区分野生型和突变体果蝇实验

区分野生型和突变体果蝇实验 一、 【目的】 1、熟悉野生型和突变体果蝇的各种性状特征。 2、能够区分野生型和突变体果蝇。 3、区分几种常见的突变性状；白眼(w)、残翅(vgvg)、黑檀体(ee)。 二、 【原理】 1、果蝇的各种类型及特点： 野生型 灰身 红眼 直刚毛 长翅 圆眼 残翅 灰身 红眼 直刚毛 残翅 圆眼 三隐形 灰身 白眼 卷刚毛 小翅 圆眼 黑檀体 黑身 红眼 直刚毛 长翅 圆眼 2、野生型果蝇为红眼、灰体、长翅、直刚毛。 ”+” 突变体与野生型有明显差别： 白眼其他形状与野生一样。 ”W” 乌身又叫黑檀体， ”e” 残翅翅膀显著退化，部分残存，不能飞“vg” 野生型 突变体 三、 【材料】 黑腹果蝇 四、 【方法】 1、培养基的配制 1 果蝇培养基的配制 配方 水ml 琼脂g 蔗糖g 玉米粉 g 丙酸 ml 酵母粉g 80 100 1.5 1 13 10 10 10 . 5 0.5 . 5 0.5 配方可用于培养杂交果蝇，因培养基较干稠，可避免黏着果蝇配方可用于原 种保存，因培养基较稀，可延长培养时间两种培养基也可都用苯甲酸而不用丙酸 2、果蝇的饲养 25 度是其最适宜的生长温度。 3、果蝇的麻醉 果蝇麻醉方法 1取下培养瓶塞，将培养瓶与麻醉瓶紧密对接； 2左手握紧两瓶接口处，倒转使培养瓶向上； 3右手轻拍培养瓶将果蝇震落到麻醉瓶中； 4分开两瓶，将瓶盖各自盖好； 5将麻醉瓶的果蝇轻拍到瓶底，迅速拔出塞子，滴上几滴乙醚，重新塞上麻醉瓶； 6一段时间后，观察果蝇，不再爬动，并在瓶壁上站不稳，麻醉完成。注意不能麻醉过度， 如果果蝇的翅膀与身体呈 45 度角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡。 7将麻醉好的果蝇倒出，在一张滤纸上，观察果蝇的性状。 8将需要的果蝇用毛笔转移到一个新的培养瓶中，注意先将培养瓶平放，待果蝇苏醒后再 将培养瓶直立起来，以防果蝇被新配制的略带粘稠的培养基粘住。 4、果蝇的转移 5、果蝇的杂交 （1）.选处女蝇 选白眼焦刚毛小翅处女蝇 8 只，同时选野生型处女蝇 8 只。方法:将野生型和白 眼焦刚毛小翅果蝇培养瓶内的成蝇全部赶去，12 小时内将重新孵化出的雌雄果 蝇分开，即可得所需处女蝇和雄蝇。 (2).杂交 将白眼焦刚毛小翅处女蝇麻醉，并挑取野生型蝇 8 只麻醉后放入培养瓶，此 杂交组合可用作伴性遗传和基因定位的观察统计。将野生型处女蝇 8 只麻醉， 同时将同样数量的白眼焦刚毛小翅雄蝇麻醉，放入培养瓶，此组合用于分离定 律和伴性遗传实验的反交。贴好标签。注明杂交组合和日期，学生姓名。 3. 25条件下培养 78 天后，赶去亲本蝇。 (3).观察 F1 1113 天后，F 1代羽化，用放大镜对正交组合的 F1进行观察，看 F1雌蝇是否 为野生型，雄蝇是否全为三隐性，若不是，表明处女蝇是非处女蝇，实验失败。 (4).F1正交 选 8 对 F1雌雄蝇麻醉，转入新的培养瓶，进行正交，贴好标签。 （5）.放飞 F1 8 天后赶去 F1。 (6）.观察 F2 12 天后，F 2羽化，将其麻醉后于白瓷板上用放大镜观察，或用解剖镜、显微镜 观察各种表型的果蝇并统计数目，每隔 2 天观察一次，连续 4 次。统计后的果 蝇倒入死蝇盛留器中。 6、取亲本（处女蝇亲本） 7、F 1 带自交 8、再取亲本（F1 亲本） 9、根据突变性状记录结果 一些常见的突变性状 野生型：灰身、长翅（长度约为腹部长度的两倍）、红眼、直刚毛（头胸部以及复眼的周 围具有平直，先端略弯的长型粗黑硬毛）； 突变体 1：黑檀体、红眼、残翅、直刚毛 突变体 2：白眼、灰身、长翅、直刚毛