干化学和湿化学生化结果分析

摘要】 目的 对干化学法和全自动生化分析检测血糖(Glu)、肌酐(Cr)、尿素(Urea)、血清 钙(Ca)、磷 (P)、淀粉酶 (Amy)、肌酸激酶(CK)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的结果进行比较分 析，对这两种检测方法之间进行方法学的评价。方法 以 320 例门诊及住院病人，其中男 162 例，女 158 例，平均年龄(43.621.1) 岁，分别进行 GLu、Cr、Urea、Ca 、P、Amy、CK、ALT 八个项目干化学试纸法和全自动生化分析仪测 定，对比分析两种方法相关性;用 BECKMAN 未定值人血基质质控血清 LEVEL1 和 LEVEL3 以两种方法对 GLu、Cr、Urea、Ca、P 、Amy、CK、ALT 各进行 10 批次检测， 分析两种仪器精密度。结果 干化学试纸法与全自动生化分析仪法各项检测结果有高度正相 关性(r0.93)，两者相比差异无显著性(P0.05)，且批内变异系数小于 5%，精密度高。结论 干化学试纸法具有准确、快速、重复性好、污染小及片易保存等优点，可为临床提供快速、 准确的实验诊断参考依据，适用于临床急诊生化项目的检测。 【关键词】 干化学试纸法;全自动生化分析仪; 对比分析 干化学又称为固相化学，采用多层薄膜的固相试剂技术，只要把液体样品直接加到已固 化于特殊结构的试剂载体，即干式化的试剂中，以样品中的水为溶剂，将固化在载体上的 试剂溶解后，再与样品中的待测成分进行化学反应，从而进行分析测定，根据 Kubelka- Munk 理论，可计算出待测物的浓度。V350 干式生化分析仪所使用的干试剂条为三层：第 一层为分布扩散层;能使标本均匀分布，能过滤大分子，将溶血、高血脂血及胆红素干扰减 至最低，同时还提供反射测定的背景;第二层为试剂层：包含干性试剂，控制反应顺序; 第 三层为指示剂层：包含染料以产生显色复合物。多层薄膜技术不仅能掩盖待测物的有色物 质并提供背景、选择性地阻留或去除干扰物质;而且还将等同于湿化学法反应原理的各种物 质分层中进行，某一层中的反应产物又可进入另一层中进行其他反应，从而引导反应序列; 其各层可以给出一种特定的环境用以控制反应序列和反应时间。我院检验科添置了强生公 司 VITROS 350 干式生化分析仪，为了保证检验结果的可靠性，我们用 VITROS 350 干式 生化分析仪和雅培 AEROSET 型全自动生化分析仪对急诊生化检验中最常用的检测项目 GLu、Cr、Urea、Ca 、P、Amy、CK、ALT 进行检测，对检测结果的相关性、重复性、精 密度进行对比分析，结果如下。 1 材料与方法 1.1 仪器和试剂 (1)VITROS 350 干式生化分析仪。干式生化分析仪及其干化学法 Glu、Cr、Urea、Amy、Ca、P 、CK、ALT 测定干片。(2)雅培 AEROSET 型全自动生化分 析仪。试剂均采用中生北控生物科技有限公司所产试剂盒，以试剂盒自带标准液定标校准。 1.2 标本来源 (1)以门诊及住院病人为检测对象，其中男 162 例，女 158 例，年龄 3575 岁，平均 (43.621.1)岁。空腹采集血标本，待血液凝固后分离血清分别进行 GLu、Cr、Urea、Amy、Ca 、P、CK、ALT 的干化学试纸法和全自动生化分析仪检测;避免 溶血，高胆红素标本。(2)用 BECKMAN 未定值人血基质质控血清 Level 1( 批号:M807741)、 Level 3 (批号:M807743)分别在两台仪器上各进行 10 批次检测。 1.3 方法 1.3.1 干化学法 按 VITROS 350 干式生化分析仪说明书进行检测。 