遗传病的诊断预防治疗ppt课件

遗传病的诊断 遗传病的诊断： 植入前诊断 产前诊断 症状前诊断 现症病人诊断 第一节 病史、症状和体征 w 一、病史 w 1、家族史： 准确性，全面性 w 2、婚姻史： 婚龄、次数、配偶、近亲 w 3、生育史： 育龄、子女数及健康状况、 w 流产、死产和早产史（如异常，了 w 解产伤、窒息、病毒、致畸剂等） w 二、症状和体征 w 相同性 w 特异性： 外貌、身体发育、体重增长、 w 智力增进、性发育、肌张力、 w 哭声 w 加强诊断：实验室检查；辅助器械检查 . 第二节 系谱分析 w 一、目的：区分遗传方式、遗传异质性、 w 及表型相似遗传病。 w 二、注意事项： w 1、系谱的系统性、完整性和可靠性 w a、 三代以上； b、 有关人员，尤其关键人员逐个查询 ； c、 有否近亲婚配； d、 有无死胎、流产史； e、 不合作，假情况； f、 必要时实验室，辅助器械检查 。 w 2、延迟显性、外显不全不能误认为隐性 w 3、新基因突变不能误认为隐性 w 4、显、隐性相对性 w 例如： HbS 临床水平： AR w 细胞水平：中间型显性 w 分子水平：共显性 X染色体 Y染色体 13号染色体 18号染色体 21号染色体 第三节 细胞遗传学检查 13号染色体 21号染色体 细胞遗传学检查细胞遗传学检查 w 指征： 1、智能发育不全、生长迟缓或伴有其 w 他先天畸形者； w 2、夫妇之一有染色体异常； w 3、家族中已发现染色体异常或先天畸 w 形个体； w 4、 34岁以上高龄孕妇； w 5、多发性流产妇女及其丈夫； w 6、原发闭经和男女性不孕症者； w 7、两性内外生殖器畸形者 第四节 基因产物分析 酶和蛋白质的分析 上海：上海： 1981 1987年对年对 284,396名新生儿进行名新生儿进行 PKU筛查，查出筛查，查出 PKU患儿患儿 15名，高苯名，高苯 丙氨酸血症丙氨酸血症 4名。名。 生物化学检查生物化学检查 苯丙 酮 尿症 , PKU 酶 活性 检查 PAH 肝 脏 血液 滤 片法 FeCl3显 色反 应 苯丙 酮 酸 ,绿 色 尿 样 第五节 基因诊断 基因诊断的优点 不受细胞类型限制，不考虑基因表达与否； 而生化检查 必须在基因表达后方可实行。 概念 即利用 DNA重组技术 在分子水平上检测人 类遗传病的基因缺陷 以诊断遗传病 一 基因诊断的原理 w 核酸分子杂交：互补核酸序列可在一定 w 条件下特异结合成双链。 w 必要条件： 特异探针 w 一、基因探针： w 目的基因互补序列 w 探针来源： 基因组探针 w 逆转录 cDNA探针 w 人工合成寡核苷酸探针 Southern印迹杂交印迹杂交 - + 二 常用基因诊断技术 RFLP连锁分析连锁分析 镰状细胞贫血镰状细胞贫血 (HbS)： 第第 5 7位密码子位密码子 AA AS SS Mst: CCTNAGG 1.2 Kb 0.2Kb 1.40 Kb 1.20 Kb 0.20 Kb A: CCTGAGGAG S: CCTGTGGAG ASO斑点杂交斑点杂交 1986年，胡流清等基于点突变原理，用年，胡流清等基于点突变原理，用 寡核苷酸探针进行基因诊断。寡核苷酸探针进行基因诊断。 