中医药治疗类风湿性关节炎血管新生的治疗研究进展

中医药治疗类风湿性关节炎血管病变的实验研究进展 类风湿关节炎是是一种常见的多系统性炎症性自身免疫性疾病，通常累及外周关节， 也可以影响体内任何滑膜关节。RA 的基本病理改变为滑膜炎症，急性期表现为渗出性细 胞浸润，当病变进入慢性期表现为滑膜肥厚绒毛样突起形成。绒毛样突起又称血管翳，而 滑膜血管新生是产生和维持 RA 血管翳的重要标志和根本环节。其主要病理变化是关节滑 膜血管新生和对关节破坏力极强的血管翳形成。有学者认为，在类风湿性关节炎的发病过 程中，血管生成出现得很早，甚至在炎症特异的临床征象和组织学征象出现以前就有了。 随着血管增生滑膜细胞增生，血管增生是 RA 早期的表现且先于其他症状的出现。血管增 生为滑膜细胞提供了更多的营养物质，同时也使更多的细胞因子、炎性因子浸润滑膜，这 些都促进并维持了血管翳。对于类风湿性关节炎患者，血管生成是一个由促血管生成和抑 血管生成调节因子调控的复杂过程。中医中药发挥整体辨证优势，在类风关的治疗中发挥 西医药不可替代的长处，其中对类风关血管病变的治疗研究是目前的一个研究热点，笔者 通过复习文献，现将中医药对类风关血管病变的实验研究进展分述如下。 一、单味药 雷公藤是目前国内研究最多的单味药，目前临床上最常用的制剂是雷公藤提取物。根 据其不同的提取部位分为雷公藤根制剂和雷公藤叶制剂两类。常用的雷公藤根制剂有醋酸 乙酯提取物片和水-氯仿提取物片 (雷公藤多苷片)，为了更充分地开发利用雷公藤的药用价 值，节约资源，国内厂家和科研单位开发了雷公藤的叶制剂雷络酯片和雷公藤总酯片。 体外研究发现，雷公藤可以抑制类风关病人的滑膜细胞分泌免疫球蛋白和炎性介质前列腺 素 E1、 2、基质金属蛋白酶 (MMPs)3，这对于改善关节炎症，控制局部症状有着重要的临 床意义。雷藤氯内酯醇(T4)是从雷公藤中提取的有效单体，它可抑制白介素 -1(IL-1)刺激引 起的滑膜成纤维细胞增殖，提示 T4 可能通过抑制滑膜细胞增殖，抑制血管翳形成，从而 减轻软骨破坏，控制类风关的发展 4。正常情况下，滑膜细胞增殖和凋亡处于动态平衡状 态，在类风关病变关节中，存在凋亡不足，滑膜细胞过度增殖，形成了血管翳，侵蚀破坏 关节软骨。进一步的研究证实，雷公藤具有诱导人滑膜细胞凋亡的作用 5，这可能是其抑 制滑膜细胞增殖的机制之一。蔡辉等人发现姜黄素对佐剂性关节炎大鼠的关节炎症具有治 疗作用，可以降低血清 VEGF，抑制滑膜 VEGF 及 VEGFR-2 的表达，减少滑膜血管密度 6。 陈刚等 7观察到 100mg/(kgd)川芎嗪可降低 CIA 大鼠关节炎指数积分和炎症足垫厚度 (P005)，减轻炎症关节结构的破坏，改善滑膜毛细血管内皮细胞超微结构，抑制滑膜表 达血管内皮生长因子(VEGF)和减少滑膜微血管密度(P005)。 二、中成药 王振宇 8以四妙丸（含黄柏、苍术、牛膝、薏苡仁各等分）为研究对象，以雷公藤多 甙片为对照，结果表明四妙丸可抑制佐剂性关节炎（adjuvant induced arthritis，AA）大鼠 足跖肿胀度，提高压力耐痛值，改善胸腺和脾脏指数，减轻病变关节滑膜炎症与增生，并 可抑制 AA 大鼠血清 TNF- 和 IL-1 分泌，下调滑膜组织中 VEGF 表达，发挥抗炎、免 疫调节、抑制血管翳形成的作用。房丹等 9以尼美舒利片和甲氨蝶呤为对照，实验表明清 痹片（含白花蛇舌草、青风藤、防风、乳香、没药、黄芪、生地黄、甘草等）可减轻胶原 诱导性关节炎（CIA）大鼠滑膜组织病理学形态改变，抑制滑膜细胞浸润，从而减轻滑膜 增生及关节破坏。