临床生化afu检测ppt课件

-岩藻糖苷酶(AFU)试剂介绍 新一代单一稳定液体试剂 四川迈克科技有限公司 -L-岩藻糖苷酶(-L-FUCOSidase，AFU)是一种溶酶体酸性水解酶，早 期测定本酶主要用于遗传性AFU缺乏症的诊断，并借以与其它遗传性粘多糖贮 积病的鉴别。1980年法国学者Deugnier等研究发现，原发性肝癌(PHC)患者血 清AFU升高，并被众多的研究所证实。故有人提出AFU可作为PHC的肿瘤标志物 ，与AFP联合或参照应用大大提高了诊疗价值。近年来研究发现，AFU对某些 疾病的发生、发展均具有重要意义。 国内外早期文献报道AFU在原发性肝癌患者血清中活性显著升高,测定 AFU对诊断原发性肝癌具有重要价值, AFU测定有利于原发性肝癌（PHC）的诊 断、疗效观察、手术后随访、以及肝癌普查。在AFP阴性的病例中，大约有70 -85%出现AFU的阳性结果，在小肝癌病例血清AFU的阳性率高于AFP，因此同时 测定AFU与AFP可使PHC的阳性检出率从单测的AFP70%，提高至90-94% 。 目前，国内大多数医院使用的商品试剂为终点法试剂，该法由于酶底物本 身的抗干扰性差，对溶血、黄疸表现出明显的基质效应。我们根据市场需要 ，从国外引进新型底物（MCPNP），并优化反应体系，加入合成溶血抗干扰剂 和采用抗黄疸缓冲体系，使试剂具有抗干扰性强、精密度较好，基质效应不 明显。历时近两年的试验室和临床应用评价，结果稳定,性能达到设计要求， 现正式向国内市场独家推出新一代的单一稳定AFU测定试剂。该试剂采用连续 检测法，适用于各种半/全自动分析仪器。 概 述 主要性能指标 l单一液体试剂: 直接使用，不占试剂位。 l连续检测法: 方便简捷，抗干扰性强 l高稳定性: 28避光密闭贮存稳定12个月 28避光开瓶稳定性 30天 l检测范围: 高感度方式(原倍) 300U/L 低感度方式(减量) 600U/L l精 密 度: 平均CV%=1.14 l相 关 性: 与终点法比较 r=0.976 l适 用 性: 适用于各种半/全自动分析仪 l灵 敏 度: 高感度方式0.0100/min(约20U/L) l反应线性期： 7分钟 l稳定的试剂空白: 监测期内空白稳定 仪器:7060分析仪 精 密 度 灵敏度(S2反应曲线) 试剂空白 主要测定方法及部分性能比较 方 法反应时间灵敏度CV%抗干扰性试剂 比色法3760分钟低1.80 差;收溶血/黄疸/脂血 影响大 干粉 自动分析法37 5分钟中等2.46 较好; 受溶血和黄疸 影响 液体 连续检测 法3760秒中等6.20 较好;胆红素/溶血/ 脂血影响较小 液体/干粉 CPNP法3760秒高2.10 较好;胆红素/溶血/ 脂血影响较小 干粉 MGCPNP法3760秒高1.13 较好;对溶血/脂血/ 黄疸有良好的抗干扰 性. 单一液体 ELISA法37 60分钟极高 荧光法极高(0.06U/L) 临床意义 AFU测定有利于原发性肝癌（PHC）的诊断、疗效观察、手术后随访、以 及肝癌普查；在AFP阴性的病例中，大约有70-85%出现AFU的阳性结果，在小 肝癌病例血清AFU的阳性率高于AFP，因此同时测定AFU与AFP可使PHC的阳 性检出率从单侧的AFP70%，提高至90-94% AFU广泛存在于人体各组织细胞溶酶体和体液中，胎盘、胎儿组织、脑、肺 、肝、胰、肾以及血清、尿液、唾液和泪液中均含有AFU。早期测定本酶主要用 于遗传性AFU缺乏症的诊断，并借以与其它遗传性粘多糖贮积病的鉴别。1980 年法国学者Deugnier等研究发现，原发性肝癌（PHC）患者血清AFU升高，并 被众多研究所证实。故有人提出AFU可作为PHC的肿瘤标志物，与AFP联合或 参照应用大大提高了诊疗价值。近年来，国内外学者又作了许多研究，发现AFU 对某些疾病的发生、发展均有重要意义。 