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端粒酶活性检测 一、TRAP-PCR 银染法 实验目的：通过 TRAP-PCR 银染法检测鉴定样品中端粒酶活性 实验原理：端粒 DNA 与细胞的寿命密切相关，而合成又依赖于端粒酶。正常人体细胞中不 能检测出端粒酶活性的表达，而肿瘤细胞株及大多数肿瘤组织中的端粒酶活性却异常的高 表达。TRAP银染法端粒酶活性检测试剂盒是采用端粒重复序列扩增的方法，利用银染技 术检测端粒酶的活性。阳性结果在凝胶电泳上显示相隔 6 bp 的梯状条带，条带的深浅表示 端粒酶活性的大小。 实验材料： 试剂：TRAPPCR 银染法端粒酶活性检测试剂盒、Lysis buffer、PCR 相关试剂、聚丙烯 酰胺电泳试剂、蛋白定量试剂等 仪器：涡旋仪、低温高速离心机、PCR 扩增仪等 实验内容与方法： 1 细胞端粒酶或组织标本端粒酶的提取 2 PCR 扩增 3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 4 银染 二、荧光定量 PCR 法（KGSA006-2） 实验目的：通过荧光定量 PCR 法检测鉴定样品中端粒酶活性 实验原理：端粒酶蛋白催化亚基（TERT 或 TRT）具有反转录酶的主要特征，其表达在正常 细胞中受到抑制，与端粒酶活性的表达一致。实时荧光定量 PCR 端粒酶检测实验通过检测 TERT 的 mRNA 表达水平来间接反应端粒酶的活性。 实验材料： 试剂：荧光定量 PCR 法端粒酶活性检测试剂盒、Lysis buffer、荧光定量 PCR 相关试剂、 蛋白定量试剂等 仪器：涡旋仪、低温高速离心机、荧光定量 PCR 扩增仪等 实验内容与方法： 1 样本 lysis buffer 提取 2 并进行逆转录获得 cDNA； 3 实时定量 PCR 反应 客户提供： 1、 实验信息 样品信息 （名称、来源等） 2、实验材料提供 （1）样本材料 新鲜或冷冻细胞不少于 5106 个 组织样本不少于 50mg （2）试剂： 采用凯基生物自产端粒酶活性检测试剂盒等。或可按客户要求代订和使用其它品牌公司试 剂。 服务周期：2 周至 8 周（具体视样品数而定） 结果提交：提交实验报告书（包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析） 、 原始数据、图片，文本或电子版。 收费标准与付费方式： TRAPPCR 银染法端粒酶活性检测 500 元/样品； 荧光定量 PCR 法端粒酶活性检测 600 元/样品。 实例 端粒酶银染法检测 端粒酶荧光定量 PCR 法检测 南京凯基生物科技发展有限公司 技术服务： 电话52880839 传真52880830 Email: 公司帐户： 户 名：南京凯基生物科技发展有限公司 开户行：招商银行南京分行营业部
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