乳腺癌肿瘤标志物

乳腺癌免疫组化指标的临床意义 ER、PR：正常乳腺上皮细胞内存在 ER、PR。当细胞发生癌变时，ER 和 PR 出现部分和全部缺失。如果细胞仍保留 ER 和（或）PR，则该乳腺癌细胞的生长 和增殖仍然受内分泌的调控，称为激素依赖性乳腺癌；如果 ER 和（或）PR 缺 失，则该乳腺癌细胞的生长和增殖不再受内分泌的调控，称为非激素依赖性乳 腺癌。 C-erbB2 癌基因：在正常乳腺组织中呈低表达，在乳腺癌组织中表达率可增 高，其表达与乳腺癌分级、淋巴结转移和临床分期呈正相关，表达率越高，预 后可能也就越差。 P53 基因：p53 突变率高的乳腺癌细胞增殖活力强、分化差、恶性度高、侵 袭性强和淋巴结转移率高。p53 过度表达提示对第三代芳香化酶抑制剂疗效不 佳。 p63：p63 基因本身是一个抑癌基因，p63 在乳腺癌的发生、发展过程中起着 重要的作用；检测可为乳腺癌的早期诊断、及时治疗及预后判断提供必要的理 论依据。 p27：p27 抑癌基因，研究表明,p27 是乳腺癌的一个独立的预后标志,p27 低 表达与 TNM 分期晚、淋巴结转移、局部复发、远处转移相关,而且 p27 低表达与 生存期短、预后差显著相关。在今年的 ASCO 会议上,Porter 等采用组织芯片技 术进行的研究表明,在接受 AC 方案化疗的乳腺癌患者中,p27 不表达或低表达均 提示在 OS 和 DFS 上预后不佳。 COX-2(cyclooxygenase-2)：乳腺癌组织中存在 COX-2 的表达。COX-2 可能 是临床评价病人预后、识别术后复发的高危险性病人很有实用价值的指标。 Ki-67：与乳腺癌尤其是淋巴结转移阴性患者的预后相关，有助于确定是否 采用辅助性化学治疗。 E-cadherin：E-cadherin 是一类建立细胞间紧密连接、维持细胞极性、保 持组织结构完整的钙依赖性跨膜糖蛋白。E-cadherin 主要介导同型细胞的粘附 功能，E-cadherin 表达下降或功能缺失使癌细胞与邻近细胞间的黏附作用降低 ，导致肿瘤细胞的活动能力和范围增加，从而增加癌细胞的转移和浸润能力， 可作为乳腺癌的判断预后指标。 PS2：在预测内分泌治疗反应方面，PS2 比 ER 测定可能更有用，PS2 的表达 是乳腺癌内分泌治疗反应的最好指标。 Calponin:在乳腺正常组、增生组、不典型增生组中,几乎所有的肌上皮细胞 表达 p63、-SMA 和 Calponin,而所有的腺上皮细胞 3 种抗体均为阴性；有助 于判断浸润癌、原位癌及不典型增生。 CK ：CK-L,CK8/18,CK7,CK20,CK34E12 这四种是细胞因子（cytokine） 中的细胞角蛋白（cytokeratin.CK),EMA(Epithelial membrane antigen)是上 皮膜抗原,CEA(carcinoembryonic antigen)是癌胚抗原.这些指标通常联合起来 用于检查例如来源于上皮细胞的肿瘤,如消化道肿瘤(食管癌,胃癌等),泌尿系肿 瘤(前列腺癌,肾癌等),乳腺癌等妇科肿瘤.由于这些指标可以检出的肿瘤很多, 特异性相对不高,所以还要结合其他检查包括:病史,查体以及活检病理等综合手 段来诊断,不能单一靠你说的这些指标来确诊某种肿瘤.但你说给的检查结果有 很多阳性,提示有肿瘤的存在,需要进一步检查。 SMA（smooth muscle actin）：平滑肌肌动蛋白是可靠的标记抗体。从乳腺 正常组织、良性病变到原位癌,早期浸润和浸润性癌，ME 的消失是一逐渐发展 的过程。 EMA：上皮膜抗原（EMA）、EMA 为一组高分子量为主的糖蛋白 ,组织分布 特点是一般限于上皮细胞的腔缘表面膜 ,细胞基底面及侧面胞膜无 EMA 分布。 高分化腺癌主要呈膜型分布 ,低分化腺癌或未分化癌主要以胞浆型分布。EMA 一般不见于间叶性肿瘤 ,故 EMA 是较好的上皮源性肿瘤标志 ,也可以作为胃癌 淋巴结微转移的重要指标之一。 Laminin：层粘连蛋白主要存在于基膜(basal lamina)结构中，是基膜所特 有的非胶原糖蛋白, 相对分子质量为 820kDa, 含 13-15%的糖，有三个亚单位, 即重链( 链, 400kDa)和 1(215kDa)、2(205kDa)两条轻链。