武当山区市售重楼饮片中总皂苷含量分析研究

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 武当山区市售重楼饮片中总皂苷含 量分析研究 摘要 目的 比较武当山区市售 重楼饮片中总皂苷的含量，考察医院、 药店等医药市场上销售的重楼饮片质量 情况，为中药重楼的生产、经销、临床 使用和监管提供参考。 方法 收集武当 山区（以湖北省十堰市为主）医院、药 店中重楼饮片样品，用高氯酸显色，在 406 nm 波长处使用紫外 -可见分光光度 法测定重楼饮片中总皂苷含量。 结果 市售重楼饮片中重楼总皂苷的含量差异 明显，收集到的 23 个样本中总皂苷含 量最低的只有 1.79%，最高达 11.79%。 结论 市售重楼饮片的质量参差不齐， 会影响临床用药的安全性、有效性。需 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 要加强对中药重楼的生产、经销监管。 推动中药材规范化种植，以保证中药质 量的稳定可控。 中国论文网 /6/view-12954772.htm 关键词 重楼；总皂苷；含量 中图分类号 R927 文献标识码 A 文章编号 1673-7210（2017） 10（c）-0132-04 Research of the content of total saponins in commercially available Paris polyphylla from Wudang Mountain Area HU Huaiming1，2 SHEN Ting3 YE Fang1， 2 HUANG Liangyong1，2 LIANG Wenbin1，2 1.Department of Pharmacy， Shiyan City Taihe Hospital Affiliated to Hubei University of Medicine， Hubei Province， Shiyan 442000， China； 2.Engineering Research Center for Herbal Utilization of Hubei Province， Hubei University of Medicine， Hubei Province， Shiyan 442000， China； -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 3.College of Pharmacy， Hubei University of Chinese Medicine， Hubei Province， Wuhan 430065， China Abstract Objective To compare the content of total saponins in commercially available Paris polyphylla from Wudang Mountain Area to investigate the quality of herbal pieces purchased from hospitals， pharmacies and other pharmaceutical markets. It provides a reference for production， distribution， clinical application and regulation of Paris polyphylla. Methods Herbal pieces of the Paris polyphylla were collected from hospitals and pharmacies in Wudang Mountain Area （mainly in Shiyan， Hubei Province）. The content of total saponins in Paris polyphylla was determined by an ultraviolet-visible spectrophotometer at 406 nm with perchloric acid as chromogenic reagent. Results The content of saponins in Paris -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 polyphylla from 23 samples had obvious differences， the minimum was 1.79%， and the maximum was up to 11.79%. Conclusion The quality of Paris polyphylla is unstable which can affect the safety and efficacy of clinical application. The supervision of the production and marketing of Paris polyphylla need to be strengthened. Only by promoting the standardized planting of Chinese medicine materials， the stable quality of Paris polyphylla can be ensured. Key words Paris polyphylla； Total saponins； Content 重俏 百合科重楼属植物 1， 有清热解毒，消肿止痛，凉肝定惊之功 效。现代药理研究发现重楼具有免疫调 节、止血、抗肿瘤2-4、心血管系统作 用5等多种药理活性，其活性成分主要 为重楼总皂苷6和黄酮类化合物7-8。 我国主要分布在云南、贵州、四川、湖 北等地9-10，武当山区分布有 2 种 6 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 变种11， 中国药典 （2015 版）规定 药用重楼为云南重楼Paris polyphylla Sm. var. yunnanensis（Franch.）Hand.- Mzt.