生物实验心得 体会(精选多篇)

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 生物实验心得体会(精选多篇) 生物学是一门以实验为基础的自然 科学，现代生物科学的发展尤其依赖科 学实验。在生物教学中，实验、学习和 观察等实践环节对我们掌握生物学知识、 科学方法、培养我们的动手能力和形成 科学素质都起到了至关重要的作用。正 是因此，从我们开始接触生物这门学科 开始，就不断有生物实验课程，锻炼我 们各式各样的能力。 但是，也的确是上过各式各样的 生物实验课，我才更加深刻的感受到这 次做的现代生物技术综合实验对我的影 响有多大。 首先，我一定得提的，便是金卫 华老师，还有金老师给我们提出的实验 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 要求。 独到的实验安排，让我听后为之 一震，因为从初中开始，甚至是大学的 前两年间，没有一位老师有提过，要求 我们在学校安排好的实验课时间以外也 能来实验室做实验，当然这大概也与我 们的生物技术试验的内容安排有密不可 分的关系。一直以来，我们都循规蹈矩 的准确服从着课程表给我们定下的规则， 而金老师却轻描淡写，扬手舞舞便打破 了笼罩着我们多年的“ 囚笼 ”。有时，我 甚至会暗想，伴随着这种思维限制的打 破，是否也会激发出我们名为想象力的 翅膀，让我们能够在知识的世界中翱翔 呢？ 好好，不能扯太远，还需要拉回 我心得的主题实验！老师在第一次 课上，对我们详尽的讲解了我们此学期 需要完成的一系列实验。其中全是环环 相扣，嵌合紧密，有点一招即失，满盘 皆输的压力，不过我们更多的是怀着一 种跃跃欲试的激动，恨不得立马动手， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 靠着自己学来的知识，认真的完成这套 实验，并且还能看到最终那令人欣喜的 结果。就这么妄想着妄想着，我们从第 二周开始的现代生物技术综合实验的漫 长旅程。 由于，老师没有硬性的要求实验 时间，我们便是一有空闲就往实验室里 钻，也就少了以前实验课上出现的，因 为部分实验仪器的数量缺少，同学们每 次做实验都是你推我嚷的，造成了实验 兴趣的流失。以至于做实验的态度越来 越涣散，甚至只是简单的走下过场而已， 几次实验课下来，热情全无。但按照金 老师的提议来，大家来实验的时间不同， 使得对仪器使用的时间错开，减少了为 争抢仪器或是药品而嘈杂不堪的场面， 实验也变得顺利了许多。 金老师会很体谅一些先开始忙活 的同学，在黑板上写清他们实验大概会 做到的步骤和注意事项，后面实验的准 备物品和要求，然后开始在忙于实验而 奔走中的同学之间晃悠。观察我们的实 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 验操作，或是时不时提点解释一下我们 实验步骤的缘由；实验药品的作用；如 何做会得到更好的结果；实验没有得到 好的结果或是做的失败了的原因。可是， 随着实验的发展，后来更多的时候，是 我们在看过书本上要求的实验步骤后， 去缠着金老师，围在他周围，问他关于 实验的各种问题，就算同样的问题被问 过许多次，金老师依然是和蔼的笑着一 一解答我们的疑问，他的平易近人，他 的悉心教导，他的不骄不躁，他的耐性 与笑容都深深的打动了实验中的每位同 学。 其实，他的这种教学方式，亮点 就在于此，自主实验迫使我们会仔细品 味步骤中的点滴；实验过程中的出现的 各种问题，就要求我们会去思考如何排 除，继续实验；实验结果的不理想，更 是强迫我们能认真回顾实验中的任何细 节，找出问题所在，也会需要我们去深 入了解这步实验的机理，用药品的理由， 实验操作要求等。这些自己通过自己动 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 手动脑而逐步累积起来的经验，是在以 往任何时候都没有获得过的，那时，只 知道按照老师和书本上写的步骤来，根 本不在意为什么要这么做，于是少了对 实验的探究，能学到的东西自然也减少。 说完对金老师和老师教育方式的 看法，其次我想谈谈，我在这样的教学 指导下获得的收获。 