临床资料表明，在肝癌诊断中，PHC患者AFU活性不仅显著高于正常对 照，而且也显著高于转移性肝癌、肝硬化、先天性肝囊肿、恶性血管内 皮瘤、胆管细胞癌和其它良性占位性病变。对PHC诊断的阳性率为70- 85%，特异性达90%左右。Marotta等对PHC、肝硬化后肝癌患者进行 AFU、AFP检测，发现PHC和肝硬化后肝癌患者AFU、AFP均增高。慢 性肝炎和肝硬化患者血清AFU也增高，其阳性率分别为3.8%和5.6%,可 能与肝细胞损伤,酶逆流入血有关。也有血清AFU在PHC和肝硬化等非 PHC疾病组重叠的报道，但后者一般轻度升高，且随疾病的治愈和好转 而下降；而PHC则血清AFU持续升高，且升高幅度较大。因此AFU测定 还有鉴别诊断的意义。AFU活性升高与肝功能受损和肝细胞破坏无关， 是由于癌细胞本身代谢所致。有研究提示AFU诊断肝细胞癌（HCC）的 敏感性好，而特异性较AFP为低。血清AFU的活性和阳性率与肝癌直径 大小无明显相关性。血清AFU活性与AFP水平无相关性，AFP阴性和 AFP升高而不足以诊断PHC患者，其血清AFU的阳性率达80.8%。肝组 织活检证实为PHC者，血清AFU的阳性率67%为AFP阳性率（20%）三 倍以上。因此AFU测定对AFP阴性和小细胞肝癌的诊断价值更大。AFU 与AFP联合检测可提高肝癌的检出率。Giadina等对肝硬化患者进行随访 研究，结果表明，血清AFU活性是早期发现HCC的有用指标，血清AFU 明显增加的肝硬化患者应及时检测其它肝癌标志明确诊断。 临床意义临床意义 测定AFU活性还有有利于不同类型白血病分化程度的认识，从而指导临 床诊断和治疗。Besly等报道，B细胞性慢性淋巴细胞白血病患者白细胞AFU 活性明显低于其它类型白血病，认为这与B细胞属性无关，而是恶性细胞的 增殖产物。 研究表明，随妊娠周数增加血浆AFU递增，在分娩或人工终止妊娠后， 迅速下降，5天后降至正常。胎儿、胎盘组织也可影响妊娠时血浆AFU活性 ，故测定AFU可作为妊娠的监测指标。卵巢癌患者血清AFU活性下降。 胃癌患者血清AFU升高，急性胰腺炎不升高，囊性纤维变性伴发胰腺炎 时则下降。 临床意义临床意义 PHC与HCC时AFU阳性率 67.8%HCC 87%82.0%75.%76.0%81.2%PHC 翟飞等 报 道 王晓玲等 报 道 Dongnier等 报 道 谭欣诚等 报 道 张世民等 报 道 杨申海 报 道 两百例病人血清AFU活性(U/L) 正常对照 137 0 0 6.061.31 PHC 25 18 72.0 14.679.55 急性肝炎 45 6 13.3 6.872.93 慢性肝炎 69 7 10.1 6.232.74 肝硬化 45 5 11.1 6.512.91 其他消化系统肿瘤 16 1 12.5 6.752.58 组 别 例数 异常数 异常率 Xs 健康人与肝病患者血清AFP浓度AFU活力测定结果 组 别 n AFP(ug/L) AFU(nmol/ml.h AFU阳性率(%) 正常对照 114 10.22.1 21487 0 PHC 46 264124 884364 82 肝硬化 28 13.13.1 22694 5.6 急性肝炎 42 10.42.2 21489 0 慢性肝炎 38 11.22.4 22692 3.8 七例PHC患者术前、术后AFU活力测定结果 代 号 年龄 术前AFU活力(nmol/ml。h) 术后 AFU(nmol/ml.h 1 36 896 398 2 38 776 386 3 64 541 260 4 59 596 254 5 70 492 194 6 35 964 410 7 52 524 304 注意事项 1. 本法禁止使用肝素和橼酸盐血浆.可使用EDTA