标准解读
GB/T 7918.3-1987《化妆品微生物标准检验方法 粪大肠菌群》是中国国家标准之一,旨在规定化妆品中粪大肠菌群的检测方法。该标准适用于化妆品成品及其原料中粪大肠菌群(包括耐热大肠菌群)的测定。粪大肠菌群的存在通常指示产品可能受到人或温血动物粪便污染,因此其检测对于确保化妆品安全至关重要。
根据此标准,检测过程主要包括样品准备、增菌培养、分离纯化以及最终确认几个步骤。首先需要从待检样品中取样,并进行适当稀释;接着将稀释后的样品接种到适宜的选择性培养基上,在特定条件下进行增菌培养;之后通过进一步的生化试验等手段对疑似阳性菌落进行分离与鉴定,以确定是否存在目标细菌。
该标准还详细列出了实验所需材料如培养基、试剂及其配制方法,以及操作过程中应注意的具体事项和技术要求。例如,使用LST肉汤作为初步发酵管来进行预增菌,然后采用BGLB肉汤或其他等效培养基进行复发酵验证,从而提高检测结果准确性。
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- 现行
- 正在执行有效
- 1987-05-28 颁布
- 1987-10-01 实施
©正版授权
文档简介
中华人民共和国国家标准化妆品微生物标准检验方法粪大肠菌群07918. 3一87of 可因此粪大肠菌被列为重要的卫生指标菌。1方法提要根据粪大肠菌群所具有的生物特性,如革兰氏阴性无芽胞杆菌在44培养24在选择性培养基上产生典型菌落,能分解色氮酸产生艘基质。甲阶紫水溶液2. 500蛋白陈、胆盐及乳糖溶于蒸馏水中,调4,加入指示剂,混匀,分装试管(每支试管中加一个小倒管)。115 C (10 20馏水量不变,其他成分量加倍。2. 3伊红美蓝(脂成分:蛋白陈108乳搪10将琼脂加到900热溶解,然后加入磷酸氢二钾蛋白陈,混匀,使之溶解。再以蒸馏水补足至1000正221C ( 15 1b) 15 用时加入乳糖并加热融化琼脂。冷至60左右以无菌手续加入灭菌的伊红美蓝溶液,摇匀。倾注平皿备用。中华人民共和国卫生部1987一05一28批准1987一10一01实施918。3一872. 4蛋白陈水(作靛基质试验用)成分:蛋白陈(或胰蛋白陈)2000上述成分加热熔化,调02,分装小试管,高压灭菌121C(15 15 . 5靛基质试剂柯凡克试剂:将5后缓慢加入浓盐酸25验方法:接种细菌于蛋白陈水中,于44培养24h,沿管壁加柯凡克试剂0. 3性者于试剂层显深玫瑰红色。注蛋白陈应含有丰富的色氨酸,每批蛋白陈买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用。6. 晶紫精20后与草酸按溶液混合。1入燕馏水少许,充分振摇,待完全溶解后,再加燕馏水至3005%乙醉。黄0. 2595写乙醉置过夜,滤纸过滤。取该液5%石碳酸水溶液90为石碳酸复红液。再取此液l 为稀石碳酸复红液。1将涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染色液,染l 洗。用洗。3滴加95酒精脱色,约30s,或将酒精滴满整个涂片,立即倾去,再用酒精滴满整个涂片,脱色l 洗。2. 4滴加复染液,复染1 洗,待干,6. 3染色结果革兰氏阳性菌呈紫色,革兰氏阴性菌呈红色。注:如用1:1染时间仅需3仪器3. 1恒温水浴或隔水式恒温箱:44 C,918. . 3显微镜。7锥形瓶。. 10 11高压消毒锅。3. 12灭菌吸管。1取l :10稀释的样品,加到l 44培养箱中培养24不产酸也不产气,则报告为粪大肠菌群阴性。养18时取该培养液144培养24h,经培养后,在上述平板上观察有无典型菌落生长。大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养基上的典型菌落呈深紫黑色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润,常具有金属光泽。也有的呈紫黑色,不带或略带金属光泽,或粉紫色,中心较深的菌落。亦常为大肠菌群,均应注意挑选。4. 3挑取上述可疑菌落,涂片作革兰氏染色镜检。入靛基质试荆约0. 5察靛基质反应。阳性者液面呈玫瑰红色。阴性反应液面呈试剂本色。5检验结果报告平板上有典型菌落,并经证实为革兰氏阴性短杆菌,靛基质试验阳性,则可报告被检样品中检出粪大肠菌群。附加说明:本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归
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