细菌标本的采集和运送

临床细菌检验标本采集指南 1 所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作，防止污染原则下认真进行。 2 已采集原始标本都应置于、密封的容器中运送，含有明显区分各部门文字标 志。 3 带针头的注射器运送标本到实验室，用无菌试管或防护装置套住注射针，再 置于防漏塑料袋中运送。 4 避免来自寄生菌的污染，应当保证每份标本代表感染过程。健康宿主在感染 的许多部位也可出现的正常菌丛，主要来自皮肤、黏膜和呼吸道，它若过早、过 度生长，掩蔽了真正的病原菌，干扰培养结果解释。 5 采集足够量标本，材料不足可能产生假阴性结果。 6 已采集标本，常规性细菌学检验，不超过 1 h 送交实验室，延迟运送影响病原 菌检出。 血液和骨髓标本的采集 1 菌血症患者多数为间歇性， 病原菌是周期性出现在血液中， 随之无细菌时期。 不管临床症状经历的严重程度， 但患者血液中病原菌浓度水平相当低， 据此要求 临床多次采集血液标本进行培养， 但 24 h 内一般不超过 3 次， 成人每次血量 10 -20 ml 可提高阳性检出率。 2 血标本接种到培养瓶后，轻轻混匀以防血液凝固。立即送检，如不能立即送 检，需室温保存或置 35 37 孵箱中，切勿冷藏。 3 一般患者出现以下一种体症时可作为采血的重要指征： 发热 ( 38 ) 或低温 ( 36 ) ，寒战，白细胞增多，皮肤粘膜出血，昏迷，多器官衰竭，血压降低， CRP 升高及呼吸快，特殊患者 ( 如血液病 ) 出现粒细胞减少，血小板减少等，或同时具 备上述几种体症的临床可疑菌血症应采集血培养。 新生儿菌血症， 应该增加尿液 和脑脊液培养。 对入院危重感染患者在未进行系统性抗菌药物治疗之前， 应及时 采集血培养。 4 采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行，在 24h 内采集 2 3 份血培养 ( 一 次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养 ) 。对间歇性寒战或发热应在 寒战或体温高峰到来之前 0.5 1h 采血液，或于寒战或发烧后 lh 进行。 5 不明原因发热，如隐性脓肿，伤寒热和波浪热，先采集 2 3 份血标本， 24 36 h 后估计体温升高之前 ( 通常在下午 ) 再采集 2 份以上。 6 急性脑膜炎炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎和肾孟肾炎发热患者，应在抗 生素治疗或更换前，从不同部位采集血液标本，做 2 次血液培养 ( 应在抗生素治疗 前完成 ) 。 7 疑似心内膜炎患者：急性病例，在抗生素治疗或改变前 1 - 2h ，从各个不同 部位采血 3 次做血液培养。 亚急性病例， 第一天 24 h 内， 相隔 1 h 连续采集 3 次血标 本培养， 若 24 -48 h 全部阴性， 再采集 2 -3 次血标本培养。 若已经抗生素治疗患者， 连续 3 天，每天取 2 次血液标本。 8 皮肤消毒程序：严格执行以下三步法： 1 ） 70 酒精擦拭静脉穿刺部位待 30s 以上。 2)1 2 碘酊作用 30s 或 10 碘伏 60s ，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域 直径达 3cm 以上。 3)70 酒精脱碘。对碘过敏的患者，用 70 酒精消毒 60s ，待酒精挥发干燥后采 血。 9 培养瓶消毒程序 1)70 酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用 60s 。 2) 用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞子表面残余酒精，然后注入血液。如果是自 配带塞子的三角瓶，此步骤可免去。 10 静脉穿刺和培养瓶接种程序 1) 在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿 刺点。 2) 用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头 ( 如果行第二次穿刺，应换针头 ) 直接注入 血培养瓶， 如果是自配带塞子的三角瓶， 严格无菌操作将血液注入三角瓶内， 应 烧瓶口，避免采血针头与三角瓶瓶口和瓶塞接触。 11 采血量：成人采血量是 5 l0ml ，儿童 l 5ml, 骨髓 l 2ml 。血液和肉汤之比 为 1 ： 5 l ： 10 为宜。 附 血管内导管尖端培养 1. 用酒精清洁导管周围皮肤。 2. 无菌手续移动导管，剪取尖端末段 5 cm ，直接置入无菌试管中。 3. 立即运送到细菌实验室，防止干燥，常规培养不超过 15min ,4 保存不越过 2 h 。 4 只有当做血液培养的同时， 做血管内导管尖端培养， 确定患者菌血症的来源。 或是抽取新鲜脓性标本培养， 确定软组织相关感染， 并做在附近有插入导管的尖 端段培养。 脑脊液标本的采集 CSF 采集后，置于无菌带塞试管中， 15min 内运送实验室，绝不可冷藏。一般细 菌培养检验最小量 1ml ，真菌 2ml 。 尿液标本的采集 1 有下列情况之一者，应进行尿培养 (1) 有典型的尿路感染症状； (2) 肉眼脓尿或血尿； (3) 尿常规：白细胞和或亚硝酸盐阳性； (4) 不明原因的发热，无其他局部症状； (5) 留置导尿管的病人出现发热； (6) 膀胱排空功能受损； (7) 泌尿系统疾病手术前。 