1.3.2 自动分析仪法 用各试剂盒所带的标准液定标校准后，进行检测，各方法原理见说明书，以操作规程 为标准1，分析上述八个项目在两台仪器上检测结果差异有无显著性。 1.3.3 批内精密度试验 用 BECKMAN 未定值人血基质质控血清 level 1( 批号：M807741)、level 3 (批号： M807743)分别在两台仪器上进行 10 批次检测，计算批内精密度(CV %值)。 1.4 统计学方法 配对 t 检验和直线回归与相关分析，统计软件采用 SPSS10.0。 2 结果 2.1 在 VITROS 350 干式生化分析仪和雅培 AEROSET 型全自动生化分析仪上测定结 果 见表 1。表 1 两种方法生化项目测定结果分析 2.2 对比实验 VITROS 350 干式生化分析仪和雅培 AEROSET 型全自动生化分析仪上同时对 320 例 急诊生化标本进行 GLu、Cr、 Urea、Amy、Ca、P、CK、ALT 检测分析，根据检测结果分 析，八个项目各项检测结果在两台仪器上的相关系数 r 分别为 0.932、0.931、0.937、0.942、0.945、0.948、0.951、0.966，均0.93，且差异无显著性 (P0.05)。2.3 精密度实验 用 BECKMAN 未定值人血基质质控血清 level 1( 批号： M807741)、level 3 (批号：M807743) 各 10 份分别做批内精密度试验。实验结果见表 2。由 表 1 可知，VITROS 350 干式生化分析仪和雅培 AEROSET 型全自动生化分析仪各项目检 测结果的精密度 CV 值在 1.68%5.0% 间，精密度良好，重复性也较好。表 2 BECKMAN 未定值人血基质质控血清 level 1 (lot:M807741)、level 3 (lot:M807743)在两台仪器上 10 批次 检测结果 3 分析与讨论 上述 100 例病人生化标本用干生化试纸法和全自动生化分析仪酶法检测 GLu、Cr、Urea、Amy、Ca 、P、CK、ALT，各项目的相关系数 r 均0.93;两种方法对各项 目检测值的配对 t 检验 P0.05，表明 VITROS 350 干式生化分析仪和雅培 AEROSET 型全 自动生化分析仪检测结果有很高的相关性，检测结果差异无显著性，显示 VITROS 350 干 式生化分析仪(干生化试纸法 )在敏感性、特异性方面均符合要求。 由表 2 可知，用 BECKMAN 未定值人血基质质控血清 level 1 (lot:M807741)、level 3 (lot:M807743)对 GLu、Cr、Urea、Amy、Ca、P、CK、ALT 在 VITROS 350 干式生化分析 仪(干化学试纸法)和雅培 AEROSET 型全自动生化分析仪 (酶法)上各进行 10 批次的测定结 果分析表明，各仪器各项目检测结果稳定，精密度(CV 值) 1.68%5.0% 之间，仪器的稳定 性、重复性良好。 据文献报道 1985 年开发的干化学多层膜试纸，使其定量分析水平达到或接近常规湿化 学法的水平。多层膜试纸其独特的优点是采用多层膜技术，不仅能掩盖待测物的有色物质 并提供背景，选择性地阻留或去除干扰物质，而且还将等同于湿化学反应原理的各种物理、 化学反应在各分层中进行，使某一层中的产物可进入另一层中进行反应，从而引导反应序 列，其各层可以给出特定的环境用以控制反应序列和反应时间。随着多学科高新技术发展 带动干化学技术的成熟，试剂载体品种增多，质量提高，特别是信号检测系统反射光 度计技术的日益完善，使干化学分析技术不但简便快捷，且准确可靠。此次检测分析表明， 干化学试纸法可为临床提供快速、准确的实验诊断参考依据。适用于临床实验诊断中心(检 验科)急诊化验室急诊生化项目的检测。 【参考文献】