抗凝血酶iii(at iii)活性测定

出凝血 6.1 抗凝血酶 III（AT III）活性测定（第四版） 出凝血 6.2 原理： 抗凝血酶 III 能和凝血酶形成复合物，使之丧失转化纤维蛋 白原为纤维蛋白的酶活性。在血浆中加入过量的凝血酶后，凝血酶 与血浆中的 AT III 形成 11 复合物，剩余的凝血酶作用于显色剂， 裂解出显色基团，其显色程度与血浆中的 AT III 活性呈负相关。 出凝血 6.3 标本处理： 患者处于休息状态下，采空腹静脉血（急诊病人除外） 。采血者 应技术熟练， “一针见血” ，以防止组织损伤，使外源性凝血因子进 入标本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延 长。采完血后，将血液沿管壁缓缓注入试管，避免产生气泡；然后 迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀，避免用力震荡。 全血要在 1 小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时，要在室温 下 3000rpm 离心 10 分钟，室温下可存放 4 小时。全部试验不能在 4 小时内完成，应将乏血小板血浆分装在 0.51.0ml 的小试管中快速 冷冻，储存于-20冰箱中。冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果 会不准确。冷冻血浆融化时，应将盛冷冻血浆的容器置于 37水浴 中，并轻轻摇动，使其迅速融化。 出凝血 6.4 试剂：试剂购于天津威士达公司 AT III 试剂盒：试剂盒代号 OWWR 15。试剂包括 615ml 凝 血酶试剂；63ml 底物试剂； 1100ml 缓冲液。凝血酶试剂每瓶用 15ml 缓冲液复溶，室温平衡 30 分钟。底物试剂每瓶用 3ml 蒸馏水 2 复溶，室温平衡 30 分钟。 出凝血 6.5 仪器：使用 Sysmex 公司的 CA-7000 型全自动血液凝固仪。 出凝血 6.6 操作：按仪器操作步骤执行标准操作。 出凝血 6.1 开机：按下机器侧面的 POWER 按钮。开机后机器进 行自检，当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。 出凝血 6.2 检查消耗品： 1、准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量， 不足时，需及时添加。（一次性最多可放 1000 个杯子） 2、准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把试剂准备好，放到仪器内 相应位置，注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉试剂位置时， 可在主屏幕上选 Reagent Setting，按屏幕显示放置试剂。 3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶 出凝血 6.3 准备标本：将样本放入样本架，再将样本架放到仪器 进样器上。 出凝血 6.4 输入检测项目：主菜单上按下 Work List 键，进入 工作菜单，输入 AT-III 项目。 出凝血 6.5 输入样本号： 按屏幕下菜单的 ID No.键，按顺序输 入样本的序号。 出凝血 6.6 开始检测：录入完所有测试信息，按下屏幕右上角 START 键，开始检测。 出凝血 6.7 质量控制：使用德灵公司的 leve11 质控品做质量控制。 操作规程 3 每批质控品的值不超过 2SD。 （详见出凝血 1 质量控制） 出凝血 6.8 计算：仪器自动计算出结果。 出凝血 6.9 参考值： 75125%，由 DADE BEHRING 公司推荐。 出凝血 6.10 临床意义： 遗传性 AT-III 缺乏可分为两型：CRM -型，即抗原与活性均下降。 CRM+型，抗原正常，活性下降。遗传性 AT-III 缺乏是一种常染色体 显性遗传性疾病，本病患病率约 1/5000，发病多在 10-25 岁，患者 常在手术后、创伤后、感染后、妊娠或产后发生静脉血栓，并可反 复发生血栓。CRM -患者血浆中 AT-III 生物活性与抗原性约为正常人 的 50%左右；CRM +其 AT-III 结构与功能异常的类型较多，现已报道 近 10 种结构异常，如第 42 位精氨酸被半胱氨酸取代（即 Arg47Cys47） 。共同表现是对肝素的亲和力降低，从而对丝氨酸蛋白 酶的灭活能力明显减弱。 获得性 AT-III 缺乏：AT-III 合成降低，见于肝脏疾病、肝 功能障碍，主要见于肝硬化、重症肝炎、肝癌晚期，常与疾病严重 度相关，可伴发血栓形成。AT-III 丢失增加，见于肾病综合征。 AT-III 消耗增加，见于血栓前期和血栓性疾病，如心绞痛、心肌 梗死、脑血管疾病、弥散性血管内凝血、外科手术后、口服避孕药、 深部静脉血栓形成、肺梗死、妊高征等。伴弥散性血管内凝血的败 血症，因粒细胞释放的蛋白酶，尤其是弹性蛋白酶有快速中和 AT- III 的作用。 4 AT-III 水平增高：在血友病 A 和血友病 B、口服抗凝药物、使 用黄体酮类药物时，有报道 AT-III 水平增高。 出凝血 6.11 参考文献： 1） 主编王鸿利.止血与血栓检验技术.（第一版 1992.6）上海科 学技术出版社. 2） 主编李家增 王鸿利 韩忠朝.血液实验学.(第一版 1997.10) 上海科学技术出版社. 3） 主编邓家栋 杨崇礼 杨天楹.临床血液学.(第一版