hp相关疾病动物模型：仍是hp研究中难点(1)

HpHp 相关疾病动物模型：仍是相关疾病动物模型：仍是 HpHp 研究中研究中 难点难点(1)(1) Subjectheadings Helicobacterinfections;gastritis;stomachulcer;disea semodels,animal 1 原文要点 作者选用沙土鼠，禁食 24h 后接种标准菌株 ATCC43504 用 280g/L 布氏肉汤制备成 21011CFU 菌液，以建立 Hp 感 染动物模型.实验为 4 组：H 组：只接种 Hp;EH 组：接种 Hp 前 30min 先用 400mL/L 乙醇；E 组：单用乙醇对照；C 组： 空白对照.分别于， ，用标记 S 期细胞的 BRDU100mg/kgsc，1h 后处死动物，观察组织学变化、革兰 染色、吉姆萨染色及免疫组化染色检测 Hp，AB-PAS 观察粘 液种类及免疫组化染色计数肥大细胞、BRDU，PCNA 染色观 察增殖期细胞，同时观察白细胞、T 和 B 淋巴细胞的浸润情 况及凋亡细胞，并对接种 Hp1 和 6mo 后的 Hp 阳性者采用兰 索拉唑、羟氨苄青霉素和克拉霉素的三联疗法，观察 Hp 的 根除率.结果发现：E 组和 EH 组早期出现糜烂性炎症，E 组 1mo 后组织学恢复正常，EH 组 6wk 后转为慢性胃炎，EH 组 在 4mo 后在幽门部和胃小弯可见溃疡形成.而 C 组和 H 组无 明显的肉眼及组织学病理改变.另外发现 Hp 相关性胃炎者 细胞增殖亢进，Hp 根除治疗后炎症明显减轻，2mo 后基本 消失，近期 Hp 感染者疗效优于稍长期.lAC 方案的 Hp 根除 率达 100%. 名词解释 幽门螺杆菌 是主要定植于人胃内的革兰 阴性螺旋杆状细菌，具有特征性的高活性尿素酶.Hp 根除率 是指服用抗 Hp 药物疗程结束后停用 1mo 以上检测 Hp 转阴 者.Hp 清除率 是指抗 Hp 疗程结束后不足 1mo，检测 Hp 转 阴者，但不能保证目前 Hp 检测方法对极少量残留 Hp 或变 异 Hp 的检出，在停药 1mo 后复发率较高. 2 评论 自 1983 年幽门螺杆菌被分离成功，Hp 感染与胃十二指 肠疾病的关系研究已有十数年的历史，但在动物模型建立 方面存在相当的困难，相当一部分研究往往采用非 Hp 的螺 杆菌属细菌来替代，主要是鼬鼠螺杆菌1,8 、猫胃螺杆 菌2 、还有少数狗胃螺旋菌4 、猪胃螺旋菌3和人 胃螺杆菌4. Hp 在动物胃内定植困难.非人灵长类动物5和雪貂 6可有 Hp 的自然感染，可能成为 Hp 潜在的动物模型 7，8.目前已建立的 Hp 的动物模型主要有无菌乳猪 9 、屏障饲养小猪11 、普通饲养小猪12 、小猎犬 13 、啮齿类动物如无菌或 SPF 级的豚鼠14，15 、 BALB/c 小鼠16，19 、裸鼠17 、沙土鼠18 、ICR 小 鼠19.早先的许多 Hp 动物模型均难以建立，主要与动 物宿主的特异性有关，相对敏感的动物有猪、犬、沙土鼠 和豚鼠，而非人灵长类动物及雪貂常有 Hp 定植.一般来说， 无免疫力或无菌动物易于 SPF 动物易于普通动物.其次是 Hp 菌株的选择，后期筛检出一些侵袭力较强的细菌使得动物 模型易于在较普通的动物中建立. 诱发的病变主要有慢性胃炎5-19 ，少数出现急性炎 反应18 、急性胃炎18 、糜烂18 、胃溃疡18 、 萎缩性胃炎20 、MALT 淋巴瘤8和上皮过度增殖或胃 癌21，22.急性胃炎、胃粘膜糜烂、胃溃疡和胃癌主要 见于 Hp 感染的沙土鼠动物模型21，22.