结构上呈现不 对称的十字形, 由一条长臂和三条相似的短臂构成。这四个臂均有棒状节段和 球状的末端域。1 和 2 短臂上有两个球形结构域, 链上的短臂有三个球 形结构域，其中有一个结构域同型胶原结合，第二个结构域同肝素结合，还 有同细胞表面受体结合的结构域。正是这些独立的结合位点使 LN 作为一个桥梁 分子，介导细胞同基膜结合。所以 LN 的主要功能就是作为基膜的主要结构成分 对基膜的组装起关键作用, 在细胞表面形成网络结构并将细胞固定在基膜上。L N 还有许多其他的作用,如在细胞发育过程中刺激细胞粘着、细胞运动。LN 还能 够刺激胚胎中神经轴的生长,并促进成年动物的神经损伤后重生长和再生。如同 纤粘连蛋白,细胞外的 LN 能够影响细胞的生长、迁移和分化。LN 在原生殖细胞 的迁移中起关键作用。LN 也是一种大型的糖蛋白，与型胶原一起构成基膜， 是胚胎发育中出现最早的细胞外基质成分。LN 分子由一条重链（）和二条轻 链（、）借二硫键交联而成，外形呈十字形，三条短臂各由三条肽链的 N 端序列构成。每一短臂包括二个球区及二个短杆区，长臂也由杆区及球区构成 （图，结构模型）。LN 分子中至少存在 8 个与细胞结合的位点。例如，在长臂 靠近球区的。链上有 IKVAV 五肽序列可与神经细胞结合，并促进神经生长。鼠 LN1 链上的 RGD 序列，可与 v3 整合素结合。现已发现 7 种 LN 分子，8 种 亚单位（1,2,3,1,2,3,1,2），与 FN 不同的是，这 8 种亚单 位分别由 8 个结构基因编码。LN 是含糖量很高（占 15-28）的糖蛋白，具有 50 条左右 N 连接的糖链，是迄今所知糖链结构最复杂的糖蛋白。而且 LN 的多 种受体是识别与结合其糖链结构的。 Cyclin D1：Cyclin D1 的高表达可能在人乳腺癌的发生、发展中起重要作 用。在乳腺癌中高表达的临床意义是：Cyclin D1 的表达与肿瘤大小、TNM 分期 及腋淋巴结转移相关。 EGFR ：上皮生长因子受体(Epidermdl grouth factor receptor,EGFR) EGFR 和 C-erdB-2 一样，同属型生长因子受体家旅。是一种酪氨酸激酶受体 ，主要分布于细胞膜，在正常的情况下，EGF 是一种潜在的有丝分裂因子，当 其与靶细胞受体结合时，就能够刺激细胞增殖。肿瘤周围的细胞受到肿瘤细胞 分泌因子刺激开始表达 EGFR，而 EGFR 的表达使“正常”的周围细胞逐渐向恶 性表型转化。 nm23：nm23 又称为抗转移癌基因，是一种抑癌基因，产物是由 152 个氨基 酸组成的蛋白质，与二磷酸核苷激酶（NDPK）的氨基酸序列具有高度同源性。 人类 nm23 基因有 2 个亚型：nm23H1 和 nm23H2，两者有 88同源性，nm23H1 与 乳腺癌的预后关系更密切。nm23 蛋白具有 NDPK 功能，通过影响微管聚合而调 节细胞运动，并通过影响 G 蛋白的信号传递而发挥负向调节作用，从而抑制肿 瘤转移。但其作用并不依耐于 NDPK 的活性。有实验结果表明，与转移潜能有关 的是 nm23NDPK 的表达水平而不是 NDPK 的活性。nm23 是独立预后指标，其表达 与年龄、肿瘤大小、ER、PR 和 CerbB2 无关，与淋巴结转移状况、组织学 分型、分级及临床分期均有显著关系，nm23 高表达者的预后明显好于低表达者 。nm23 表达降低的乳腺癌分化较低，ER 表达水平低，并常常出现淋巴结转移， 预后不良。在乳腺癌进展过程中，nm23 的表 达水平降低。通过检测 nm23 可以 把腋淋巴结阳性病人中可能发生远处转移和腋淋巴结阴性病人中有潜在高转移 倾向的病例筛选出来，进行相应的预防性治疗，从而提高治疗效果。 VEGF：血管内皮细胞生长因子（VEGF） 血管形成在肿瘤生长、浸润、转移 中起关键作用，它受到一系列促进和抑制因子的调节，其中最重要的促进因子 之一是肿瘤细胞在生长过程中分泌的 VEGF，它的编码基因位于 6P21.3，由 8 个 外显子构成，由于 mRNA 不同的剪切形式，形成 5 种不同的 VEGF，分别含有 121 、145、165、189、206 个氨基酸，其中以 VEGF165 最重要，在各种细胞中表达 占优势，VEGF121 和 VEGF189 在大部分表达 VEGF 的组织和细胞中均能检测到， VEGF145 和 VEGF206 非常少见，其中 VEGF206 只在人胎肝 cDNA 库中可以检测 到。