试验鉴定技术因不同情况而异，没有一个固定的格式，因此在试验过程中随时分析试验结果，选择最有效的方案过程中随时分析试验结果，选择最有效的方案 (程序程序 )是必要的是必要的。n 血型参比实验室必须全面分析病历情况，有选择的运用相应的血型参比实验室必须全面分析病历情况，有选择的运用相应的实验手段来解决问题，另外在接受检测申请时，还应详细了解实验手段来解决问题，另外在接受检测申请时，还应详细了解患者的既往史患者的既往史 -性别、年龄、民族、临床诊断及临床症状和患者性别、年龄、民族、临床诊断及临床症状和患者的输血史和用药史，如女性已婚患者还应询问其妊娠史。这些的输血史和用药史，如女性已婚患者还应询问其妊娠史。这些都对解决问题至关重要都对解决问题至关重要 。* 8血型血清学的工作特点血型血清学的工作特点n 例如：对于白血病患者，应考虑到由于疾例如：对于白血病患者，应考虑到由于疾病原因而引起血型抗原减弱的可能性；对病原因而引起血型抗原减弱的可能性；对消化系统的疾病的患者应考虑到由于产生消化系统的疾病的患者应考虑到由于产生“ 类类 B物质物质 ” 而导致血型鉴定错误的可能而导致血型鉴定错误的可能性；对于多次输血的患者应考虑其体内产性；对于多次输血的患者应考虑其体内产生免疫性抗体的可能性，等等。生免疫性抗体的可能性，等等。* 9疑难血型鉴定疑难血型鉴定n 共同特点共同特点 :正反定型不。正反定型不。* 10ABO血型正血型正 反定型反定型 不符及其原因不符及其原因1.技术和管理错误技术和管理错误2.正定型正定型 -红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题3.反定型反定型 -血清自身相关问题血清自身相关问题* 11一、技术和管理错误一、技术和管理错误（ 1）标本或试剂搞错，造成假阳性或假阴性结果。）标本或试剂搞错，造成假阳性或假阴性结果。（ 2）器材不洁产生假阳性结果。）器材不洁产生假阳性结果。（ 3）试剂污染或失效产生假阳性或假阴性结果。）试剂污染或失效产生假阳性或假阴性结果。（ 4）离心过度或不足，产生假阳性或假阴性结果。）离心过度或不足，产生假阳性或假阴性结果。* 12一、技术和管理错误一、技术和管理错误（ 5）阳性反应产生溶血现象未能识别，导致假阴性结果）阳性反应产生溶血现象未能识别，导致假阴性结果。（ 6）漏加试剂，产生假阴性结果。）漏加试剂，产生假阴性结果。（ 7）结果记录或判断错误，产生假阳性或假阴性结果。）结果记录或判断错误，产生假阳性或假阴性结果。（ 8）细胞与血清比例不适当，产生假阳性或假阴性结果）细胞与血清比例不适当，产生假阳性或假阴性结果。* 13二二 、正定型、正定型 -红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题1.红细胞致敏红细胞致敏 直接抗球蛋白试验阳性的红细胞（如自身直接抗球蛋白试验阳性的红细胞（如自身免疫性溶血性贫血患者的红细胞）在含高蛋白介质的试免疫性溶血性贫血患者的红细胞）在含高蛋白介质的试剂中可发生凝集，产生假阳性结果。剂中可发生凝集，产生假阳性结果。2.异常基因型异常基因型 ABO亚型的弱抗原常规方法难以检出，产亚型的弱抗原常规方法难以检出，产生假阴性结果。生假阴性结果。3.Cis-AB型（顺式型（顺式 AB型）型） 指从父母的一方同时得到指从父母的一方同时得到 A和和 B基因在一条染色体上，而另一条染色体上是从父母中另基因在一条染色体上，而另一条染色体上是从父母中另一方来的一方来的 O基因。顺式基因。顺式 AB细胞的细胞的 B抗原较弱，类似抗原较弱，类似 B3亚型亚型。 * 14二、二、 正定型正定型 -红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题4.嵌合体血型嵌合体血型 体内有两群红细胞，定型时显示体内有两群红细胞，定型时显示 “ 混混合外观凝集合外观凝集 ” 现象。也可见于现象。也可见于 ABO不同型的骨髓移植不同型的骨髓移植术后。真正的嵌合体非常少见，可出现于双胞胎，术后。