菝葜的研究进展

菝葜的研究进展 203528摘要 目的:归纳国内外对菝葜的植物学、化学成分以及药理活性作用研究及进展。方法：查阅国内外文献资料并加以归纳整理。结果与讨论：深入研究菝葜的化学成分及其生物活性，阐明其物质基础，具有重要意义。关键词 菝葜； 植物学；化学成分；药理活性作用菝葜为百合科植物菝葜Smilax china L的干燥根茎，收载于2005年版中华人民共和国药典一部，味甘，微苦涩，性平，归肝、肾经。具有祛风利湿，解毒散瘀之功效。民间用于筋骨酸痛，小便淋沥，带下量多，疔疮痈肿等症。临床单用或与其他药物配伍用于各种炎症性疾病，如类风湿性关节炎、妇科盆腔炎、附件炎及炎症性包块及各种肿瘤等1。为了更好地开发利用其资源，本文对该植物的植物学、化学成分、药理活性作用等方面的研究现状进行综述。1. 植物学研究1.1 生药鉴别2,31.1.1 植物形态与性状鉴别：菝葜茎和分枝不具疣状突起或短刺突起。叶背绿色，叶干后通常红褐色或古铜色，叶柄几乎全具卷须。花序托通常缩短近球形，少数稍延长。根茎为不规则的长圆柱形，稍扁，似菱角状，多分枝，微弯曲，长28 cm，直径525mm。表面黄棕色至灰褐色，凹凸不平，须根的残留部分形成粗大的疙瘩刺，并可见褐黑色的硬细根，顶端有圆柱形茎基残留。质坚硬，不易折断。断面粗糙，棕红色或白色，纤维性，显砂砾样光亮。无臭，味淡。置水中煮沸，水染成红褐色。 1.1.2 显微鉴别：(1)横切面：皮层为56列栓化细胞；内皮层和中柱鞘部位为数列马蹄形增厚的石细胞；木质部中的导管有12个，较大。(2)粉末：淀粉粒众多，单粒或复粒；石细胞马蹄形，胞腔较小，壁孔较厚；纤维细长，腔小；导管网纹、螺纹。1.2 理化鉴别1.2.1紫外光谱鉴别3：取样品粉末1 g，加95乙醇20 ml冷浸24 h，过滤，精密吸取滤液1 ml，置50ml量瓶中，加95乙醇稀释至刻度。取上液在UV260型紫外分光光计上于200400 nm波长范围内做扫描，样品在2046 nm，2874 11121，3218 nm处均各有一吸收峰。1.2.2 薄层色谱鉴别4：取本品粉末5 g，加乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加盐酸5 ml，置水浴中加热回流，放冷，调至中性。置水浴上蒸至无醇昧，残渣用40 ml热水溶解，用二氯甲烷提取二次，合并提取液，置水浴上蒸于，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取薯蓣皂苷元加甲醇制成每1 ml含05 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各lml，以环己烷一醋酸乙酯(8：2)为展开剂，10硫酸乙醇溶液为显色剂，于105加热，供试品与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。1.3含量测定1.3.1 总甾体皂苷元的含量测定5：采用分光光度法对菝葜总甾体皂苷元的含量进行测定，测定波长为605 nm，结果显示，生药中总甾体皂苷元的含量应不低于11。1.3.2 薯蓣皂苷元的含量测定：高效液相色谱法测定：用十八烷基硅烷键合硅胶(ODS2)为填充剂；乙腈-水为流动相检测波长203 nm，柱温35。理论板数按薯蓣皂苷元峰计算，应不少于8000。精密吸取对照品溶液和供试品溶液20山，注入液相色谱仪，测定按干燥品计算，含薯蓣皂苷元(C，H，0)不得少于002。2.化学成分研究2.1 黄酮和芪类：冯锋等6运用层析手段和波普方法分离并鉴定了5个酚性化合物。结果它们为二氢山奈酚（dihydrokaempferostillbene,l,1)，3,5,4-三羟基芪（3,5,4-trihydroxy,2），3,5,2,4-四羟基芪（3,5,2,4-tetrahydroxystillbene,3)，二氢山奈酚3-O-L-鼠李糖苷（黄杞苷，dihydrokaempferol 3-O-rhamnoside,engeletin,4）,槲皮素4-O-D-葡萄糖苷（quercetin 4-O-D-glucoside,5)。这五个化合物均为首次从菝葜中得到，其中化合物1,4,5为首次从菝葜属植物中得到。