且一般需相应 的诱发因素，溃疡模型一般需有致溃疡的理化因素参与， 致胃上皮细胞的过度增殖或胃癌有 Hp 外的致癌或损伤因素 的参与，这难以说明 Hp 确实具有致溃疡及致胃癌的作用和 机制.mALT 淋巴瘤主要由 Hp 在伴有 Hm 感染的雪貂中发现， 与此类似，由 Hf 感染的小鼠模型中也诱发出 MALT 淋巴瘤 病变，并可经抗生素治愈23.在豚鼠动物模型中，Hp 阳 性胃粘膜中除有较明显的慢性活动性炎症15表现外， 也出现 MALT 增生24. 采用的 Hp 菌株主要有高侵袭力株和低侵袭力株，但低 侵袭力株通常不易成功9.hp 的侵袭力主要与其毒力、 动力和粘附性等有关，可通过临床分离筛检和在动物体内 驯化而获得，因此，由此而建立的动物模型与人类 Hp 的自 然感染结果尚有相当的差距.用于动物模型的 Hp 菌株主要 有临床分离株和临床分离筛选株/标准株.euleretal7 比较了分离自猴的 Hp 与人的 Hp 接种于猴，结果仅前者定 植成功并引起组织学改变.eaton 通过对 33 只悉生乳猪分组 接种高动力产毒株 26695、弱动力及非产毒株 Tx30a 和中动 力产毒株 60190，结果 Hp 的感染率分别为 100%，17%和 40%9.另外，Eaton 比较了 Hp 鞭毛素基因，发现 flaA 和 flaB 均阳性的高动力 N6 株10 ，易于成功感染动物. 我们使用筛选出的高粘附 M1 株也较容易建立 Hp 感染模型. 但在豚鼠，对 Hp 菌株的要求可能较低，且易于建立，引起 胃明显的慢性活动性炎症反应15或 MALT 淋巴细胞增生 14.由澳大利亚分离筛选的 Hp 悉尼株对啮齿类动物有 较好的适应性，已较广泛用于 Hp 小动物模型的研究和应用. 目前存在的主要问题是，强致病性的 Hp 缺乏普遍性. 也有作者提出 Hp 可能是人类胃内的原籍菌25 ，因为 Hp 与人类共生达数亿年，原籍 Hp 对人类儿童期的胃肠道感染 有预警和增加免疫力的作用.hp 对人体侵袭性显得较强的原 因可能是 Hp 菌株的选择性及人体开始获得 Hp 的年龄增大， 前者由于现代生活方式的改变使得仅毒力株或侵袭力较强 的 Hp 易于传播，后者使人体对 Hp 的宿主反应更加明显.目 前所能建立的 Hp 动物模型是强侵袭株的模型，其意义缺乏 普遍性.因此，我们对 Hp 的认识，应由原先的一视同仁转 为区别对待.同时也显示出建立 Hp 动物模型进行深入研究 的重要性. 该文作者在 Hp 的致胃溃疡模型方面进行了一些有益的 尝试.证实沙土鼠是 Hp 感染敏感动物、与乙醇合用可致糜 烂或溃疡.但存在几点不足之处：H 组的组织学改变仅有 轻微炎症而无溃疡，尚不足以说明 Hp 存在致溃疡的作用， 由于 E 组有无溃疡形成未明确指出，糜烂性病变在 1mo 后 恢复正常，而 EH 组的溃疡于 4mo 后仍存在，提示 Hp 对乙 醇所致的胃粘膜损伤的协同作用，Hp 可能是溃疡发生或持 续的协同因素.但该文叙述尚欠清楚.另外，溃疡的病变仍 需有组织学的诊断标准即深达肌层的组织缺损才是溃疡， 而浅表破损算是糜烂，本文未见提出组织学诊断标准，也 未见组织学图片显示.Hp 根除试验如何判定沙土鼠确实感 染上 Hp 文中未说明判定沙土鼠 Hp 感染模型成功的未致死 性检测方式，如 14C 尿素呼气试验，如无相应方式，应另 设对照组，因为 Hp 的短期动物模型较易建立，而长期动物 模型的建立较为困难.采用除菌的概念不够准确，如为根 除的概念，就没有必要分为完全除菌、著效、有效、无效