VEGF 通过二硫键结合形成二聚体后才有活性，它的受体为酪氨酸蛋白激酶 型膜受体，具有高度特异性。当 VEGF 与受体结合后，可以刺激血管内皮细胞增 殖，促进血管形成，并增加血管通透性，这样肿瘤细胞一方面可以获得充分的 营养而迅速增殖，另一方面也容易通过血管内皮细胞进入血流从而发生远处转 移。VEGF 主要由肿瘤细胞产生，小部分来自细胞间质，它是独立预后指标，与 年龄、绝经状态无关，与 ER、PR 呈负相关，高表达者易转移复发，预后不良， 且内分泌治疗和化疗的效果差，建议对 VEGF 高表达者联合应用抗血管生成治疗 ，如利用 VEGF 单抗阻断与受体结合，重组 VEGF 与 VEGF 竞争受体，将 VEGF 与 小分子毒性物质结合，利用反义核酸技术抑制 VEGF 表达等等，VEGF 单克隆抗 体阿瓦斯汀、伊利替康。 实验表明,循环中的 VEGF 是预后指标,高表达者易发生转移复发,且该指标 可用于指导治疗。在今年的 ASCO 会议上,Ghosh 等报告,VEGF 在乳腺癌组织中的 表达明显高于基质,而且与一些预后不良因素相关,高表达患者在 20 年生存上提 示预后不良。Ryan 等对 399 例乳腺癌患者的检测分析显示,VEGF 表达与新的肿 瘤标志物生存素(survivin)的表达呈正相关,survivin 表达增加提示乳腺癌患 者预后不良。Traina 报告了一项来曲唑+VEGF 单克隆抗体贝伐单抗治疗激素受 体阳性转移性乳腺癌患者的研究,在此研究中,通过检测组织中的 VEGF 来指导治 疗并评价与疗效的相关性。 BRCA1：基底细胞样乳腺癌是预后不佳的一类高级别乳腺癌，它们的典型表 现是 ER，PR 和 HER-2 阴性表达。发病率大约占总乳腺癌患者的 15-20%，且发 病与 BRCA1 基因突变有很大的关联性。 Bcl-2：抑凋亡基因包括 Bcl-2、Bcl-x1、Bcl-w、mcl-1 等;促凋亡基因包 括 Bcl-xs、Bax、Bad、Bak、Hrk 和 Bim 等。这两类物质相互结合、彼此抑制, 往往由其数量的相对多少决定凋亡发生与否。在 Bcl-2 家族中 Bcl-2 蛋白是最 早被发现,分离,目前为止研究得较为透彻的家族成员。研究表明,它定位于线粒 体膜、内质网膜和核膜上,具有离子通道( ion channel )和停靠蛋白(docking protein)的双重功能,在介导细胞凋亡的途径中起关键作用。Bcl-2 蛋白通过调 控内质网 Ca2 +参与的核内外物质转运及膜通透性转换(PT)来阻止细胞色素 C 从线粒体中释放,从而阻止了其与 Apaf-1、procaspase-9 的相互作用,最终抑制 Caspase-9、Caspase-3 引发的细胞凋亡级联反应过程。总之作为一种抗凋亡基 因,Bcl-2 可保护细胞免于病毒、氧化剂等刺激诱导的细胞凋亡。 目前研究认 为 Bcl-2 基因及其相关蛋白高表达抑制细胞凋亡是肿瘤发生和产生耐药现象的 重要因素。 CD44v6：CD44v6 是与癌细胞侵袭和转移行为有密切关系的跨膜蛋白，不仅 介导肿瘤细胞与细胞外基质的粘附，还参与肿瘤细胞之间、肿瘤细胞与其他细 胞之间的相互作用，CD44v6 作为淋巴细胞的归巢受体和透明质酸的主要受体， 能够连接细胞外基质，与细胞骨架蛋白结合，参与细胞伪足的形成，引起细胞 的形态和游动性改变，能够直接参与肿瘤细胞的侵袭和转移。 Pokemon：Pokemon 在多种人类肿瘤中过度表达，Pokemon 通过特异地抑制 肿瘤抑制基因 ARF 的转录发挥作用，缺乏 Pokemon 基因的细胞对致癌转化不应 答，因此该基因在肿瘤发生过程中起着关键性作用。 CD117：CD117 一般标记胃肠道间质瘤。 S-100：CgA(-)，S-100，SyN(-)是神经内分泌指标。阴性说明不是神经内 分泌癌。S-100 蛋白是一种酸性钙结合蛋白，分子