我是一个很懒散的人，以前做实 验，大部分都是照本宣科，很少动脑筋 去思考实验的前因后果，对台上老师的 讲解也都是一知半解的混着。但是，这 次实验着实让我很费了一番脑子，有深 入的去了解个中原理，实验操作的机理， 仪器的使用方法，帮助我纠正和熟练许 多操作，同时让我认识到自己以前的迷 糊与不负责任，也让我体会到全身心的 投入到一件事中，是如此快乐和满足， 还得到了好多在课堂上永远无法获得的 知识。下面，具体说说看我的几件不小 的收获。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 有小到大来叙述，分有这样一些。 第一件，混实验室久了，我有了可以 “变出”任何大家想要的器皿的 “功能”， 只要是实验室里有的且我们熟知的物品， 无论是药品试剂，还是不同规格的量筒 试管，我都可以摸出来，省去了四处找 老师寻求帮助的时间和气力。第二件， 学会了配置许多的试剂，于是知道了不 同的试剂配置需要注意的问题，巩固了 某些药品相关的知识，并且在多次配置 时，得出了一个结论：如果不是很熟悉 的试剂配方，最好是拿一个专门的本子 记录下来，以备不时之需，这样一来， 以后实验也不会因为试剂的问题而手忙 脚乱。第三件，实验步骤需要仔细的斟 酌其中的奥秘，每一步如此走，自然有 前人的用意，毕竟这些实验都是过去的 科学家研究出来的精华继承，理解了他 们的意图和原由，做起实验来会更加的 得心应手也不易遗忘或出错。第四件， 这件是我最大的心得，也不全是从此次 实验中得来，且也不是只能运用于做实 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 验中，这份心得是：在决定要做的事情 后，最好考虑清楚行动时会需要用些什 么，做些什么，将准备工作做好，为后 续行动铺垫，按其规律列好清单，会使 得实验或者任何别的事情做得更加顺利， 有条理，排除做过多无用功的可能性， 提高了效率的同时还降低错误失误的出 现概率，成功率也会增高。 以上是我这个学期里，从现代生 物技术综合实验里得到的一些心得。我 希望在下个学期里，我能将自己从这里 得到的心得，学习应用到其他的实验甚 至是学习生活中去，扩充自己的知识， 拓宽自己的视野，增厚自己的底蕴，加 强自己的能力，不敢放言称自己要成为 未来生物界中的一流人才，只能勉励自 己成为一个不负众望的有用的人。 实验心得体会 在真正投入到创新实验计划当中 之前，我以为不会很难。因为课内实验 我们也做了很多，只要做好预习工作， 好好听老师的讲解，再加上自己多动脑 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 筋，几乎没遇上什么比较大的困难，实 验完成起来也比较快。各种各样的实验 加起来，涉及的知识面很广，学到了很 多，让自己对于这样的研究与实验工作 也更加感兴趣。 但是真正开始创新实验计划时， 发现我仿佛进入了一个新的空间。一切 要从头学起，从最简单的做起。与高年 级的学长比起来，自己的基本实验技能 与专业知识少的可怜，面对那些精密的 仪器与无数的文献资料，信心一下子被 浇熄了大半。每天跟在学长后面做着清 洗瓶子，到扫卫生，摘桑叶，诸如此类 的体力活。貌似什么也学不到，看着学 长学姐一言不发的熟练操作，却一点也 摸不到头脑。 有时真的懊恼的有些想 泄气，但幸亏老师常常与我们开会讨论， 开导鼓励我们，他还时常有意无意地启 发我们的安全防范意识。古语说的没错: 耳濡目染。一天天下来，不知不觉当中， 我们的实验技巧越来越熟练，对于一些 仪器的基本操作也能单独上手，学长学 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 姐很有耐心地一次次纠正我们犯下的或 大或小的错误，并不厌其烦的叮嘱我们 注意安全。 渐渐地我们可以单独完成一些比 较系统全面的实验工作。但错误当然也 是不可避免的，而且人往往要犯错之后 才能明白如何不犯错和为什么不要犯下 这样的错误。比如因为我们某一步的实 验操作不规范，导致最后的实验结果不 尽入人意，无法纳入最后的总结分析中， 也就是说我们白忙活一场。其实这样的 失败也未尝不是一件好事，通过它我们 更加清晰地认识到这个实验步骤的原理、 影响及具体细节。 