GB 29703-2013 食品安全国家标准 动物性食品中呋喃苯烯酸钠残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

  G 中华人民共和国 国 家标准  9703 2013 食品安全国家标准  动物性食品 中 呋喃苯烯酸钠 残留 量 的测定  液相色谱 in （电子版本仅供参考，以标准正式出版物为准）  2013布  2014施  中华人民共和国农业部  中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会  发布  I 目   次  目   次  . I 前   言  . 物性食品中呋喃苯烯酸钠残留量的测定  液相色谱 . 1 1 范围  . 1 2 规范性引用文件  . 1 3 原理  . 1 4  试剂和材料  . 1 5 仪器和设备  . 2 6 样品的制备与保存  . 2 料的制备  . 2 料的保存  . 2 7 测定步骤  . 2 取  . 2 化  . 3 准曲线的制备  . 3 定  . 3 白试验  . 4 8 结果计算与表述  . 4 9 检测方法灵敏度、准确度、精密度  . 5 敏度  . 5 确度  . 5 密度  . 5 附录 A . 6    言  本标准 的附录 A 为资料性附录。  本标准系国内首次发布的国家标准。  1 动物性食品中 呋喃苯烯酸钠 残留 量 的测定  液相色谱 1 范围  本标准规定了动物 性 食品中呋喃苯烯酸钠残留 量 检测的制样和液相色谱  本标准适用于猪 和 鸡的肌肉和肝脏 组织 中 呋喃苯烯酸钠 残留量的检测。  2 规范性引用文件  下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的 最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。   准化工作导则  第 1 部分：标准的结构和编写规则   6682   分析实验室用水规格和试验方法  3 原理  试料中残留的呋喃苯烯酸钠，用 酸 取，固相萃取柱净化 ，液相色谱 离子模式测定，外标法定量。  4  试剂和材料  以下所用的试剂，除特别注明外均为 分析 纯试剂，水为符合  6682 规定的一级水。  呋喃苯烯酸钠标准品： 含 量   甲醇  正己烷  乙睛： 色谱纯 。  乙酸乙酯  甲酸  相萃取 柱： 60  相当者。  酸溶液： 取甲酸 0.5 用 水溶解并稀释至 100  酸 取乙酸乙酯 200  酸溶液 10 匀，现配现用。  1 mg/喃苯烯酸钠标准贮备液： 精密称取 呋喃苯烯酸钠标准品 10  10 瓶中，用二甲亚砜溶解并 稀释至刻度 ，配制成浓度为 1 mg/呋喃苯烯酸钠标准贮备液。 以下保2 存，有效期 6 个月。  10 g/喃苯烯酸钠标准工作液： 精密 量取 1 mg/喃苯烯酸钠标准贮备液 1.0  100 量瓶中，用流动相溶解并 稀释至刻度 ，配制成浓度为 10 g/呋喃苯烯酸钠标准工作液。 以下保存，有效期 6 个月。  5 仪器和设备  相色谱 配有电喷雾离子源（ 。  析天平 ： 感量 1 g。  平 ： 感量 g。  冻高速离心机  荡器  涡混合器  质 机  吹仪  转蒸发仪  心管： 50  茄形瓶  滤膜： m。   6 样品的制备与保存  料的制备  取新鲜或冷冻空白或供试组织 ，绞碎 ， 并使均质。   取均质后的供试样品，作为供试材料。   取均质后的空白样品，作为空白材料。   取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准 工作 液，作为空白添加试料。  料的保存  以下 保存。  7 测定步骤  取  取 试料（ 2g， 于 50 心管中， 加 酸 5 涡 混合 ， 振3 荡 5 8 000 r/0 取 乙酸乙酯层 于茄形瓶中， 残渣 加 酸 0 复提取一次， 合并两次 乙酸乙酯层 ， 于 45 旋转蒸 发至 干， 用 50乙腈水溶液 3 解 残余物 ，转至离心管中 ， 用 50乙腈水溶液 3 涤 茄形瓶 ，合并 两次 洗液，加正己烷 3 荡混匀后， 5 000 r/心 5 下层液 ， 备用。  化   依次 用甲醇 3  水 3 化，取备用液过柱。 用 水 6 洗，抽干， 加 乙腈 3 收集洗脱液，于 50 氮气吹干， 用 流动相 1.0 解 残余物 ，转入 心管中， 10 000 r/心 10 上清液， 滤膜 过 滤 ， 液相色谱   准曲线的制备  分别精密 量取 10 g/喃苯烯酸钠标准工作液 适量 ，用流动相 稀释 ，配制 成浓度为 、 5 和 8g/L 系列 标准 溶 液 ，供液相色谱 以特征离子质量色谱峰面积为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。  