甲状腺微小乳头状癌组织中bax、nm23蛋白的表达及临床意义

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 甲状腺微小乳头状癌组织中 Bax、 nm23 蛋白的表达及临床意义 摘要 目的 研究甲 钕傥 橥纷窗（PTMC）组织中 B 淋巴细胞 瘤-2 相关 X 蛋白（Bax ） 、肿瘤转移抑 制基因 23（nm23）蛋白的表达及临床 意义。 方法 选择 2016 年 5 月2017 年 5 月在南通大学附属海安医院接受手 术治疗的 PTMC 患者的组织石蜡标本 103 例记为观察组，将术中切除的距离 肿瘤组织5 cm 的癌旁组织石蜡标本 103 例记为对照组，另选同期在医院接 受手术治疗的甲状腺腺瘤（TA）患者 100 例记为 TA 组，检测并对比各组 Bax 及 nm23 蛋白的表达，分析观察组 Bax 及 nm23 蛋白的表达与其病理参数 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 的关系，以及 Bax 与 nm23 蛋白的相关 性。 结果 观察组和 TA 组 Bax 蛋白的 阳性表达率均分别明显高于对照组，差 异均有统计学意义（均 P 中国论文网 /6/view-12955425.htm 关键词 甲状腺微小乳头状癌； 组织；Bax；nm23 蛋白；表达；临床意 义 中图分类号 R736.1 文献标识 码 A 文章编号 1673-7210（2017） 12（c）-0029-04 Abstract Objective To study the expression and clinical significance of B lymphocyte tumor associated -2 related X protein （Bax） ， tumor metastasis suppressor gene 23 （nm23） protein in papillary thyroid microcarcinoma （PTMC） tissues. Methods One hundred and three paraffin specimens of PTMC patients who was given surgery treatment in Haian Affiliated Hospital to Nantong University from May 2016 to -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 May 2017 were selected as observation group， the resection of the tumor was 5 cm far from paraffin embedded specimens of 103 cases of tumor adjacent tissues selected was as control group， another 100 patients with thyroid adenoma （TA） who was given surgery at the same time were chosen and enrolled as TA group， the expression of Bax and nm23 protein in each group was detected and compared， the relationship between the expression of Bax and nm23 protein and pathological parameters in the observation group was analyzed， and the correlation between Bax and nm23 protein was analyzed. Results The positive expression rates of Bax protein in the observation group and the TA group were significantly higher than the control group， and the differences were statistically significant （P 30 岁者；对本次研究知情同意， 并签署了同意书者。排除标准：其他 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 类别的恶性肿瘤者；病历资料数据缺 失者；术前有放化疗或免疫治疗史者。 将术中切除的距离肿瘤组织5 cm 的经 病理学检查为癌旁正常组织的石蜡标本 103 例设为对照组，另选同期在医院接 受手术治疗的甲状腺腺瘤（TA）患者 100 例设为 TA 组，男 40 例，女 60 例； 年龄 3168 岁，平均（50.291.26）岁。 各组患者的性别以及年龄资料比较，差 异无统计学意义（P 0.05） ，具有可比 性。关于本次研究，医院医学伦理委员 会已经作出了评审通过的批示。 