2.2 皂苷类：1984年Yasuaki Hiral等7发现菝葜中含有：(1)26-0-8D-葡萄糖-(25R)-呋甾-5，20-二烯-3B，26-二醇-3-O-n-L-鼠李糖-(1-2)-O-n-L-鼠李糖(14-)-B-D-葡糖苷；(2)26-O-B-D-葡萄糖-22-O-甲基-(25R)-呋甾-5-烯-313，22，26-三醇-3-0-“L-鼠李糖(1-4)8D葡糖苷；(3)薯蓣素(25R)螺甾烷-5-烯-313-醇-3-D-“-L鼠李糖-(1-2)-0-a-L-鼠李糖(1-4)-B-D-葡糖苷；(4)薯蓣素3-0-q-L鼠李糖(1-2)-0-d-L鼠李糖(1-4)-13-D-葡糖苷。1989年Kim Sung Whan等在菝葜的根的甲醇提取物中分离到(5)纤细薯蓣皂苷(Gracillin)；(6)甲基原纤细薯蓣皂苷(Me protogracillin)；(7)甲基原薯蓣皂苷元(Me Protodioscin)；(8)薯蓣皂苷次皂苷A(prosa-pogeininA ofdioscin)；(9)薯蓣皂苷(Dioscin)。接着Sashida等报道了(10)异纳索皂苷元(Isonar-thogenin)3-0-o-L-鼠李吡喃糖基-(1-*2)-0-d-I-鼠李吡喃糖基-(1-4)13-D-葡萄糖吡喃糖苷的分离与鉴定。2.3 多酚类8：菝葜醋酸乙酯部位富含儿茶素和芪类化合物，从中分离得到的单体化合物SCE19结构中含有多个酚羟基，都属于天然多酚类化合物。2.4 氨基酸类：氨基酸类已分离的氨基酸类有9，10：4-甲基谷氨酸(4-Methylglutanalc acid)；4-亚甲基谷氢酸(4-Methyleneglutamic acid)；4-羟基_4-甲基谷氨酸(4-Hydroxy-4-methylglutamic acid)；谷氨酸(Glutamicacid)；4-胍基丁酸；NoL-(2-羟基丁二酰)精氨酸；Nct-(2-羟基-2-羧基甲基丁二酰)-L-精氨酸。3. 药理活性作用研究3.1 抗炎作用11：陈东生等通过角叉菜胶致大白鼠足跖浮肿法和大鼠皮下注射琼脂法形成肉芽肿模型分别考察r菝葜水煎液对急慢性炎症的抗炎作用。结果表明大自鼠ig给予90180 g/kg对足跖肿胀均有明显抑制作用；180 g/kg对肉芽肿增重有明显抑制作用。菝葜对急、慢性炎症均有抗炎作用。 3.2 抗氧活性12：菝葜醋酸乙酯部位富含儿茶素和芪类化合物，从中分离得到的单体化合物SCE19结构中含有多个酚羟基，都属于天然多酚类化合物。从菝葜根茎分离得到多酚类化合物SCE19均具有很强的的抗氧化活性，能有效地清除ABTS和DPPH自由基。据此，推测多酚类化合物可能是菝葜根茎醋酸乙酯提取物发挥治疗作用的物质基础。3.3 活血化瘀13：以菝葜水煎液(I)、正丁醇萃取物(II)、正丁醇萃取剩余物()高(100g/kg)、低(50k)剂量对小白鼠灌胃给药7天后，眼眶取血，采用凝固比浊法测定Am、PT，采用de-rive法测定FIB；全自动血细胞计数仪测定血小板数，采用比浊法体外测定I、对人血小板的聚功能Ma、M、V的影响，研究菝葜的活11IL化瘀药理作用，结果表明100 g/kg剂量的I和能显著延长Am(P005)，50100 g/kg剂量的能使FIB显著增加(P005)，而50g/kg剂量的能使FIB显著减少(P005)。稀释8倍后的I和能抑制体外的血小板聚集功能，特别是对V的影响更显著(P001)，但三者对血小板数无明显影响。证明菝葜具有明显活血化瘀的药理作用，其作用机制可能与抑制血小板聚集和延长内源性凝血时间及影响纤维蛋白原生成有关。3.4 治疗非细菌性前列腺炎14：周璐敏等筛选菝葜治疗前列腺炎的有效部位，进行药效学研究。菝葜生药经醇提后，以醋酸乙酯争正丁醇萃取锝到醋酸乙酯部位和正丁醇部位；菝葜生药醇提取液用大孔树脂富集皂苷，将以上所得部位分别给非细菌性前列腺炎模型大鼠灌胃，通过观察白细胞数、前列腺指数及病理切片来观察菝葜不同提取部位对前列腺炎模型的影响。结果醋酸乙酯部位、正丁醇部位、皂苷、菝葜总提取液均能降低白细胞数，菝葜总提取液的作用最明显，皂苷次之。上述4种成分均能降低模型大鼠的前列腺指数，作用强度各组差异不明显。结论菝葜对非细茵性前列腺炎有显著治疗作用，综合各项指标考虑将皂苷类成分选为其有效部位。