定  相色谱条件  色谱柱： 150 .1 径 5 m） ，或 相当者；  流动相：乙腈 +水 （ 40+60， v/v） ；  柱温： 40 ；  进样量： 10 L。  谱条件  离子源：电喷雾离子源；  扫描方式：正离子扫描；  检测方式：选择反应监测；  喷雾电压： 4 000 V；  离子传输管温度： 330 ；  鞘气压力： 40  辅助气压力： 6  选择反应监测的优化参数见表 1。  4 表 1 呋喃苯烯酸钠选择反应监测的优化参数  药物名称  相对保留时间 性离子对  m/z 定量离子对  m/z 碰撞能量  喃苯烯酸钠  5 0 定法  取试 样 溶液和标准溶液，多点校准，外标法计算。试 样 溶液及标准溶液中 呋喃苯烯酸钠 的峰面积均应在仪器检测的线性范围之内。试 样 溶液中的离子相对丰度与标准溶液中的离子相对丰度相比，符合表 2的要求。标准溶液和 空白添加 试样溶液 中特征离子的质量色谱图 见附录 A。  表 2 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差  相对离子丰度  50% 20%至 50% 10%至 20% 10% 允许的相对偏差  20% 25% 30% 5 0% 白试验  除不加试料外，采用完全相同的步骤进行平行操作。  8 结果计算与表述  由标准曲线校准：由   ， 求得  a  和  b  ，则  C /)  试料中 呋喃苯烯酸钠 的残留量（ g/：按下式计算     X 试 料 中呋喃苯烯酸钠的残留量， g/ 标准 溶液中呋喃苯烯酸钠的浓度 ， ng/ A 试样溶液中呋喃苯烯酸钠的峰面积；   标准 溶液中呋喃苯烯酸钠的峰面积；  V 溶解残余物所 用流动相 体积 ，  m 供试试料 质量 ， g。  注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。  5 9 检测方法灵敏度、准确度、精密度  敏度  本方法的检测限为 g/量限为 g/ 确度  本方法在 2 g/加浓度水平上的回收率为 60% 120% 密度   本方法批内相对标准偏差 20%，批间相对标准偏差 25%。  6 附   录  A （资料性附录）  R T : 0 . 0 0  - 1 0 . 0 0  7 2 3 4 5 6 7 8 9T i m e  (m i n )05101520253035404550556065707580859095100 5 46 . 5 86 . 4 86 . 6 76 . 7 56 . 8 52 . 1 5 2 . 1 87 . 7 4 7 . 7 03 . 4 1 8 . 9 20 . 8 3 4 . 2 11 . 3 4 5 . 5 84 . 3 5 9 . 5 9N L :  5 . 0 3  C  F :  +  p    m s 2  2 9 0 . 1 8 0   1 0 2 . 2 5 1  2 . 2 6 1 ,  2 0 2 . 4 2 1  2 . 4 3 1 ,  2 2 8 . 1 8 7  8 . 1 9 7   M S 12图 喃苯烯酸钠 标准溶液离子 色谱图（ g/L）  R T : 0 . 0 0  - 1 2 . 0 0  7 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11T i m e  (m i n )05101520253035404550556065707580859095100 1 12 . 0 92 . 0 52 . 1 51 . 4 72 . 8 03 . 4 24 . 2 41 . 3 8 9 . 3 31 . 1 8 7 . 1 23 . 7 9 7 . 1 50 . 2 7 7 . 0 94 . 7 6 5 . 2 91 0 . 3 95 . 7 9 9 . 7 4 1 1 . 5 06 . 1 6 8 . 4 28 . 0 4N L :1 . 4 3  C   M S b  0 9 0 2 1 4 144007图 肝 脏 组织 空白 试样 离子 色谱图  R T : 0 . 0 0  - 1 0 . 0 0  7 2 3 4 5 6 7 8 9T i m e  (m i n )05101520253035404550556065707580859095100 3 36 . 4 36 . 6 26 . 6 82 . 1 3 6 . 8 37 . 1 52 . 2 2 5 . 4 32 . 0 08 . 8 13 . 7 7 4 . 5 9 9 . 8 20 . 3 6 1 . 8 3N L : &