正常探针正常探针 突变探针突变探针 PKU， AR wPCR w变性（ 92-95； 1） w复性（ 40-60； 1） w延伸（ 72； 1.5） w 单链构象多态性分析（ SSCP） w 碱 基微小差异 DNA构象差异 w 电泳迁移率差异 灵敏检出突变 1 2 3 4 5 a b 1：正常人 2,4,5：纯合体患者 3：杂合体 (2的弟弟 ) 左为泳动变位模式： a 正常人； b 纯合体患者 遗传病的治疗 w 一、手术疗法：切除、修补 替换病损组织或器官 w 二、药物疗法： 补其所缺 w 去其所余 羊水中甲基丙二酸含量增高，胎儿可能患甲基丙羊水中甲基丙二酸含量增高，胎儿可能患甲基丙 二酸症，会引起新生儿发育迟缓和酸中毒，应在出二酸症，会引起新生儿发育迟缓和酸中毒，应在出 生前和出生后给母体和患儿注射大量生前和出生后给母体和患儿注射大量 VB12。 药物治疗药物治疗 v 出生前治疗出生前治疗 患儿甲状腺功能低下，应给予甲状腺素终患儿甲状腺功能低下，应给予甲状腺素终 生服用，以防患儿智能和体格发育障碍。生服用，以防患儿智能和体格发育障碍。 v 症状前治疗症状前治疗 药物治疗药物治疗 w三、饮食疗法 w四、基因治疗 基因治疗（ gene therapy） 是指将外源 正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿 因基因缺陷和异常引起的疾病，以达 到治疗目的。 w禁其所忌 v 体细胞基因治疗：使患者症状消失或得体细胞基因治疗：使患者症状消失或得 到缓解，但有害基因仍能传给后代。到缓解，但有害基因仍能传给后代。 基因治疗的基本方式基因治疗的基本方式 v 生殖细胞基因治疗：可根治遗传病，使生殖细胞基因治疗：可根治遗传病，使 有害基因不再在人群中散布。有害基因不再在人群中散布。 v 体细胞基因治疗：使患者症状消失或得体细胞基因治疗：使患者症状消失或得 到缓解，但有害基因仍能传给后代。到缓解，但有害基因仍能传给后代。 基因治疗的基本方式基因治疗的基本方式 基因置换 （ gene replacement） 基因修正 （ gene correction） 基因修饰 （ gene augmentation） 又 称基因添加 基因失活 （ gene inactivation） 策略 “自杀基因自杀基因 ” 疗法疗法 “自杀基因自杀基因 ” 疗法疗法 “自杀基因自杀基因 ” 疗法疗法 “自杀基因自杀基因 ” 疗法疗法 目的基因的转移方法目的基因的转移方法 v 物理方法物理方法 v 化学方法化学方法 v 膜融合法膜融合法 v 受体载体转移法受体载体转移法 v 同源重组法同源重组法 (homologous recombination) v 病毒介导转移法病毒介导转移法 反转录病毒载体 DNA病毒介导载体 ： DNA病毒包括 腺病毒、 SV40、 牛乳头瘤病毒、疱疹病毒 等 最常用于人类的是 莫洛尼（ Mooney） 鼠白血病病 毒（ murine leukemia virus;Mo-MLV） 地方伦理小组 地方生物安全小组 NIH RAC HGTS FDA 考虑治疗程序的特点，用于基因转移的生物制品的 产品质量控制和鉴定 考虑治疗方案对受治患 者和大众的安全性，对患者 预期疗效和潜在危险相比较 临床基因治疗方案 基因治疗的临床应用基因治疗的临床应用 基因治疗的临床应用基因治疗的临床应用 Ashanti de Silva Ashanti was the first patient to be treated with gene therapy. v Injections repeated 7 times in first 10.5 months v ADA: 1% 25% 基因治疗的临床应用基因治疗的临床应用 v 乙型血友病 O 薛京伦薛京伦 (复旦大学复旦大学 ) O 反转录病毒载体反转录病毒载体 O 1991, 皮肤成纤维细胞皮肤成纤维细胞 O Factor IX: 5% v 导入基因的持续表