1.2 研究方法 1.2.1 主要试剂 鼠抗人型 Bax 单克隆抗体（克隆号：2D2，编号： MAB-0254） ；鼠抗人型 nm23 单克隆 抗体（克隆号：37.6，编号：MAB- 0139） ；EDTA 修复液（编号：MVS- 0098/0099） ；MaxvisionTM/HRP 型免 疫组化试剂盒（编号：KIT-5030） ； DAB 试剂盒。以上主要试剂均购自 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 福州的迈新公司。 1.2.2 Bax 及 nm23 蛋白表达的检 测 通过免疫组化法实施测定，主要步 骤为：将石蜡标本切片、脱蜡、入水； 经抗原 EDTA 液热修复，再用膦酸盐 的缓冲液（PBS）进行 3 次冲洗，3 次 /min；利用 3%双氧水行 10 min 的孵 育，再进行 PBS 液的 3 次冲洗，3 次 /min；清除 PBS，在切片上滴入一抗， 放于 4下过夜，而后进行 PBS 液的 3 次冲洗，3 次/min；清除 PBS，在切 片上滴入 MaxvisionTM/HRP，放在室温 下孵育约 15 min，而后进行 PBS 液的 3 次冲洗，3 次/min；清除 PBS，经 DAB 显色；用自来水冲洗以终止显 色，再用苏木精复染，常规进行乙醇脱 水和二甲苯透明，以及树胶封固处理， 将 PBS 代替一抗用于阴性对照，将已知 的阳性切片用于阳性对照。 1.2.3 评价标准 Bax 蛋白阳性主 要定位于细胞膜和胞浆内，nm23 蛋白 阳性主要定位于细胞浆内，选取每个切 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 片的 10 个高倍视野，统计每个视野内 的 100 个肿瘤细胞的阳性数目，颜色为 淡黄、棕黄亦或是棕褐色记为阳性，不 着色记为阴性4。 1.3 观察指标 对比各组 Bax 及 nm23 蛋白的表 达情况，分析观察组 Bax 及 nm23 蛋白 的表达与其病理参数的关系，以及观察 组 Bax 与 nm23 蛋白的相关性。 1.4 统计学方法 采用 SPSS 21.0 统计学软件进行 数据分析，计量资料用均数标准差 （xs）表示，两组间比较采用 t 检验； 计数资料用率表示，组间比较采用 2 检验，相关性用 Spearman 法进行，以 P 0.05） 。观察组 nm23 蛋白的阳性表 达率均明显高于 TA 组和对照组，差异 有统计学意义（均 P 0.05） 。见表 1、 图 1（封三） 。 2.2 观察组 Bax 及 nm23 蛋白的 表达与其病理参数的关系分析 观察组有淋巴结转移的患者 Bax -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 及 nm23 蛋白的阳性表达率均明显低于 无淋巴结转移者，差异均有统计学意义 （均 P 0.05） ，这些结果提示了 Bax 和 nm23 蛋白在 PTMC 及 TA 患者中均 具有明显升高的阳性表达，且 nm23 蛋 白在 PTMC 患者中的阳性表达更高。分 析原因，主要可能与 Bax 和 nm23 在肿 瘤细胞中的作用机制有关。具体而言， Bax 属于 Bcl-2 基因家族群体当中具有 代表性的促凋亡基因，其可表达出多类 亚型，可对细胞内线粒体的凋亡途径进 行有效调控9-10。由于其表达蛋白通 常定位在细胞浆内，若获得凋亡信号的 刺激，则可产生同源二聚体而嵌入到线 粒体膜内，致使细胞色素 C 从线粒体不 断释放进胞质，并在一系列联结反应后 形成凋亡小体，最终使得细胞凋亡。 nm23 属于肿瘤转移的抑制性基因，其 可通过对磷酸二核苷激酶和组氨酸激酶 的活性进行作用，致使三磷酸核苷的来 源缺乏，进而使得细胞在减数分裂过程 中的纺锤体形成异常，导致染色体畸变 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 及形成非整倍体的细胞，最终介入到肿 瘤的形成及转移中11-13。而 Bax 在 PTMC 及 TA 患者组织中的表达无明显 差异则可能是因为伴随肿瘤组织的细胞 恶性程度加剧，为了保持细胞稳态，肿 瘤组织的有关细胞提升了细胞凋亡的速 度，但此时细胞已无法有效维持其自我 稳态，致使细胞凋亡速度的增大幅度明 显低于增殖速度的增大幅度，因此无法 遏制 DNA 的错误复制和诱导细胞凋亡， 因此 Bax 蛋白在 PTMC 及 TA 患者组织 中的阳性表达差异不大。本研究还发现， 观察组 Bax 及 nm23 蛋白的表达与患者 的性别、年龄及临床分期无明显关系， 但有淋巴结转移的患者 Bax 及 nm23 蛋 白的阳性表达率均明显低于无淋巴结转 移者（均 P 0.05） 。提示 PTMC 患者 Bax 及 nm23 蛋白的阳性表达与其局部 淋巴结的转移情况有关。原因主要与 Bax 的促凋亡作用及 nm23 的癌细胞转 移抑制作用有关。Bax 蛋白的表达降低 使得 PTMC 存在更加强大的侵袭能力， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 也更易朝局部淋巴结区域转移14-15。 而 nm23 可通过对细胞骨架进行作用而 干扰肿瘤细胞的运动，进而抑制其转移 16-18。在有淋巴结转移的 PTMC 患者 中，Bax 和 nm23 蛋白作用效果较差， 二者的表达相对更低。本研究还发现， 观察组 Bax 与 nm23 蛋白的表达呈正相 关（P 0.05） ，再次C 实 Bax 与 nm23 蛋白的表达对肿瘤细胞的作用具 有一定的