重复这是整个实验过程中常做的 一件事，面对规律性不强的实验结果， 我们只有一次次反思，重新再来，如果 一而再再而三的重复失败，我们就只得 求助于学长学姐和老师们了，但是这样 具体的操作细节中失误，非当事人又是 无法完全了解的，还是需要我们自己一 点一点的去摸索。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 10 当然整个实验过程中最困难的还 要数自行设计实验的具体步骤了，老师 所能给的知识一个全面概括的指导意见， 让我们不致发生方向性的失误。老师也 给了我们一些相关的文献资料，但同样 的道理，具体到某一方面我们还是要自 己去搜索，筛选，概括。有时甚至要面 对一些英文文献，仅凭我们已有的英文 水平还过于单薄。困难就是让人来解决 的。我们摸索前进，自己跑到机房查资 料，下载翻译软件，制定实验方案，阅 读大量晦涩难懂的文献，失败了就再来 一次，总结后再勇往直前。困难一个接 着一个，但既然选择了这条路，我们就 要毅然决然的走下去，不管后面的路是 沼泽泥泞还是荆棘丛生。 终于我们的实验数据慢慢变得有 规律起来，面对棘手的麻烦我们也能镇 定自若，实验的因素探索一个个完成， 一点点接近于目标。回望之前，发现与 取得的成绩，获得的知识相比，以前都 算不了什么。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 11 不得不承认，通过这项本科实践 创新训练项目，我们学到了很多，得到 了很多，有些是书本上永远也学不来的， 有些仅靠我们自己摸索几乎为不可能的， 有些仅凭我们自行监督是无法坚持下来 的。 在这里要感谢关心爱护我们的老 师，学长学姐还有同届同学以及学弟学 妹，没有你们我们无法完成这项艰巨的 工作。 实验一 :本次试验中对交换机的 基本配置的学习研究有了新的体会，在 计算机上配置交换机的基本配置，掌握 交换机命令行各种操作模式的区别，以 及模式之间的切换。实现上有了一定的 突破，在配置过程中用到的命令，让我 感觉到英语也要多学习，尤其是专业英 语，对配交换机有很大方便！ 实验二：这次实验关于交换机的 全局配置，通过交换机的全局的基本配 置，让我充分明白配置交换机的设备名 称和配置交换机的描述信息必须在全局 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 12 配置模式下执行。hostname 配置交换机 的设备名称。当用户登录交换机时，你 可能需要告诉用户一些必要的信息。你 可以通过设置标题来达到这个目的。你 可以创建两种类型的标题：每日通知和 登录标题。banner motd 配置交换机每日 提示信息 motdmessage of the day。banner login 配置交换机登录提示 信息，位于每日提示信息之后。 实验三：做实验既能加深我们对 实验原理的理解和认识，学会应用这些 原理，又能煅炼我的动手能力，通过这 次实验让我明白对于网络，我们要树立 重视实践更甚于重视理论的观点！业余 时间扩宽计算机网络硬件方面的视野， 尤其希望可以去电信公司的机房参观学 习，提高个人修养与能力；加强本实验 小组内部各成员之间的交流，现在的团 队合作精神很重要，要及早的去培养。 实验四：这次实验总体来说没什 么困难，都是一些基本的交换机配置， 但是最后的思考题中提出一些问题还是 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 13 很有意思的，配置起来也很有趣。主要 是查看交换机的系统和配置信息。主要 要到的技术原理是查看交换机的系统和 配置信息命令要在特权模式下执行。 showversion 查看交换机的版本信息， 可以查看到交换机的硬件版本信息和软 件版本信息，用于进行交换操作系统升 级时的依据。show mac-address-table 查 看交换机当前的 mac 地址表信息。 show running-config 查看交换机当前生效的配 置信息。 实验五：通过这次实验，让我明 白了一个道理磨刀不误砍柴工。前期的 知识储备、文献储备、材料准备、方法 准备可以避免手忙脚乱，充分的预实验 使你充满信心。