医学精品课件非发酵革兰阴性杆菌

第九章非发酵革兰阴性杆菌 非发酵革兰阴性杆菌，指一大群不发酵葡 萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼 性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌；多为条件 致病菌。近年来由该类细菌引起感染的报告 日益增多，已引起临床医学及检验医学的重 视。 非发酵革兰阴性杆菌包括假单胞菌属 、产碱杆菌属、无色杆菌属、不动杆菌 属、莫拉菌属、金氏杆菌属、黄杆菌属 、艾肯菌属、土壤杆菌属、黄单胞菌属 、丛毛单胞菌属等。 第一节 假单胞菌属 假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、 无荚膜的革兰阴性杆菌，氧化酶试验阳 性， DNA G+C为 58 71mol， 包括 200余 种菌。多数为腐生菌，少数为植物和动 物寄生菌，大多为条件致病菌。 （一）分类 按 rRNA同源性分为 5群及未确定 rRNA 同源群有关的种，其中第 1群可分为：荧 光假单胞菌 DNA同源群、斯氏假单胞菌 DNA同源群、产碱假单胞菌 DNA同源群， 包括铜绿假单胞等 12个菌种。 假单胞菌属分布广泛，土壤、水和空气中 均有存在，人类非发酵菌感染中，假单胞菌 占 70 80，主要为铜绿假单胞菌，其他 较为常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光 假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等 。这些菌种也是医院感染的主要病原菌。 (二 )临床意义 (三 )微生物特性 G-直或微弯、较细长、散在排列、无芽胞 有荚膜、有端鞭毛或丛鞭毛。专性需氧，生 长温度范围广 4 42 ，最适生长温度为 35 ， 普通培养基上生长，产生各种水溶性 色素，如绿脓素 、 脓玉红素 、 绿脓菌荧光素 、 脓褐素 。 对理化因素耐受性较强，对多种 抗生素耐药。 铜绿假单胞菌广泛存在环境中，加之多种 传播途径和污染，因此易感染，特别在由各 种原因所致的人体抵抗力低下时引起皮肤感 染、呼吸道感染、泌尿道感染、烧伤感染等 ，亦可导致菌血症、心内膜炎、囊性纤维变 性 ， 该菌引起的慢性肺部感染占有较大的比 例；在 AIDS病中，常发生感染。感染眼部的 铜绿假单胞菌，可以合成胶原酶，以致引起 角膜穿孔而失明。在假单胞菌属的感染中铜 绿假单胞菌的感染占 70。 （四）铜绿假单胞菌检验 1标本采集 按疾病和检查目的，分别 采 取不同的标本：患者的血液、脑脊液、 胸 (腹 )水、脓液、分泌液、痰、尿液、十 二指肠引流液、粪便等；医院病区或手术 室的空气、水、地面、把手、医疗诊断器 械及生活用品。 2标本镜检为革兰阴性，有动力的杆菌 3分离培养 在普通培养基生长良好， 经 1824 h形成圆形、扁平隆起、光滑湿 润菌落。琼脂被染成绿色或黄绿色，约 80 -90产生绿脓素或荧光菌株素。 4生化鉴定 氧化酶阳性，氧化分解葡 萄糖、木糖产酸不产气，液化明胶，还原 硝酸盐产生氮气，吲哚阴性，利用枸橼酸 盐，精氨酸双水解酶阳性。 (五 ) 检验结果分析与报告 结合临床感染症状，患者血、尿 液及无菌体液中分离到铜绿假单胞 菌，特别是反复检出即可确定是感 染病原菌。如无感染的临床表现， 应作为正常菌群。 第二节其他临床常见非发酵菌 临床常分离到不动杆菌属、产碱 杆菌属、黄杆菌属、军团菌属等， 而且医院感染中以上菌属均有上升 趋势。 （一）不动杆菌 1.为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、不能 运动的 G-杆菌、常分离到的菌种有醋酸钙不 动杆菌、洛菲不动杆菌、溶血不动杆菌等， 模式菌种为醋酸钙不动杆菌。 DNA G+C mol% 为 38 46.5。 2.