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文档简介

亚光市场部 张天成LPT制片技术及发展前瞻性宫颈癌现状宫颈癌发病率在全球女性恶性肿瘤中排第二位,全世界每年约有 45万名妇女罹患宫颈癌。在我国,每年新发病例约 15万,约 8万患者死于宫颈癌。宫颈癌是一种可防可治的癌症宫颈癌的发展是一个长期的过程,若能在病变早期进行筛查,就能阻止癌变的发生、发展。宫颈癌筛查的重点,是在无自觉症状时期,发现癌前病变,在非癌时期及早进行临床诊治,从而预防、阻止癌变的发生。 TCT产品发展的过程巴氏涂片巴氏涂片指宫颈脱落细胞涂片 ,是指从子宫颈部取少量的细胞样品,放在载玻片上,然后在显微镜下研究是否异常。等级划分:分 5级自 60多前问世以来,巴氏涂片使当时宫颈癌病发率在世界范围 内下降了 70% 90%。TCT产品发展的过程l TCT-新柏氏( ThinPrep 2000)于 95年通过FDA认证,推出市场用于临床, 1999年进入中国市场。在美国已逐步被替代。主要方法是将宫颈脱落细胞洗入放有细胞保存液的小瓶中,刮片毛刷在小瓶内搅拌数十钞钟,再通过高精密度过滤膜过滤后,将标本中的杂质分离,取滤后的上皮细胞制成直径为 20mm薄层细胞于载玻片上,95%酒精固定,经巴氏染色、封片,由细胞学专家肉眼在显微镜下阅片,按 TBS法作出诊断报告。该设备一次处理一份标本。TCT产品发展的过程l 随后,美国生产商三路影像公司( TriPath Imaging)正式推出 LCT- 超柏(AutoCyte/PrepStain),即自动细胞学检测系统(autocyto prep cytologic test),又称液基细胞学检测系统( Liquid-based cytologic test, LCT)。它于99年通过 FDA认证,正式推出美国市场, 2001年底在我国注册,进入中国市场。它的基本方法是将收集的细胞保存液,通过比重液离心后,经自然沉淀法将标本中的黏液、血液和炎性细胞分离,收集余下的上皮细胞制成直径为 13mm超薄层细胞于载玻片上。制片类型l 膜式l 离心l 沉降TCT液基超薄制片技术l 以美国新百氏机器为代表l 主要采用了物理震动和高速旋转技术首先将细胞和粘液打散分开;l 然后在附有膜 8微米孔的膜面的膜筒中,加一负气压,将细胞吸附在膜面上,小于 8微米的杂质和无用的液体从膜筒中排掉;l 再在膜筒的膜面压在经过处理的玻片上,并在膜筒中加一正气压,将细胞转移到玻片上,形成薄层细胞玻片。 离心涂片法 l 以赛涂、利普,为代表。l 由人工进行操作,进行离心分离,人工操作进行细胞提取,人工操作进行离心制片,自然沉降法 l 以美国 LCT-超柏(AutoCyte/PrepStain) 为代表。l 首先利用专门的设备将取材后的保存液经过抽拉破粹后,在注入到事先注入有一定容量的分层液的上面。l 手工将其放到离心机上进行2次离心分层;然后人工除上清,再一次放到离心机上形成细胞团,再由人工放在振荡器上混匀。l 最后放到制片染色机上进行自动制片和染色。总目标为了清晰的观察分析细胞的组织形态,必须在液基中将细胞大量提取,并将细胞薄层排列在组织玻片上,所谓细胞薄层制片,并经细胞染色后,供临床观测分析和诊断。其中关键性技术主要是:l A 由于细胞与粘液等组织裹在一起,要得到比较清晰的细胞制片,就必须将细胞与其它不用的粘液等分离开来;并有效提取。l B 制成薄片:为了有效的在显微镜下对细胞结构、形态进行观测和分析,细胞薄层不能厚,否则极大影响观测效果。l C 自动化制片,最大限度排除人为干扰。 超柏制片机制片方法 l 1. 核对保存液标签与申请单信息 .l 2.确认无误后将保存液置于标本架上;取已打印的条形码,一式三份;一份粘贴在申请单上,一份粘贴在离心管上,第三份备用,将离心管置于标本架对应标本后面 .l 3.将所有标本核对完毕,依次放到标本架上。 