真正的嵌合体非常少见，可出现于双胞胎，在胚胎期由于血管的吻合使得在胚胎期由于血管的吻合使得 2个胎儿的血液发生混个胎儿的血液发生混合，合， 2种血液都被机体认做自我，不产生抗体。人工种血液都被机体认做自我，不产生抗体。人工嵌合状态可出现于输血后（如嵌合状态可出现于输血后（如 O型红细胞输给型红细胞输给 A或或 B型型人），骨髓移植术后，交换输血及母体、胎儿出血人），骨髓移植术后，交换输血及母体、胎儿出血。 * 15二、二、 正定型正定型 -红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题5.疾病因素导致抗原减弱疾病因素导致抗原减弱 常见的如白血病、何杰金病常见的如白血病、何杰金病、 10号染色体转位、红细胞系统极度增生如海洋性贫血号染色体转位、红细胞系统极度增生如海洋性贫血等病人等病人 ABO血型抗原可受到暂时抑制，抗原减弱检出困血型抗原可受到暂时抑制，抗原减弱检出困难。红细胞难。红细胞 ABO抗原减弱与病程有关，病情缓解时抗原抗原减弱与病程有关，病情缓解时抗原性会恢复。性会恢复。 6.红细胞多凝集现象红细胞多凝集现象 当病人感染细菌或病毒后，病毒或当病人感染细菌或病毒后，病毒或细菌产生的酶使红细胞上掩蔽的细菌产生的酶使红细胞上掩蔽的 T抗原暴露激活，由于抗原暴露激活，由于正常人血清中都含有抗正常人血清中都含有抗 -T抗体，因此可与正常人血清产抗体，因此可与正常人血清产生凝集反应，生凝集反应， 正定型正定型 试验假阳性。试验假阳性。 * 16二、二、 正定型正定型 -红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题7.获得性类获得性类 B 由于革兰氏阴性杆菌的作用，红细胞可由于革兰氏阴性杆菌的作用，红细胞可获得获得 “ 类类 B” 的活性。的活性。 (肠梗阻、结肠、直肠癌或其肠梗阻、结肠、直肠癌或其他下消化道疾病时肠壁通透性增加，细菌多糖入血他下消化道疾病时肠壁通透性增加，细菌多糖入血，使，使 A型患者出现获得性类型患者出现获得性类 B现象现象 ) 8.可溶性血型物质增多可溶性血型物质增多 胃或胰腺恶性肿瘤患者血清中胃或胰腺恶性肿瘤患者血清中可能含有过多的可溶性血型物质，这些物质中和抗可能含有过多的可溶性血型物质，这些物质中和抗 A（ B）血清从而影响正定型结果。）血清从而影响正定型结果。* 17二、二、 正定型正定型 -红细胞自身相关问题红细胞自身相关问题9.红细胞发生自凝现象红细胞发生自凝现象 患者血清中的高效患者血清中的高效价自身冷凝集素使红细胞发生凝集。价自身冷凝集素使红细胞发生凝集。10. 近期输血近期输血 曾异型输血，使病人血液标曾异型输血，使病人血液标本成为不同型别的红细胞混合物，定型时本成为不同型别的红细胞混合物，定型时显示显示 “ 混合外观凝集混合外观凝集 ” 现象现象 。* 18三、三、 反定型反定型 -血清自身相关问题血清自身相关问题1.血浆置换治疗后血浆置换治疗后 近期内进行大量的血浆置换治疗，影近期内进行大量的血浆置换治疗，影响抗体效价，造成反定型困难。响抗体效价，造成反定型困难。2.异常的血浆蛋白异常的血浆蛋白 病人血浆中异常的白蛋白、球蛋白比病人血浆中异常的白蛋白、球蛋白比例和高浓度的纤维蛋白原等能导致缗钱状形成，造成假例和高浓度的纤维蛋白原等能导致缗钱状形成，造成假凝集现象，多见于如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、何凝集现象，多见于如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、何杰金淋巴瘤、严重的肝病等患者杰金淋巴瘤、严重的肝病等患者 。3.高分子聚合物的影响高分子聚合物的影响 血浆增容剂（葡聚糖、血浆增容剂（葡聚糖、 PVP等）也等）也会引起缗钱状凝集导致假阳性结果。会引起缗钱状凝集导致假阳性结果。 * 19三、三、 反定型反定型 -血清自身相关问题血清自身相关问题4.不规则抗体或自身冷凝集素的存在不规则抗体或自身冷凝集素的存在 受检者血浆中含受检者血浆中含有有 ABO血型抗体以外的血型抗体以外的 IgM类不规则抗体与试剂类不规则抗体与试剂 A、 B、O细胞上的相应抗原起反应。