一步一个脚印，就不必 “从头再来”。最不能容忍的是在开始的 几步偷懒，造成后面总有一些无法排除 的障碍。这次实验让我学会了 vlan 是指 在一个物理网段内，进行逻辑的划分， 划分成若干个虚拟局域网。vlan 最大的 特性是不受物理位置的限制，可以进行 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 14 灵活的划分。 实验六：这次实验总体来说没什 么困难，都是一些基本的交换机和 vlan 配置，但是最后的思考题中提出一些问 题还是很有意思的，配置起来也很有趣。 让我明白了千万不能把时间全部消耗在 实验台上。看文献、看书、看别人的操 作、听别人的经验、研究别人的思路， 边做边思考。要学会比较，不要盲从。 否则，会被一些小小的问题困扰许久。 要想让自己知识更加的丰富，只有让自 己的理论与实践相应的结合起来；才会 学到更加丰厚的知识和地道的经验！ 实验七：通过这次实验，让我体 会到对于网络，我们要树立重视实践更 甚于重视理论的观点，做实验既能加深 我们对实验原理的理解和认识，学会应 用这些原理，又能煅炼我的动手能力， 人总是有一点虚荣心的。只把成功的步 骤或漂亮的结果记到实验记录里，是很 多人的做法。殊不知，许多宝贵经验和 意外发现就这样与你擦肩而过。客观、 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 15 真实、详尽的记录是一笔宝贵的财富。 实验八：计算机网络的实验在做 了几周后终于把交换机有关的实验的全 部做好了！个人感觉通过这几次实验， 自己在计算机网络方面有了很多的了解， 对计算机网络也有了更多的兴趣！让我 明白了英语也要多学习，尤其是专业英 语，对配置路由，交换机有很大方便， 根据需要加深网络编程语言的学习；多 看看方面的书,对了解网络有很大帮助. 对于网络，我们要树立重视实践更甚于 重视理论的观点！ 实验九：本次试验中对路由器命 令行各种操作模式学习研究有了新的体 会，在计算机上配置路由器命令行各种 操作模式，掌握路由器命令行各种操作 模式的区别，以及模式之间的切换。实 现上有了一定的突破，在配置过程中用 到的命令，让我感觉到英语也要多学习， 尤其是专业英语，对配交换机有很大方 便！ 实验十：这次实验关于路由器端 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 16 口的基本配置，通过路由器端口的基本 配置，让我充分明白 锐捷路由器接口 fastethernet 接口 默认情况下是 10m/100m 自适应端口， 双工模式也为自适应，并且在默认情况 下路由器物理端口处于关闭状态。路由 器提供广域网接口，使用 v.35 线缆连接 广域网接口链路。在广域网连接时一端 为 dce，一端为 dte。要求必须在 dce 端 配置时钟频率才能保证链路的连通。在 路由器的物理端口可以灵活配置带宽， 但最大值为该端口的实际物理带宽。 实验十一：通过查看路由器的系 统和配置信息实验，加深我们对实验原 理的理解和认识，学会应用这些原理， 又能煅炼我的动手能力，通过这次实验 让我明白对于网络，我们要树立重视实 践更甚于重视理论的观点！业余时间扩 宽计算机网络硬件方面的视野，尤其希 望可以去电信公司的机房参观学习，提 高个人修养与能力；加强本实验小组内 部各成员之间的交流，现在的团队合作 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 17 精神很重要，要及早的去培养。 实验十二：通过这次实验，让我 明白做过实验的人都经历过失败和挫折。 有些失败应当在预实验阶段发生，你这 时能坦然接受。假如不做预实验，在正 式的实验中遇到，你的挫折感就很明显。 假如你因为赶时间而误操作，你会沮丧。 假如你能因为目前心浮气燥而果断地放 一放，就可以避免悲剧的发生。假如你 早上进入实验室之前还不知道今天要干 什么，你最好想好了再去。最大的错误 是重复犯同样的错误。记住，屡教不改 者不适合做实验，要想让自己知识更加 的丰富，只有让自己的理论与实践相应 的结合起来；才会学到更加丰厚的知识 和地道的经验！ 