超柏制片机制片方法 l 4. 依次向离心管内加入梯度密度液;l 5.震荡标本小瓶,双手各握 1只小瓶,在震荡器上震荡 1520s,并相应变换小瓶震荡的角度;l 6.取注射器置于标本架对应标本前面 。 超柏制片机制片方法l 7.用标本转移机将小瓶中的保存液转移缓缓加至离心管内梯度密度液的上层 .制片方法l 8.将转移后的离心管从标本架上取下,依次放到离心盒内,待所有离心管置于离心盒内;l 9.将离心盒放到离心机内,配平,进行一次离心 .制片方法l 10.将一次离心完的离心盒取出,利用真空泵用黄 Tip头吸取离心管上层的液体,注意不要吸到下层的液体 l 11.将离心盒放到离心机,进行二次离心 .l 12.离心结束后,用手将离心管内的液体轻轻倒掉,注意不要将底部收集到的上皮细胞倒出 l 13.震荡器上震荡离心盒,使收集的上皮细胞充分分散为个体细胞,时间: 1520s l 14. 将载玻片平铺于制片板上,玻片磨砂面朝上,光滑面朝下。将制片舱依次拧到制片板上,将第三份条形码依次贴到玻片磨砂面上。 l 15.将薄片制片机中 4根管束依次伸到相应的试剂瓶中 .l 16.将震荡后的离心盒放到薄片制片机相应位置 .制片方法l 17.开启电脑、薄片制片机、压力泵,启动后,按照提示信息,进入程序主菜单,选择涂片和染色。 制片方法l 18.薄片制片机运行,首先向离心管中加入 1ml的缓冲液,依次加入完毕。 Z杆抓取白 Tip头,在离心管内混合 8次,移取标本至制片舱内,依次转移标本,待标本全部转移至制片舱内,静置 10min,进行染色。 制片方法l 19.每一板染色完毕,报警,将制片板从薄片制片机上取下,依次拧下制片舱,取出玻片,放在玻片架上(玻片架浸泡在无水乙醇、异丙醇等体积混合的液体中)制片方法l 20.将玻片架无水乙醇、异丙醇等体积混合的液体中取出,控去液体,置于二甲苯的染色缸内,依次取出每张玻片,在载玻片粘附细胞处,滴两滴中性树胶,盖上盖玻片(注意封片时不要有气泡),晾干玻片 .产品介绍l 1、 高检出:高度病变以上 (HSIL+)的检出率比传统涂片提高了64.4%,低度病变提高 109%。l 2、取样有效率高: 采样刷的刷头与所采集的细胞一起放入保存液瓶中,经过震荡仪震荡,保证采样刷上的细胞 100%落入保存液中。l 3、特制保存液瓶: 瓶内装 10毫升保存液。有效期 24个月。主要成分为低浓度乙醇 (24%)。常温下保存样本 3周。不灭活。制片过程无须开盖,不造成空气污染,无毒副作用。l 4、设备配置:自动完成全部制片过程,操作简便,无需多台设备,占用空间少。l 5、前期处理:标本不用开瓶,直接上机处理。无需前期复杂处理,提高工作效率。 产品介绍l 6、制片原理先进: 变频技术与离心有机结合,使标本液分层,富集(浓缩) 92%以上的有效诊断细胞。根据病变细胞核浆比增大,比重增大的原理,按比重区分细胞。利用重力快速沉降法制片,诊断细胞自上而下落在载玻片上,增加捕捉病变细胞的机率,最完美的保留各类细胞,并保证细胞的自然形态。 l 7、制片过程标准自动化:在制片过程中,液基细胞制片全自动完成无需人工干预,制片机设定程序,完成标本分散,标本液分层,细胞收集,制片,一键完成全过程。l 8.先进的制片技术: 采用重力快速沉降法制片。载玻片置于标本液底部,标本液最底层的细胞(主要是核浆比较大的病变细胞)粘附在玻片上。因为细胞自上而下地沉降,即使标本液细胞量特别少时,亦可保证载玻片上捕捉到足够的诊断细胞。l 9、涂片直径大:制片的超薄层细胞直径为 20毫米,收集更多的病变细胞,提高检出率。 产品介绍l 10、细胞数量范围广:对细胞要求的数量控制范围为 5千至 12万,同时可根据医生要求,通过计算机调节,控制上片的细胞总量,从而达到薄层制片的效果。 l 11、制片效率高:单片或大批量制片过程不需要人

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