或七叶一枝花 P. polyphylla Sm. var. chinensis（Franch.）Hara.的干燥根茎 12。但药农在采挖野生重楼过程中没 有区分是否药典规定的品种，药材收购 商也无鉴别真伪能力，所以当前我国中 药材市场上存在着中药品种不纯正、掺 假造假等多种现象，影响临床疗效和安 全13，因此加强质量控制和监管是保 证中药材质量的关键举措。 中国药典 12采用 HPLC 法测定重楼皂苷 、的含量作为质量控制方 法，而中药的特点是整体性和模糊性 14，几种单体成分不能完全反映中药 的整体质量。采用紫外-可见分光光度 法测定重楼中总皂苷的含量可以作为重 楼质量控制方法的有益补充15。 1 仪器与试药 1.1 仪器 TU-1901 全自动紫外可见分光光 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 度仪（北京通用普析仪器有限责任公司） ；TDL-5A 高速离心机（德国菲恰） ； FA-2004 电子分析天平（上海精密科学 仪器有限公司） ；AUW-120D 型电子分 析天平（日本岛津） ；电热恒温水浴锅 （北京医疗设备厂） ；XT-NX1 氮吹仪 （Made in U.S.A.） 。 1.2 试药 重楼皂苷对照品（中国食品药 品检定研究院，批号：111593- 201303，含量 92.5%） ，重楼饮片样本 搜集于以湖北省十堰市为主的武当山区 医院药房、社会药店等地。样本粉碎过 三号筛备用。甲醇为色谱纯，无水乙醇、 高氯酸等试剂为分析纯，水为自制超纯 水。 2 方法与结果 2.1 供试品溶液的制备 精密称取 2.0 g 重楼饮片粉末置 磨口三角烧瓶中，加入 90%乙醇 24 mL，水浴回流提取 1 h， 3000 r/min 离 心 5 min，滤渣重复提取 1 次，上清液 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 合并至 100 mL 量瓶中，用 90%乙醇定 容至刻度16 。精密吸取提取液 1.0 mL 于 10 mL 量瓶中，用甲醇定容至刻度， 摇匀，得到供试品溶液 A1A23。 2.2 对照品溶液的制备 取重楼皂苷适量，精密称定， 加甲醇稀释成每毫升含 0.1 mg 的对照品 溶液。 2.3 检测波长的选择 分别吸取对照品溶液和供试品溶 液 A1 适量，置于 10 mL 具塞试管中， 氮气吹干后加入 5 mL 高氯酸，密塞， 60水浴反应 15 min 后，置冷水浴中 冷至室温，在 350600 nm 范围内进行 扫描，结果样品和对照品溶液均在 406 nm 处有最大吸收，且较稳定，因此确 定 406 nm 为测定波长。 2.4 方法学考察 2.4.1 线性关系考察 分别精密吸 取对照品溶液 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、3.0 mL，置于 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 10 mL 具塞试管中，按“2.3”项下处理显 色后，在 406 nm 波长处测定吸光度。 以吸光度（Y）为纵坐标，重楼皂苷 对照品含量（X，mg）为横坐标绘制标 准曲线，得回归方程为 Y=3.7855 X- 0.0026，R2=0.9944。表明重楼皂苷含 量在 0.009620.2886 mg 之间时与吸光 度呈良好的线性关系。 2.4.2 精密度试验 精密吸取对照 品溶液 1 mL 于具塞试管中，按“2.3”项 下方法操作显色后，在 406 nm 波长下 连续测定吸光度，结果得吸光度的 RSD 为 0.99%（n=5） ，表明仪器精密度良好。 2.4.3 重复性试验 精密称取 16 号重楼饮片粉末 2 g，共计 6 份，按 “2.1”项下方法处理后，分别精密吸取各 溶液 1 mL 于 6 只具塞试管中，按“2.3” 项下方法显色后，在 406 nm 波长下测 定吸光度，计算总皂苷含量。结果得 6 份样品平均含量为 2.58%，RSD 为 0.79%（ n = 6） ，表明方法重复性良好。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 2.4.4 稳定性试验 取 A1 号供试 品溶液 1 mL 于具塞试管中，按“2.3”项 下方法显色后，在 0、0.5、1.0、2.0、4.0 h 时测定其吸光 度，结果得 RSD 为 1.93%（n = 5） ，表 明样品溶液在显色后 4 h 内稳定性良好。 2.4.5 加样回收率试验 精密称取 同批次 20 号重楼饮片粉末约 1 g，共计 6 份，按“2.1”项下方法提取定容至 100 mL 量瓶中后，精密吸取提取液 1.0 mL 于 10 mL 量瓶中，再加入浓度为 0.2405 mg/mL 对照品溶液 1.0 mL，混匀，用 甲醇定容至刻度。精密量取混合溶液 1.0 mL 置于具塞试管中，按“2.3”项下方 法显色后，在 406 nm 波长下测定其吸 光度，计算加样回收率。见表 1。 2.5 样品含量测定 精密量取供试品溶液 A1A23 各 1 mL，分别置于具塞试管中，挥干 后加入 5 mL 高氯酸，置 60水浴中 15 min，取出，冷水浴至室温，在 406 nm -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 10 波长处测定吸光度，计算样品中重楼总 皂苷的含量。见表 2。 3 讨论 3.1 市售重楼中药饮片质量参差 不齐 从测定的 23 个重楼饮片样本中 总皂苷含量的结果分析可以看出，武当 山区市售重楼饮片中重楼总皂苷的含量 差异较明显，最低的只有 1.79%，最高 达 11.79%。虽然样本主要收集于以十 堰市及其周边地区为主的医院、药店， 范围较小，样本量也不足，但从收集的 信息看，这些样本产于湖北、云南、四 川几个重楼主产区，主要经销公司包括 湖北、安徽、河南几个省，辐射面可能 很广，所以这些样本具有一定的代表性。 各样本之间总皂苷存在明显差异，说明 药材市场上重楼饮片的质量参差不齐， 肯定会影响临床用药的安全性、有效性。 3.2 保证中药饮片质量要从源头 做起 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 11 由于重楼对生长环境要求较高， 而且需要生长五年以上才能药用1