遗传学第六章病毒的遗传分析

第六章 病毒的遗传分析一、病毒的形态结构与基因组 P184二、噬菌体的增殖与突变型（一）噬菌体的增殖 P186（二） 噬菌体的突变型1、条件致死突变在某些条件下，导致某些突变型致死，而另外一些条件下仍能增殖 。致死条件为限制条件（restrictive condition)。 增殖条件为许可条件（ permissive condition)。（ 1）温度敏感突变 热敏感突变 冷敏感突变（ 2）抑制因子敏感突变（ sus突变）sus突变 su+突变：宿主菌含有抑制基因 su+， sus突变噬菌体感染此类菌时能产生后代。 2、噬菌斑形态突变（ 1） T4噬菌体简介T4噬菌体为 T-偶列噬菌体之一，基因组为 165Kb的双链 DNA分子，包括 160个基因，宿主为 E.coli。形态特征环状遗传学图（ 2） T4野生型和突变型侵染 E.coli B和 E.coli K( ） 噬菌斑的变化 快速裂解（ rapid lysis， r）突变 ： r-，形成大噬菌斑； r+，缓慢裂解，形成小噬菌斑。 P191表 8-4T4 野生型和突变型的区别类型 表型B K( ）野生型 小噬菌斑 小噬菌斑r 大 噬菌斑 无噬菌斑 3、宿主范围突变型 宿主范围 (host range， h)： h-表示可同时感染两种不同的 E.coli菌株 B， B-2，噬菌斑透明。 h+表示只感染菌株 B，噬菌斑半透明。三、噬菌体突变型的重组测验（一） Benzer的重组测验和基因的精细结构分析实验 ： T4 r 区两种突变型 r 63， r 12同时侵染 E.coli B 和 E.coli K( ）， 结果如下： 重组率 =2野生型噬菌斑数 100%噬菌斑总数 重组测验：确定突变基因间的空间关系。 （二） T2突变型的两点测交与作图（三） 噬菌体的基因重组与作图（四） T4突变型的三点测交与作图四、噬菌体突变型的互补测验（一）互补测验与顺反子 互补测验 ：确定突变基因间的功能关系。 判断两个突变是位于同一个基因内的突变，还是两个基因间的突变。 互补 ：一种突变型能弥补另一种突变型不具有的功能。这两种突变就称为彼此互补。 顺式排列，反式排列。 斑点测试法（ spot test) P196用一种 r 突变型以 0.1的感染比（噬菌体 1:细菌 10）感染大肠杆菌 K( ）， 噬菌体和细菌在温热的琼脂中混合，涂布在营养平板上，琼脂凝固后，在平板上划出一定位置，再在上面滴加含另一种 r 突变型的培养基。在这一滴培养基范围内，一些菌被两种噬菌体感染，如这范围内形成噬菌斑，就证明这两种突变型互补，相反则不互补。在一个培养基上可做 68 个斑点试验。在 反式测验 中，如两个突变之间能互补，则表明两个突变是位于两个基因（顺反子）内的突变。如两个突变之间不能互补，则表明两个突变是位于同一个基因内的突变。 顺反子：一个不同突变之间没有互补的功能区称为顺反子（ cistron)。（二）基因内互补例外情况 。如：沙门氏杆菌甘油磷酸脱氢酶基因；大肠杆菌和脉孢菌色氨酸合成酶基因；脉孢菌谷氨酸脱氢酶基因。1、基因内互补和基因间互补的区别 P2002、基因内互补的作用机制 P202图 8-14五、噬菌体 T4 r 缺失突变与作图（一）缺失作图的原理 缺失突变（ deletion mutation）：一个顺反子内缺失一段核苷酸的突变。 点突变（ point mutation）：一个顺反子内单个核苷酸发生的改变。 当同一顺反子内的缺失突变和点突变重叠时，不能产生基因内重组 , 因此无野生型噬菌体。（二）缺失作图的方法 利用 重叠缺失 定位未知的 r 突变：根据是否产生野生型噬菌体，系列 将 r 突变定于 A5片段；系列 将 r 突变定于 A5c区；系列 将其定于 A5c3区 。 r 基因座 A、 B顺反子的部分突变图，每个正方形代表一个独立分离的突变六、 噬菌体的基因组与位点专一性重组（一） 噬菌体的