存在于正常人体的皮肤、呼吸道和泌尿 道，是引起医院感染的常见病原菌，为条什 致病菌，常从感染患者的血、尿、脓液及呼 吸道分泌物、脑脊液等标本分离。 (二 )产碱杆菌属 1.与临床有关的有粪产碱杆菌及亚型、皮乔特产碱杆 菌、木糖氧化产碱杆菌及亚种， DNA G+C mol%为 56 70，典型菌种为粪产碱杆菌。 2.人体的正常菌群，是医院感染的病原菌，可引起抵 抗力低下患者发生败血症，并可从患者呼吸道、尿 液、血液及脑脊液中分离出来。 3.为 G-杆菌，呈链状、周鞭毛、有动力，无荚膜。 4.在普通培养基上 18 24h形成无色透明菌落 。 氧化 酶及触酶均阳性，不分解任何糖类， O-F试验碱性， 脲酶阴性，不液化明胶。 （三）黄杆菌属 1.为一群无动力和芽胞、氧化酶阳性的 G-杆 菌。与临床相关菌种有短黄杆菌、脑膜炎 败血性黄杆菌、芳香黄杆菌、水田黄杆菌 、嗜糖黄杆菌、嗜醇黄杆菌、嗜温黄杆菌 。模式菌种为水田黄杆菌。 2.本菌有两个特点：产生不性黄色素；分解 碳水化合物产酸不产气。 DNA G+C mol%含 量 31 42。 存在于水、土壤和蔬菜中，还可从口腔 、上呼吸道、皮肤中检出，是条件致病菌 ，也是引起医院感染的常见菌。可引起术 后感染、菌血症、在新生儿及婴幼儿的化 脓性脑膜炎中分离出脑膜败血性黄杆菌比 例较高。 -杆菌，需氧代谢，血琼脂培养基生 长良好，典型菌落为淡黄色，氧化酶、触 酶、磷酸酶阳性。 临床上常见的脑膜炎败血黄杆菌及芳香 黄杆菌等对广谱抗菌药 (如氨基糖甙类、 -内酰胺酶类、四环素类、氯霉素 )有耐药 性，应根据药敏试验选择用药。 (四 )莫拉菌属 与临床有关的有缺陷莫拉菌、犬莫拉菌、 非液化莫拉菌、亚特兰大莫拉、林肯莫拉菌 、苯丙酮酸莫拉菌、奥斯陆莫拉。 DNA G+Cmol 为 40 47 5。 本菌能引起眼结膜炎、气管炎、肺炎、脑 膜炎、脑脓肿、心炎、心内膜炎及泌尿生殖 系统炎症。近年来非液化莫拉菌引起脑膜炎 及婴幼儿菌血症者日益多，应引起高度重视 。 为 -球杆菌，双短链状排列，具有多形性 。 本菌营养要求较高，血琼脂平板上生长，无 色不溶血的菌落。本菌氧化酶阳性，触酶阳 性，无动力，不分解糖类，吲哚试验阴性。 对青霉素类敏感，对头孢类、四环素类、氨 基糖甙类药物均为敏感。 (五 )军团菌属 共有 39种及 3个亚种， 60个血清型。 O抗原将嗜肺军团菌分成 15个血清型 ; 将伯兹曼军团菌，菲利军团菌，长 滩军团菌等分为 2个血清型。 常经供水系统和雾化吸人而引起肺炎 型和非肺炎型感染。临床表现是多种多 样的，高发于夏秋季节，易侵犯患有慢 性器质性疾病或免疫功能低下患者，如 恶性肿瘤、慢性支气管炎或肺气肿等患 者，以及使用激素及免疫抑制剂和器官 移植的患者。军团菌在机会感染或医院 内感染中的位置也越来越被人们所重视 。 军团菌属胞内菌，能在巨嗜细胞内繁殖 ，所以其免疫主要是细胞免疫。 -杆菌，无芽胞和荚膜，端鞭毛或侧 鞭毛，严格需氧。触酶阳性，可液化明 胶，不分解糖类，氧化酶阳性。 嗜肺军团菌的生存能力较强，在蒸馏 水中存活 100天以上，在污水中可存活 1 年、对热和常用化学消毒剂敏感。 本菌营养要求苛刻，生长缓慢，氧气含 量低生长速度减慢， 2 5 -5的 CO 环境小生长良好，生长温度为 35，最适 pH 6.7 7.0。 在活性炭 -酵母浸液琼脂培 养基 (BCYE)上 3-5天可形成 1-2mm直径的光 泽菌落。 军团菌鉴定 （ 1） 溴甲酚紫 (BCP)斑点试验 即 BCP 100mg溶于 1mol L KOH 10ml中， 配成 10浓度。然用蒸馏水稀释 25倍，使之 成为 0.04浓度。试验时取此试剂 1滴，滴于 滤纸上，再刮取新培养菌，涂抹于含有 BCP试 剂的滤纸上，若在 30s内出现蓝宝石色泽即为 阳性。 （ 2） 色素产生试验 产生的色素可分为 在培养基中产生的褐色 素； 细胞外荧光，该荧光是由细菌分泌的 种化合物进人琼脂培养基中而形成的，用 长波紫外线照射时可出现黄色或黄绿色荧光 ； 细胞内荧光，在紫外线照射时，细菌菌 落呈蓝白色或暗黄色荧光。 抗