细胞上的相应抗原起反应。5.低丙种球蛋白血症低丙种球蛋白血症 低丙种球蛋白血症病例低丙种球蛋白血症病例 (如白血如白血病、淋巴瘤及使用免疫抑制剂的患者、先天丙种球蛋病、淋巴瘤及使用免疫抑制剂的患者、先天丙种球蛋白缺乏的患者、免疫缺陷的患者白缺乏的患者、免疫缺陷的患者 ) 可能会因免疫球蛋可能会因免疫球蛋白水平全面下降使血清定型时不见凝集或仅见弱凝集白水平全面下降使血清定型时不见凝集或仅见弱凝集反应。反应。* 20三、三、 反定型反定型 -血清自身相关问题血清自身相关问题6.年龄因素年龄因素 在未产生自己抗体的婴儿、由母亲被在未产生自己抗体的婴儿、由母亲被动获得抗体的婴儿，或抗体水平下降的老人，试动获得抗体的婴儿，或抗体水平下降的老人，试验时可出现不见凝集或仅见弱凝集反应等异常结验时可出现不见凝集或仅见弱凝集反应等异常结果。果。7.骨髓移植术后骨髓移植术后 ABO不同型骨髓移植患者术后。不同型骨髓移植患者术后。8.纤维蛋白原的影响纤维蛋白原的影响 使用血浆或凝固不完全的血使用血浆或凝固不完全的血清会形成很小的纤维蛋白凝集包裹的红细胞凝块清会形成很小的纤维蛋白凝集包裹的红细胞凝块。 * 21小小 结（一）结（一）一、红细胞抗原增多（额外的反应）的原因一、红细胞抗原增多（额外的反应）的原因n 红细胞致敏：直接抗人球蛋白试验阳性。红细胞致敏：直接抗人球蛋白试验阳性。n 红细胞多凝集现象红细胞多凝集现象n 红细胞发生自凝现象红细胞发生自凝现象n 获得性类获得性类 Bn 其它：近期异型输血、嵌合体血型其它：近期异型输血、嵌合体血型 二、红细胞抗原减弱的原因二、红细胞抗原减弱的原因n 异常基因型（异常基因型（ ABO亚型等）亚型等）n Cis-AB型（顺式型（顺式 AB型）型）n 疾病因素导致抗原减弱（常见于白血型等血液病患者）疾病因素导致抗原减弱（常见于白血型等血液病患者）n 可溶性血型物质增多（常见于胃或胰腺恶性肿瘤患者）可溶性血型物质增多（常见于胃或胰腺恶性肿瘤患者）* 22小小 结（二）结（二）三、血型抗体增多（额外的反应）的原因三、血型抗体增多（额外的反应）的原因n 异常的血浆蛋白（串钱状假凝集）：多见于如多发性异常的血浆蛋白（串钱状假凝集）：多见于如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、何杰金淋巴瘤、严重的肝病骨髓瘤、巨球蛋白血症、何杰金淋巴瘤、严重的肝病等患者等患者 。n 高分子聚合物的影响：血浆增容剂（葡聚糖、高分子聚合物的影响：血浆增容剂（葡聚糖、 PVP等等）也会引起缗钱状凝集导致假阳性结果。）也会引起缗钱状凝集导致假阳性结果。 n 不规则抗体或自身冷凝集素的存在不规则抗体或自身冷凝集素的存在n 纤维蛋白原的影响纤维蛋白原的影响* 23小小 结（三）结（三）四、血型抗体减弱的原因四、血型抗体减弱的原因n 血浆置换治疗后血浆置换治疗后n 低丙种球蛋白血症低丙种球蛋白血症n 年龄因素：婴儿、老年人抗体水平低。年龄因素：婴儿、老年人抗体水平低。n 骨髓移植术后骨髓移植术后* 24正正 反定型反定型 不符一般处理程序不符一般处理程序一、一、 询问、查阅病史询问、查阅病史n 患者的年齡患者的年齡n 患者的病史患者的病史n 患者的近期输血史患者的近期输血史n 患者的近期用药史患者的近期用药史n 患者是否进行了骨髓移植患者是否进行了骨髓移植n 患者以前的血型患者以前的血型n 患者是否进行过血浆置换术患者是否进行过血浆置换术* 25正正 反定型反定型 不符一般处理程序不符一般处理程序二、二、 使用试管法重做试验并判断可能的原因使用试管法重做试验并判断可能的原因试管法定型的优点试管法定型的优点1.可以反复离心看结果。可以反复离心看结果。2.可以随意延长抗原抗体反应时间，可以改可以随意延长抗原抗体反应时间，可以改 变反应温度（变反应温度（ 4 、 37 孵育），有利于弱抗原、抗孵育），有利于弱抗原、抗体的检出或排除冷凝集素的干扰。体的检出或排除冷凝集素的干扰。3.可以观察红细胞混合外观现象。可以观察红细胞混合外观现象。4.可以观察红细胞溶血现象。可以观察红细胞