实验心得体会 在真正投入到创新实验计划当中 之前，我以为不会很难。因为课内实验 我们也做了很多，只要做好预习工作， 好好听老师的讲解，再加上自己多动脑 筋，几乎没遇上什么比较大的困难，实 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 18 验完成起来也比较快。各种各样的实验 加起来，涉及的知识面很广，学到了很 多，让自己对于这样的研究与实验工作 也更加感兴趣。 但是真正开始创新实验计划时， 发现我仿佛进入了一个新的空间。一切 要从头学起，从最简单的做起。与高年 级的学长比起来，自己的基本实验技能 与专业知识少的可怜，面对那些精密的 仪器与无数的文献资料，信心一下子被 浇熄了大半。每天跟在学长后面做着清 洗瓶子，到扫卫生，摘桑叶，诸如此类 的体力活。貌似什么也学不到，看着学 长学姐一言不发的熟练操作，却一点也 摸不到头脑。 有时真的懊恼的有些想 泄气，但幸亏老师常常与我们开会讨论， 开导鼓励我们，他还时常有意无意地启 发我们的安全防范意识。古语说的没错: 耳濡目染。一天天下来，不知不觉当中， 我们的实验技巧越来越熟练，对于一些 仪器的基本操作也能单独上手，学长学 姐很有耐心地一次次纠正我们犯下的或 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 19 大或小的错误，并不厌其烦的叮嘱我们 注意安全。 渐渐地我们可以单独完成一些比 较系统全面的实验工作。但错误当然也 是不可避免的，而且人往往要犯错之后 才能明白如何不犯错和为什么不要犯下 这样的错误。比如因为我们某一步的实 验操作不规范，导致最后的实验结果不 尽入人意，无法纳入最后的总结分析中， 也就是说我们白忙活一场。其实这样的 失败也未尝不是一件好事，通过它我们 更加清晰地认识到这个实验步骤的原理、 影响及具体细节。 重复这是整个实验过程中常做的 一件事，面对规律性不强的实验结果， 我们只有一次次反思，重新再来，如果 一而再再而三的重复失败，我们就只得 求助于学长学姐和老师们了，但是这样 具体的操作细节中失误，非当事人又是 无法完全了解的，还是需要我们自己一 点一点的去摸索。 当然整个实验过程中最困难的还 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 20 要数自行设计实验的具体步骤了，老师 所能给的知识一个全面概括的指导意见， 让我们不致发生方向性的失误。老师也 给了我们一些相关的文献资料，但同样 的道理，具体到某一方面我们还是要自 己去搜索，筛选，概括。有时甚至要面 对一些英文文献，仅凭我们已有的英文 水平还过于单薄。困难就是让人来解决 的。我们摸索前进，自己跑到机房查资 料，下载翻译软件，制定实验方案，阅 读大量晦涩难懂的文献，失败了就再来 一次，总结后再勇往直前。困难一个接 着一个，但既然选择了这条路，我们就 要毅然决然的走下去，不管后面的路是 沼泽泥泞还是荆棘丛生。 终于我们的实验数据慢慢变得有 规律起来，面对棘手的麻烦我们也能镇 定自若，实验的因素探索一个个完成， 一点点接近于目标。回望之前，发现与 取得的成绩，获得的知识相比，以前都 算不了什么。 不得不承认，通过这项本科实践 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 21 创新训练项目，我们学到了很多，得到 了很多，有些是书本上永远也学不来的， 有些仅靠我们自己摸索几乎为不可能的， 有些仅凭我们自行监督是无法坚持下来 的。 在这里要感谢关心爱护我们的老 师，学长学姐还有同届同学以及学弟学 妹，没有你们我们无法完成这项艰巨的 工作。 实验心得体会 在真正投入到 srp 实验苦马 豆的黄酮提取计划当中之前，我以为不 会很难，觉得只要做好准备工作，好好 听导师的讲解，再加上自己多动脑筋， 实验应该能够顺利进行。各种各样的实 验加起来，涉及的知识面很广，学到了 很多，让自己对于这样的研究与实验工 作也更加感兴趣。 但是真正开始创新实验计划时， 发现我仿佛进入了一个新的空间。一切 要从头学起，从最简单的做起。