第七章消毒灭菌

广东省食品药品职业技术学校教学目标 1、熟悉微生物的分布情况； 2、掌握消毒灭菌的几个概念； 3、掌握高压蒸汽灭菌法。 4、了解化学消毒灭菌法和生物抗菌法。重点： 物理灭菌法。第一节 微生物的分布 一、土壤中的微生物二、水中的微生物 水环境： 地球的 70%左右由水覆盖，其中溶解和悬浮有机、无机物，流动水有氧渗入可供微生物生长。 微生物种类：水中有机物含量多少决定微生物种类。 作用： 在水生环境的食物链中期关键作用。 光合细菌 浮游生物 无脊椎动物 鱼类三、空气中的微生物 环境： 不利于微生物生长，所以无固定种类。 种类分布： 主要是真菌和细菌，在医院，公共场所所致病菌的数量多。 作用： 可迅速全球传播，对地球上生物繁衍有一定意义。四、人体的微生物第二节 消毒与灭菌一、消毒与灭菌的重要性一、消毒与灭菌的重要性 外科医院：外科医院： 麻醉、止血和抗感染三大技术尚未建立。为了拯救生命，医生只能不顾病人的极大痛苦去切割肢体，用炽热的铁器烙印切口来止血，再缠上一条条 “ 脏 ”布，或让血肉模糊的伤口直接暴露在空气中。 病人如果侥幸不死于鲜血淋漓、痛不可忍的 “ 手术 ” ，那么，绝大多数也要死于手术后的伤口化脓！ （术后感染）引起术后感染的病原菌主要来自外科医生和接生护士的手、空气或医疗器材等。因此，科学地控制微生物的生长繁殖显得十分重要。 从预防感染出发，医务工作者必须建立 “ 处处有菌 ” 和无菌观念，严格执行无菌操作。 为防止疾病的传播，应切断传播途径，对传染病患者的排泄物和实验废弃的培养物亦须进行灭菌或消毒处理。 在微生物的应用中，消毒与灭菌时不可缺少的环节。二、消毒与灭菌的概念二、消毒与灭菌的概念1.灭菌（ sterilization） 指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。2.消毒（ disinfection） 指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。 用于消毒的化学药品叫消毒剂或杀菌剂。3.防腐（ antisepsis） 指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。 用于防腐的化学药品叫防腐剂或抑菌剂。4.无菌（ asepsis） 指 物体上或容器内没有活的微生物存在的状态。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。 物理因素对微生物的影响三、物理方法三、物理方法物理因素温 度辐射干 燥超声波微 波滤过除菌（一）热力灭菌法 高温杀灭细菌 高温对微生物具有致死作用，常用于消毒和灭菌。高温对菌体蛋白质、核酸、酶系统等产生破坏作用。导致菌体死亡。 热力灭菌法 分 干热灭菌 和 湿热灭菌两类，湿热传导性好、穿透力强灭菌效力大。1.干热灭菌法 主要有 焚烧、烧灼、干烤、红外线焚烧 最彻底的灭菌方法 烧灼 直接用火焰灭菌方法 干烤 加热 160-180 ， 2h 红外线 热效应，与干烤类似火焰灭菌法 :火焰直接烧灼，如接种环。干烤： 干热灭菌器适用于高温下不损坏、不变质的物品 ,如玻璃器皿、瓷器等的灭菌。灭菌温度需 160 维持 2 h。2.湿热灭菌法 煮沸消毒法 水煮 100 ， 5min（繁殖体）； 2h以上（芽孢） 流通蒸汽灭菌法 水蒸汽 100 ， 15-30min（繁殖体） 间歇灭菌法 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌 巴氏消毒法 较低的温度（ 61 ，30min/71 ， 30s），杀死致病菌 高压蒸汽灭菌法 最有效的灭菌方法， 121 ， 20-30min(1)煮沸灭菌 : 煮沸 10 20 min可杀死所有细菌的繁殖体，芽胞常需煮沸 1 2h才被杀死。用于饮水、一般器械，如刀剪的消毒。(2)巴氏消毒法： 以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法 .主要用于葡萄酒、啤酒、果酒及牛乳等食品的消毒。1.低温维持巴氏消毒法 61 6330min 2.高温瞬时巴氏消毒法 71 7215s 3.超高温巴氏消毒法 1321 2s (3)流通蒸汽灭菌法： 是一种常压蒸汽消毒法，细菌繁殖体 15-30分钟可杀灭，但芽孢不全部被杀灭。(4)间歇灭菌法（反复多次流通蒸汽）100 维持 30min 温箱过夜 100 维持30min 温箱过夜 100 维持 30min 温箱过夜 100 维持 30min。此法常用于一些不耐高温的培养基，如鸡蛋培养基、血清培养基、糖培养基的灭菌 。高压蒸汽灭菌器： 15磅 /平方英寸， 121.3 温度下维持 15 20min 。应用此法灭菌，一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等。（ 5）高压蒸汽灭菌法湿热灭菌与干热灭菌的比较 同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果更好。 原因： 湿热中细菌菌体蛋白较易凝固； 湿热的穿透力比干热大； 湿热的蒸汽有潜热。 辐射： 能量通过空间传递的一种物理现象。按辐射对微生物的灭活作用分：1.非电离辐射 :可见光、日光、紫外线2.电离辐射 : 、 、 、 射线以及高能质子、 中子等 （二）辐 射非电离辐射 1.可见光 :指在红外线和紫外线之间的肉眼可见的光线，其波长 400 800nm。 可见光线对微生物一般无多大影响，但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖。光感作用 :指可见光具有微弱的杀菌作用，若将某些染料如结晶紫、美蓝、汞溴红、伊红、沙黄等加到培养基或涂在外伤表面，能增强可见光的杀菌作用 。2.阳光 :直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀菌因素。许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多，往往需经20h才死亡。日光的杀菌效力因地、因时及微生物所处环境不同而异 。3.紫外线 紫外线中波长 200-300nm部分具有杀菌作用，其中以 265-266nm段的杀菌力最强，这与 DNA吸收光谱范围一致。常用的紫外线杀菌灯波长为 253.7nm， 杀菌力强而稳定。缺点 紫外线的穿透力不强，即使是很薄的玻璃也不能透过，所以只用物体表面消毒。用途 微生物实验室、无菌室、手术室、传染病房、种蛋室等的空气消毒。原理 紫外线照射后， DNA分子吸收约 260nm紫外线，使同一条 DNA链上相邻胸腺嘧啶产生共价结合成二聚体，影响 DNA复制与转录，引起致死性突变而死亡。此外，紫外线可使空气中分子氧变为臭氧，臭氧放出氧化能力强的原子氧，呈现杀菌作用。紫外线辐射灭菌装置紫外线辐射灭菌的效果(1) 射线 :电离辐射强，穿透力差（ 缺乏穿透力，不实用）(2) 射线 :电离辐射强，穿透力强(3) 射线 :电离辐射弱，穿透力强(4) X射线：杀菌力不如紫外线，穿透力强用途：忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面 杀菌机制： 射线使水电离为 H和 OH， 这些游离基是强烈的还原剂和氧化剂，可直接作用于细菌本身 。电离辐射（三）滤过除菌法滤过除菌 :通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常 不能除去病毒、霉