2 注意尽量采集晨尿标本，睡前少饮水，以免稀释尿液，应保证尿液在膀胱内 停留 4h 以上。 3 中段尿采集 清洁外阴反尿道口周围，自然排尿， 让尿流不间停，截留中段 尿，置于无菌容器中，不少于 1 ml 。 4 直接插导管采集尿标本 一般插入导管后。先让尿流弃 15 ml 再留取培养标 本。 尽情不采用导管采集标本， 极容易将尿道细菌丛进入膀胱， 增加医源性感染 危险。 5 滞留导管集尿 用 70% 酒精消毒导管口， 用针筒抽取 5 - 10 ml 尿，置于无菌 容器中送实验室。 操作时注意防止混入消毒剂。 不能采集收集袋中的尿液。 滞留 导管会使膀胱带有细菌，尽可能不采用。 6 标本采集后，常规 2 h 送交实验室。 下呼吸道标本的采集 有以下任何一种情况时建议采集标本进行培养： (1) 咳嗽； (2) 咯血； (3) 呼吸困难； (4) 发热伴白细胞增高尤其是中性粒细胞或 CRP 明显增高情况者。 1 自然咳痰法 以晨痰为佳，采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口 腔和牙齿， 有假牙者应取下假牙。 尽可能在用抗菌药物之前采集标本。 用力咳出 呼吸道深部的痰，痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖 的容器中， 标本量应 lml 。 咳痰困难者可用雾化吸入加温至 45 的 100g L NaCl 水溶液，使痰液易于排出。标本应尽快送检，不能及时送检的标本，室温保存 2h 。 2 支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针 穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集， 但必须注意 采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。 3 小儿取痰法 用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽 时， 可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。 幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方， 以诱发咳痰。 粪便标本的采集 当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培养： (1) 粪 便涂片镜检白细胞 5 HP ； (2) 重症腹泻； (3) 体温大于 38.5 ； (4) 血便； (5) 便中 有脓液； (6) 未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者； (7) 来自疫区的患者。 1 标本采集尽可能在发病早期和使用抗菌药物治疗之前。 在不同的时间采集 2 3 个标本可以提高致病菌的分离率。 2 自然排便采集粪便标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便 1 3g 。 液体粪便则取絮状物，一般取 l 3ml ，直接装入粪便容器中送检。 3 直肠拭子采集粪便标本，适于排便困难患者或婴幼儿。可将肛门周围洗净， 用无菌盐水湿润的棉拭子插入肛门，成人约 4 5cm ，儿童约 2 3cm ，在肛门括 约肌处柔和地旋转拭子，可在拭子上明显见到粪便。 4 粪便标本置于 清 洁 、干燥广口容器中 ( 不宜使用纸盒 ) 尽快送检，室温条件下 不能超过 2h 。 眼、耳、鼻、喉 标 本的 采集 1. 眼结膜标本 预先沾湿拭子， 在结膜上滚动采集标本。 标本在 15 min 内送达实 验室。 2. 眼角膜标本采集 在麻醉下，用刮勺在溃疡或创伤边缘刮取碎屑，在接种在 培养基平饭上培养和涂片。 眼部感染所获取的标本量很少， 建议医师取样后直接种在培养基平板上培养和涂 片。 3. 口腔咽部标本 先用一个试子揩去溃疡或创面浅表分泌物， 第二个试子采集溃 疡边缘或底部，常规培养 2 h 运送实验室。 4. 患有外耳炎患者，需要深部耳拭子，因为浅表拭子可能遗漏链球菌引起的蜂 窝织炎。 5. 鼻标本留取 用一根无菌棉拭子，伸进一侧鼻孔约 2.5 cm ，与鼻黏膜接触， 轻轻地旋转拭子蘸取黏膜上分泌物， 缓慢抽出， 置于运送培养基或将拭子直接送 检。 脓液标本的采集 ( 病灶分泌物 ) 1 开放脓肿用无菌生理盐水或 70% 乙醇擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡基底 部或边缘部，采集二个拭子。置无菌容器中送检。 2 闭合性脓肿用注射器抽取，刺入无菌橡皮塞中送检。 无菌体液标本的采集 1 无菌体液是指除血液、骨髓和脑脊液外的羊膜液、后穹隆穿刺液、透析液、 心包液、腹膜穿刺液和滑膜液。 2 当留取标本时，防止无菌体液凝固，在无菌容器内预先加入灭菌肝素 0.5 mg( 可抗凝 5 ml 标本 ) 再注入各种穿刺液，轻轻混合。 生殖系统标本的采集 阴 道、子 宫颈 凹陷、子 宫 内膜、生殖道 创伤 、前庭大腺、羊水膜及前列腺等分泌 物 应 由医 师 采集， 收集于无菌 试 管内送 检 。 淋病奈瑟菌 检查时 ，