佟丽等 10以寒湿痹片（含附子、制川乌、黄芪、桂枝、麻黄、白术、当 归、白芍、威灵仙、细辛和甘草等）干预 AA 大鼠，发现该药可抑制炎症高峰期（ 14d） AA 大鼠外周血白细胞、血小板总数，下调炎症后期（28d ）单核细胞、血小板总数，降低 CD+8 水平，调整 CD+4/CD+8 接近正常；下调血清 TNF-、滑膜组织 IL-1、IL-6 和 VEGF 水平，提高 IL-10 水平，通过保持细胞因子网络的相对平衡而抗炎和抑制病情进展。 赵争敏等 11以蜂毒注射液干预 CIA 大鼠，与甲氨蝶呤片对照组差异无显著性，均抑制血清 TNF-、PGE2 水平和滑膜组织病理改变。孙钰等 12复制 CIA 大鼠模型，取脾脏分离淋巴 细胞，实验发现正清风痛宁注射液减轻关节肿胀，下调血清抗型胶原抗体含量，抑制淋 巴细胞增值，钼靶摄片及病理学观察提示抑制关节破坏。黄清春等 13实验发现通痹灵浸膏 （含桂枝、芍药、知母、生姜、甘草、麻黄等）可抑制体外培养 RA 患者膝关节滑膜细胞 VEGF mRNA 表达，减轻滑膜血管翳增殖。 三、复方 吴素玲等通过建立 2 型胶原诱导大鼠类风湿性关节炎模型，并以实时荧光 PCR 法检测关 节滑膜组织 VEGFmRNA 表达量的方法进行研究，发现痹痛灵颗粒对 2 型胶原关节炎大鼠 关节肿胀有一定的抑制作用，并能显著降低#型胶原诱导类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织 中 VEGFmRNA 含量，提示痹痛灵颗粒治疗类风湿性关节炎机理可能是通过抑制造模大鼠 关节滑膜组织中 VEGFmRNA 的表达，起到治疗作用 14。尪痹片是治疗久痹体虚型痹病的 纯中药复方制剂，具有补益肝肾、温经止痛之功效，甘丽等 15人发现采用热灭活的结核分 枝杆菌(heat-killedmycobacterium tuberculosisH37Ra，Mtb)诱导 SD 大鼠佐剂性关节炎模型， 分组给予尪痹片低、高剂量治疗，并与西药(来氟米特) 对照， 28d 后，用 ELASA 法测定滑 膜组织 VEGF 水平，结果发现，经尪痹片治疗后，AA 大鼠滑膜组织 VEGF 水平显著降低， 说明抑制 VEGF 的生成是尪痹片对 RA 抗炎、减轻病理损伤的一个重要机制。 “清痹合剂” 是在中医理论指导下创立的经验方，由木贼草、寒水石、乌梢蛇等几味中药组成，实验证 明中等浓度的清痹合剂联合小剂量的甲氨蝶呤治疗，具有减轻滑膜充血、水肿、抑制肉芽 肿及血管翳形成，而大鼠的一般情况也随之有明显改善 16。大量研究已经证实，通痹灵对 多种细胞因子有明显的干预作用，其中对 CIA 大鼠滑膜 VEGF 有明显抑制作用 17。而黄 清春等人 18行关节腔镜手术取 RA 患者膝关节滑膜组织消化分离滑膜细胞进行分组培养， 分为空白对照组、通痹灵高剂量组、通痹灵低剂量组，结果发现：通痹灵高、低剂量组 VEGF mRNA 表达较对照组明显降低(P 0.05)。说明通痹灵可以下调 RA 患者滑膜细胞 VEGF mRNA 表达水平，从而可以通过抑制 VEGF 表达减轻滑膜血管翳增殖。 四、总结与展望 血管生成是 RA 的一个重要病理生理过程，抑制新生血管生成，减轻甚至逆转血管生 成的病理过程可能是治疗类风湿关节炎的一种全新方法。中医药治疗类风湿性关节炎血管 病变是最近几年研究的一个热点，通过作用于血管生成的不同环节进行干预，尤其对血管 翳的形成起着关键的作用的靶点 VEGF 和 TNF- 进行干预，将弥补针对 VEGF 的单克隆 抗体等治疗类风湿性关节炎所遇到的问题及不足。单一的抗血管生成治疗在临床上能否取 得预期效果尚未可知，与传统疗法联合治疗是否更有益，这还有待于今后的研究来证实。 