3.5 佐剂性关节炙治疗作用15:陈东生等通过观察菝葜对佐剂性关节炎(AA)小鼠给药后继发性足肿胀、胸腺系数(胸腺/体重)、脾系数(脾/体重)、T细胞亚群、B细胞、自然杀伤细胞(NK)的变化，发现菝葜(90、180 g/kg)灌胃给药能明显抑制AA小鼠继发性足肿胀、减轻胸腺和脾脏重量。减少CD4+T细胞、增加CD4+T细胞，降低CD4CD8，极少影响B细胞、NK细胞。得出结论：菝葜可能通过调节细胞免疫减轻AA小鼠继发性足肿胀，但不同于地塞米松，不影响体液免疫。3.6 抑制血糖作用16:菝葜煎剂对实验性糖尿病小鼠的血糖有明显的抑制作用，小鼠灌胃菝葜煎剂连续3 d或6 d，能显著对抗肾上腺素和葡萄糖引起的小鼠血糖升高，降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖浓度，明显增加肝糖元含量，但对正常小鼠的血糖值无明显影响。3.7 抗肿瘤作用17：将s180腹水瘤小鼠随机分为4小组，即空白对照组、模型对照组、治疗组和预防给药组，用复方菝葜灌胃，观察复方菝葜对S180荷瘤鼠血液中超氧化物歧化酶(SOD)和脂质过氧化物(LPO)的影响。结果表明复方菝葜有增加荷瘤鼠血液中SOD活力、降低LPO含量的作用。说明复方菝葜可能是通过提高体内SO/3活力、清除体内自由基来延长荷瘤鼠生存时间的。3.8 清除自由基和加强抗氧化酶活性作用18菝葜甲醇提取物显示存在高浓度的1，1一二苯基2，间三硝苯肼(DPPH)自由基清除能力(IC50 7.4g/ml)和细胞生存保护能力，用不同溶液进一步分离和测定表明乙酸乙酯、正丁醇和水的提取物有很强的DPPH自由基清除能力。另外，用菝葜甲醇提取物处理过的V79-4细胞可诱导超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性(有效剂量4100g/ml)。结果表明：包含菝葜根提取物的复方同样也包含着抗氧化剂行为。4. 展望 菝葜为一民间习用中药，其应用与研究源远流长。在我国四百年前就有作药用的记载。二十世纪六十年代以来，其总提取物制剂已广泛应用于妇科慢性炎症、附件炎以及调节免疫、活血化瘀、抗肿瘤等病症。近年来，对菝葜的化学成分研究比较广泛，同时也发现了一些新的物质。许多研究证明，其根茎内含有皂苷、黄酮及其苷、氨基酸类及其他类化合物，生物活性比较明显，为菝葜的临床应用及开发研究提供了理论依据。但对其有效成分与药理活性的结合性研究尚需我们不断的深入探讨。如若做到这一点，相信菝葜的开发和应用前景将是十分美好的。参考文献：1 黄慧莲，果德安，李萍. 反相高效液相色谱法测定重要菝葜中芪类成分的含量. 中国新药杂志，2008, 17(24):12-24.2 吕翼，芦金清，裴学军药用金刚藤实名考证湖北中医杂志，2002，24(5)：47-483 吕翼，陈东生，吕永宁药用金刚藤的生药鉴别中国医院药学杂志，2002，22(6)：339-3414 国家药典委员会新闻中心中国药典2005年版公示北京，20045 陈东生，吕永宁，吕翼等菝葜总甾体皂苷元的含量测定中药材，2001，24(2)：111-1126 冯锋，柳文媛，陈优生，刘静涵，赵守训.菝葜中黄酮和芪类成分的研究. 中国药科大学学报，2003,34(2):119121.7 Asuaki Hiral，Shuichi Sanada，Yoshiteru Ida，et a1Studies on the constituents of Dalmae plants The constituents of Rhapis exelsa Henry and RhumilisChem pharmBull，1984，32：4003.8 AWOLAJ M，ROONEY LW，WU X，et02Screeningmet hods to meagure antioxidant activity of sorghum(Sorghumn bicolor)and sorghum productsJJ agacFood Chem，2003，51(23)：665766629,10Kassai Takanofi, Nishitoba Tsuyoshi, et a1. 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