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文档简介

一、培养基的种类二、培养基的制作三、接种四、菌种培养五、银耳混合菌种的分离与制作培养基的分类方法主要有 : 按培养基成分的了分类、按培养基外观的物理状态进行分类、按培养基对微生物的功能作分类等。p天然培养基:利用 动、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。如牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基等 。p组合培养基 :按 微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。如葡萄糖铵盐培养基、淀粉硝酸盐培养基等 。p半组合培养基:指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如,马铃薯蔗糖培养基。一、母种培养基1、马铃薯葡萄糖琼脂培养基( PDA)马铃薯 200g、葡萄糖(或蔗糖) 20g、琼脂 20g、 H2O 1000 mL、 pH 6.5。适用于一般食用菌母种分离与培养,但草菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。 2、综合 马铃薯培养基马铃薯 200g、葡萄糖(或蔗糖) 20g、KH2PO4 2g、 MgSO4 0.5g、维生素 B1 10mg、琼脂 20g、 H2O 1000ml、 pH自然。适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌种分离、保藏。二、 PDA培养基配制方法马铃薯(去皮、去芽眼) 切成片(玉米大小) 称取 200g 1000mL H2O 煮沸 15-20min 双层纱布过滤 取滤液并补足1000mL琼脂 熔化其它营养物质 调节pH(用 HCl或 NaOH) 分装试管 塞上棉塞 捆扎 灭菌(高压蒸气灭菌 15-30min) 制成斜面 检查灭菌效果(即 2830 培养 23d) 阔叶锯末屑 78%,米糠和麦麸 20%,蔗糖 1%,石膏粉 1%,水 120%130%;采用棒式栽培种或袋式菌种有机制作法,酒精消毒蒸汽接种;选高密度低压聚乙烯透气袋机械装袋,顺码锅常压炉灭菌,焖锅后趁热出锅,移入出菇棚冷却,棚内设日接万棒的塑料帐,帐内用来苏水或酒精喷洒消毒后,快速接种法接种,发菌;每出一茬菇后,即停水养菌,待菌丝完全复壮后再刺激催下茬菇;用石灰定期消毒,保持栽培场地碱性环境;发生虫害时用定点诱杀法处理。+ 在无菌条件下将 母种 接到经过灭菌的培养基上,称接种 。 培养基灭菌 后,用经过灭菌的工具(如接种针和吸管等)在无菌条件下接种含菌材料(如样品、菌苔或菌悬液等)于培养基上,这个过程叫做无菌接种操作 。+ 要保证接种成功, 必须要 使接种能在无菌的环境中进行,即须在灭过菌的无菌室或接种箱中进行,而且操作者必须用肥皂洗手,须穿着干净整洁的衣服,最好配戴口罩,接种用的各种用具也应经过灭菌。接种后的母种,置于 25 左右的恒温箱中培养。 23天后检察并剔除霉菌小菌落或细菌小点。纯菌种在培养 715天,即可培养出母种菌丝。原种及栽培种后置于

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