检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质实验专题

一、检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质1糖的鉴定：原理：(1)淀粉：遇碘液变蓝色，这是淀粉特有的颜色反应。(2)还原性糖(单糖、麦芽糖和乳糖)：与斐林试剂反应，可以产生砖红色沉淀。材料用具：（1）实验材料：苹果或梨匀浆，马铃薯匀浆（2）配制：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液+ 乙液：0.05g/mL CuSO4溶液 使用：混合后使用，且现配现用。 条件：水浴加热实验步骤：实验结果分析：（1）淀粉：如果出现蓝色，则待测样品中含有淀粉；反之，则没有。(2）还原性糖：如果出现砖红色沉淀，则待测样品中含有还原糖，反之；则没有。2脂肪的鉴定：原理：脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色。（在实验中用50%酒精洗去浮色显微镜观察橘黄色脂肪颗粒）材料用具：（1）实验材料：花生种子，花生匀浆（2）试剂：苏丹III染液、苏丹IV染液实验步骤实验结果分析：如果观察到橘黄色（红色），则待测样品中含有脂肪；反之，则没有。3蛋白质鉴定：原理：蛋白质与双缩脲试剂产生紫色的颜色反应材料用具：（1）实验材料：豆浆、鲜肝提取液（2）双缩脲试剂：配制：A液：0.1g/mL的NaOH溶液（2mL）和B液：0.01g/mL CuSO4溶液（3-4滴）使用：分开使用，先加NaOH溶液，再加CuSO4溶液。实验步骤实验结果分析：如果出现紫色，则待测样品中含有蛋白质；反之，则没有。4、 注意事项：（1）还原性糖植物组织取材条件？ 答：浅色：不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰。还原糖含量高：不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)。含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。 （2）花生种子切片为何要薄？ 答：只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。 （3）唯一需要加热 还原糖鉴定，且必需水浴加热，不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。 唯一需要显微镜 脂肪鉴定。（4）若用大豆做材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其粘在试管壁上不易涮洗；且该实验应预留部分组织样液做对比。例1.（07小高考第40题）根据我国现行的食品质量标准，06个月的婴儿奶粉中蛋白质的含量应为12%18%。现有一种待测婴儿奶粉，请你尝试完成鉴定实验。（1）实验目的：鉴定该待测婴儿奶粉蛋白质的含量是否符合质量标准。（2）实验原理：蛋白质与_试剂发生作用，产生紫色反应。（3）材料用具：相同浓度的标准婴儿奶粉溶液和待测婴儿奶粉溶液、0.1g/mL的NaOH溶液、0.01 g/mL的CuS04溶液、试管和滴管等。（4）实验步骤 取两支试管分别加人2mL的标准婴儿奶粉溶液（编号甲）和2mL的待测婴儿奶粉溶液（编号乙）。标准婴儿奶粉溶液在本实验中起_作用。 分别向两支试管中加人2mL的_溶液，振荡，摇匀。 再分别向两支试管中加人34滴_溶液，振荡，摇匀，比较颜色的变化。（5）结果预期_。二、实验：观察植物细胞的质壁分离和复原一、实验原理：原生质层（细胞膜、液泡膜、两层膜之间细胞质）相当于半透膜，l 当外界溶液的浓度大于细胞液浓度时，细胞将失水，原生质层和细胞壁都会收缩，但原生质层伸缩性比细胞壁大，所以原生质层就会与细胞壁分开，发生“质壁分离”。l 反之，当外界溶液的浓度小于细胞液浓度时，细胞将吸水，原生质层会慢慢恢复原来状态，使细胞发生“质壁分离复原”。二、材料用具：紫色洋葱表皮，0.3g/ml蔗糖溶液，清水，载玻片，镊子，滴管，显微镜等三、方法步骤：（1）制作洋葱表皮临时装片。（2）低倍镜下观察原生质层位置。（3）在盖玻片一侧滴一滴蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸，重复几次，让洋葱表皮浸润在蔗糖溶液中。（4）低倍镜下观察原生质层位置、细胞大小变化（变小），观察细胞是否发生质壁分离。（5）在盖玻片一侧滴一滴清水，另一侧用吸水纸吸，重复几次，让洋葱表皮浸润在清水中。（6）低倍镜下观察原生质层位置、细胞大小变化（变大），观察是否质壁分离复原。四、实验结果分析：细胞液浓度外界溶液浓度 细胞失水（质壁分离）细胞液浓度外界溶液浓度 细胞吸水（质壁分离复原） 五、特别提醒（1）实验成功的关键是实验材料的选择，选择有大液泡并有颜色的植物细胞，便于在显微镜下观察。（2）质壁分离和质壁分离复原中水分子移动是双向的，结果是双向水分子运动的差别所导致的现象。（3）质壁分离后在细胞壁和细胞膜之间充满的是浓度降低的外界溶液，因细胞壁是全透性且有水分子通过原生质层渗出来。（4）若用50%蔗糖溶液做实验，能发生质壁分离但不能复原，因为细胞过度失水而死亡。（5）若用尿素、乙二醇、KNO3、NaCl做实验会出现自动复原现象，因外界物质会转移到细胞内而引起细胞液浓度升高。（5）实验拓展：可利用本实验原理测定细胞液浓度、判断细胞的死活、说明原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性等。例2.（11小高考第40题）为了观察植物细胞质壁分离和复原的现象，某同学设计并进行了如下实验：材料用具：洋葱；刀片，镊子，滴管，载玻片，盖玻片，吸水纸，显微镜；质量浓度为0.075g/mL的胭脂红溶液（胭脂红是一种水溶性的大分子食用色素，呈红色），清水等。方法步骤：请回答下列问题：（1）图中步骤B显微镜观察的目的是 。（2）假如该同学发现植物细胞持壁分离后不能复原，可能的原因有 、 ，导致细胞过度失水而死亡。（3）该同学在步骤D观察到了质壁分离现象，其实验结果应为下图中的 （填序号）、判断的理由有_。三、探究影响酶活性的因素一、酶的高效性比较过氧化氢在不同条件下的分解（1）实验过程分析（2）实验注意事项实验时必须用新鲜的、刚从活的动物体中取出的肝脏作实验材料。肝脏如果不新鲜，肝细胞内的过氧化氢酶等有机物就会在腐生细菌的作用下分解，使组织中酶分子的数量减少且活性降低。二、酶的专一性三、探究温度对酶活性的影响（1）实验过程分析 （2）实验注意事项因为过氧化氢酶的反应底物过氧化氢受热会分解，所以用其做温度探究的实验，会对实验结果带来干扰。 因为斐林试剂在使用时需要加热，这对温度探究带来干扰，而使用碘液无需加热，对实验无干扰。四、探究pH对酶活性的影响 思考：为什么不能用淀粉酶做探究pH的实验？答：因为淀粉在酸性条件下会分解，这对于判断淀粉酶能否使得淀粉水解出现干扰。故不能使用。例3.（08小高考第40题）为了探究酶的专一性，现用可溶性淀粉溶液、蔗糖溶液(两者都是非还原糖)以及淀粉酶溶液、斐林试剂等材料进行实验。 （1）实验步骤：取两支洁净的试管，编上号，然后按照下表中的要求进行操作。轻轻振荡这两支试