与高年 级的学长比起来，自己的基本实验技能 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 22 与专业知识少的可怜，面对那些精密的 仪器与无数的文献资料，信心一下子被 浇熄了大半。每天跟在组长后面做着清 洗瓶子，到扫卫生诸如此类的零活。貌 似什么也学不到，看着组长一言不发的 熟练操作，却一点也摸不到头脑。 有时真的懊恼的有些想泄气，但 幸亏老师有时会与我们讨论，开导鼓励 我们，还时常有意无意地启发我们的安 全防范意识。古语说的没错:耳濡目染。 一天天下来，不知不觉当中，我的实验 技巧越来越熟练，对于一些仪器的基本 操作也能单独上手，组长很有耐心地一 次次纠正我们犯下的或大或小的错误， 并不厌其烦的叮嘱我们注意安全。 渐渐地我们可以单独完成一些比 较系统全面的实验工作。但错误当然也 是不可避免的，而且人往往要犯错之后 才能明白如何不犯错和为什么不要犯下 这样的错误。比如因为我们某一步的实 验操作不规范，导致最后的实验结果不 尽入人意，无法纳入最后的总结分析中， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 23 也就是说我们白忙活一场。其实这样的 失败也未尝不是一件好事，通过它我们 更加清晰地认识到这个实验步骤的原理、 影响及具体细节。 重复这是整个实验过程中常做的 一件事，面对规律性不强的实验结果， 我们只有一次次反思，重新再来，如果 一而再再而三的重复失败，我们就只得 求助于学长学姐和老师们了，但是这样 具体的操作细节中失误，非当事人又是 无法完全了解的，还是需要我们自己一 点一点的去摸索。 当然整个实验过程中最困难的还 要数自行设计实验的具体步骤了，老师 所能给的知识一个全面概括的指导意见， 让我们不致发生方向性的失误。老师也 给了我们一些相关的文献资料，但同样 的道理，具体到某一方面我们还是要自 己去搜索，筛选，概括。有时甚至要面 对一些英文文献，仅凭我们已有的英文 水平还过于单薄。困难就是让人来解决 的。我们摸索前进，自己跑到机房查资 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 24 料，下载翻译软件，制定实验方案，阅 读大量晦涩难懂的文献，失败了就再来 一次，总结后再勇往直前。困难一个接 着一个，但既然选择了这条路，我们就 要毅然决然的走下去，不管后面的路是 沼泽泥泞还是荆棘丛生。 终于我们的实验数据慢慢变得有 规律起来，面对棘手的麻烦我们也能镇 定自若，实验的因素探索一个个完成， 一点点接近于目标。回望之前，发现与 取得的成绩，获得的知识相比，以前都 算不了什么。 不得不承认，通过这项本科实践 创新训练项目，我们学到了很多，得到 了很多，有些是书本上永远也学不来的， 有些仅靠我们自己摸索几乎为不可能的， 有些仅凭我们自行监督是无法坚持下来 的。 在这里要感谢关心爱护我们的老 师，学长学姐还有同届同学，没有你们 我们无法完成这项意义深刻的工作。 生物技术实验心得体会 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 25 基因克隆技术是分子生物学的核 心技术，其目的是获得某一基因或 dna 片段的大量拷贝，用于深入分析基因的 结构与功能，并可达到人为改造细胞以 及物种遗传性状的目的。本论文主要从 以下几个方面来介绍基因克隆技术：目 的基因的获得 、目的基因和载体的连 接、重组分子的扩增和鉴定。 可概括为分、切、连、转、选。 “分”是指分离制备合格的待操作的 dna，包括作为运载体的 dna 和欲克隆 的目的 dna； “切”是指用序列特异的限 制性内切酶切开载体 dna，或者切出目 的基因；“连 ”是指用 dna 连接酶将目的 dna 同载体 dna 连接起来，形成重组的 dna 分子；“转”是指通过特殊的方法将 重组的 dna 分子送入宿主细胞中进行复 制和扩增；“ 选” 则是从宿主群体中挑选 出携带有重组 dna 分子的个体。基因克 隆技术包括把来自不同生物的基因同有 自主复制能力的载体 dna 在体外人工连 接，构建成新的重组 dna，然后送入受 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 26 体生物中去表达，从而产生遗传物质和 状态的转移和重新组合。 