参考文献 1 曾学军，张乃峥雷藤氯内酯醇对正常人及类风湿关节炎患者周围血单个核细胞 及滑膜细胞产生免疫球蛋白的影响J药学学报， 1997， 32(3)： 171-173 2 要庆平，张乃峥雷公藤单一有效成分 T4 对类风湿关节炎患者滑膜细胞产生前列 腺素 E2 的影响 J药学学报， 1994， 29(10)： 790-792 3 LIN N， SATO T， ITO A Triptolide， a novel diterpenoid triepoxide from Tripterygium wilfordiiHook f， suppressesthe production and gene expression of pro-matrix metallo-proteinases 1 and 3 and augments those of tissue inhibitorsofmetalloproteinases 1 and 2 in human synovial fibroblastsJ ArthritisRheum， 2001， 4(9)： 2193-2200 4 郭垣，于孟学，姜玉娟，等雷公藤单体 T4 对 IL-1 刺激引起的类风湿患者关节 滑膜成纤维细胞增殖和产生 IL-6 的影响 J中国医学科学院学报， 2000， 22(2)： 190- 192 5 KUSUNOKIN，YAMAZAKIR，KITASATO H， et al Trip-tolide， an active compound identified in a traditional Chi-nese herb， induces apoptosis of rheumatoid synovial fibro-blastsJBMC Pharmaco ，l2004 ，4(1)：2 6 蔡辉，商玮，郭郡浩，等 姜黄素对佐剂性关节炎大鼠滑膜血管新生的影响 J中国微循环，2009，13（ 6）：497-500 7 陈刚，徐晓玉，丰俊东，等川芎嗪抑制 II 型胶原诱发关节炎大鼠滑膜损伤作用 机制的研究 J北京中医药大学学报，2005，28(3)：45-48 8 王振宇四妙丸对类风湿性关节炎作用的实验研究黑龙江中医药大学，2007：1- 3 9 房丹，刘维，张宏博，等清痹片对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织病理学改变 的影响山东中医杂志，2007，26(5)：329-331 10 佟丽，吴启富，辛增辉，等寒湿痹片对 Mtb 诱导的佐剂性关节炎大鼠外周血细 胞、T 淋巴细胞亚群及细胞因子水平的响中药药理与临床，2009，25(3)：54-56 11 赵争敏，薛鸾，曹瑶蜂毒对胶原诱导大鼠关节炎 TNF-、IL-1 、PGE2 的影 响河南中医，2009，29(12)：1169-1171 12 孙钰，欧阳桂林，张永立，等青藤碱对胶原诱导性大鼠关节炎症的影响及其作 用机制湖南中医药大学学报，2009，29(9)：51-55 13 黄清春，储永良，接力刚，等通痹灵对类风湿关节炎滑膜细胞血管内皮生长因 子 mRNA 的影响中国中医药信息杂志，2009，16(2)： 34-35 14 吴素玲，汪悦，夏卫军 痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠关节滑膜 组织中 VEGFmRNA 表达的影响新中医，2009，41（12）：98-100 15 甘丽，吴启富，康信忠，等尪痹片对大鼠实验性类风湿关节炎的防治作用中药 材，2