一. 目的基因的获得 目的基因是指所要研究或应用的 基因，也就是将要克隆或表达的基因。 获得目的基因是分子克隆过程中最重要 的一步。基因工程流程的第一步就是获 得目的 dna 片段 ,。所需目的基因的来源 , 不外乎是分离自然存在的基因或人工合 成基因。常用的方法有 pcr 法、化学合 成法、cdna 法及建立基因文库的方法来 筛选 pcr 方法 pcr 是一种在体外快速扩增特定 基因或 dna。聚合酶链式反应是体外酶 促合成特异 dna 片段的一种方法，由高 温变性、低温退火及适温延伸等几步反 应组成一个周期，循环进行，使目的 dna 得以迅速扩增，具有特异性强、灵 敏度高、操作简便、省时等特点。它不 仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分 析等基础研究，还可用于疾病的诊断或 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 27 任何有 dna,rna 的地方。 化学合成法制备基因片段 采用 dna 合成仪，对目的基因进 行分段合成，然后进行连接，可以得到 所需的目的基因。 二、 重组质粒的构建 dna 体外重组是将目的基因在 dna 连接酶作用下，连接到合适的载体 dna 上，以便下一步转化之用。重组的 dna 分子是在 dna 连接酶的作用下，有 mg2 、atp 存在的连接缓冲 系统中，将分别经酶切的载体分 子与外源 dna 分子进行连接。连接反应 的温度在 37时 有利于连接酶的活性。但是在这 个温度下粘末端的氢键结合是不稳定的。 因此采取折中的温度，即 1216，连 接 1216h，这样既可最大限度地发挥 连接酶的活性，又兼顾到短暂配对结构 的稳定。 三、重组分子的扩增和鉴定 重组 dna 分子导入受体细胞 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 28 目的基因和载体在体外连接形成 重组 dna 分子后，需要被导入受体细胞 中才能进行增殖和表达。受体细胞是重 组基因增殖的场所，所以对受体细胞也 应具有几点要求：容易接纳重组 dna 分子；对载体的复制扩增无严格限制； 不存在特异的能降解外源 dna 的内切 酶体；不对外源 dna 进行修饰。一般 将重组 dna 分子导入原核细胞的过程称 为转化，而导入真核细胞的过程称为转 染。将重组 dna 分子和感受态大肠杆菌 细胞相混合，使重组 dna 分子进入大肠 杆菌中，就可以实现重组 dna 分子的转 化。 重组 dna 分子的鉴定 重组 dna 分子导入受体细胞后是 否得到扩增，扩增后的重组 dna 分子是 否正确，导入的重组 dna 分子是否含有 正确的插入片段，重组 dna 分子能否表 达插入的目的基因，一般可以采用 x- gal 筛选的方法对重组 dna 分子进行鉴 定。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 29 四、实验中的注意事项 1、大肠杆菌液体培养基和固体 筛选培养基制备： 1) 接种过程中，试管或三角瓶 口等，也可通过火焰灼烧灭菌。 2) 培养基、橡胶制品、塑料制 品等不能使用干热灭菌。 3) 在加热过程中应不断搅拌， 以防琼脂粉沉淀糊底烧焦，并应控制火 力，以免培养基起泡而溢出容器。 4) 注意培养基分装时避免其沾 污三角瓶口、试管口。 5) 严格按照高压蒸汽灭菌的灭 菌指标对培养基、器皿灭菌，确保灭菌 彻底。 2、大肠杆菌工程菌平板培养： 1) 划线分离时，挑菌量要小， 严格无菌操作，避免环境中的杂菌污染。 2) 画线时接中环圈内不能有菌 膜产生，会造成接种数过多，结果不明 显。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 30 3、pcr 扩增目的基因片段： 1) pcr 体系所加成分的实际用量， 应根据实验者选用的该成分的终浓度及 所拥有的贮备液浓度进行核算。 2) 加样时要认真,吸头垂直进入 试剂管，每加完一样要换一个吸头，同 时在已加的样品前做个记号以