11例急性巨核系白血病患者巨核细胞的超微结构分析(1)

1111 例急性巨核系白血病患者巨核细胞的例急性巨核系白血病患者巨核细胞的 超微结构分析超微结构分析(1)(1) 作者：茹永新，赵轼轩，刘津华，秘营昌，竺晓凡， 王慧君，王建祥 【摘要】为了研究急性巨核细胞白血病患者骨髓中幼 稚巨核细胞的超微结构特点，根据电子显微镜观察结果， 回顾性分析 11 例急性巨核白血病患者骨髓巨核细胞的形态 结构和血小板过氧化物酶（PPO）表达情况。结果表明：11 例中 7 例例巨核细胞直径在 20m 以内，其中 2 例细胞直 径 10-15m，PPO 阳性率 50%以上，大部分细胞外形规则， 大小均匀，表面突起少，核不规则，核质比大，胞浆颗粒 细小，分界膜发育不完全，管道排列无规律；5 例巨核细胞 直径 20m 左右，PPO 阳性率在 8%-22%之间，核呈圆形或 马蹄形，异染色质不等，其中 3 例无幼稚分界膜和致密颗 粒，2 例偶见。11 例中 5 例细胞直径在 20-40m 之间， PPO 阳性率 16%-80%，大细胞表面有不规则突起，核质比不 等，核不规则，异染色质多，核仁不明显，胞质有成熟分 界膜结构、管道系统和成熟 颗粒。结论：大部分患者 巨核细胞以期分化阶段为主，少数病例伴有少量、 期细胞；相同或不同患者骨髓中未成熟巨核细胞的发育程 度存在差异。 【关键词】急性巨核细胞白血病 UltrastructuralCharacteristicsofMegakaryocytesin11P atientswithAcuteMegakaryocyticLeukemia AbstractThepurposeofstudywastoinvestigatetheultrast ructuralfeaturesofleukemicmegakarocyteinpatientswit hacutemegakaryocyticleukemia.Analyzingtheultrastruc turecharacteristicsofLMKandpositiveratioofplateletp eroxidesin11patientswithM7wereanalyzedonbasisoftran smissionelectronmicroscopicobservationretrospective ly.TheresultsshowedthatthediameterofLMKin7outof11ca seswaslessthan20m,in2casesofthem,theLMKdiameterwa sfrom10to15mandtheirPPOpositiveratiowasmorethan50%, mostLMKdisplayedregularshape,lessprotrusions,irregu larnucleus,highnuclear/cytoplasmratio,tinygranules, undevelopeddemarcationmembranesystemandirregulartub ulesincytoplasm;in5outofthose7casesthediameterofLMK wasabout20m,PPOpositivecellcountwasfrom8%to22%,mo stshowinground or horseshoenuclei,more or lessheter ochromatin,noDMSandgranuleswerefoundinLMKin3casesan d2casesoccasionally.Inother5outof11cases,thediamete rofLMKwasfrom20to40mandPPOpositiveratiowasfrom16% to80%,inwhichsmallerLMKsweresimilartothoseinformerc asesinshape,andthelargerLMKhadirregularprotrusions, variednuclear/cytoplasmratio,moreheterochromatin,pr ominentnucleolus,someofthemcontaineddevelopedDMS,tu bulesandgranules.Itisconcludedthatmostpatientsw ithM7arepredominantofLMKinstageIandminoritycontai nedLMKinII or IIIstagesimultaneously.Thedifferentia tiondegreesofLMKaredifferentinindividualandvariousc ases. Keywordsultrastructure;acutemegakaryocyticleukemia; differentiation JExpHematolXX;15:720-723 急性巨核细胞白血病 1985 年被列入 FAB 分类 （AMLM7） ，占 AML 发病率的 5%-10%1 。国内临床和科 研人员用光学显微镜对白血病巨核细胞的形态进行了仔细 观察,发现在白血病过程中巨核细胞形态变异很大并且把细 胞多形性作为临床诊断 M7 的标准之一2 。事实上光学显 微镜只能识别高分化幼稚巨核细胞，难以全面反映恶性细 胞的超微结构和分化程度。本研究对 XX 至 XX 年之间本院 的 11 例 AMLM7 住院患者的骨髓未成熟巨核细胞进行回顾 性电子显微镜观察，结果报告如下。 病人一般情况 男 5 例，女 6 例，年龄在 1-53 岁之间，平均年龄 30 岁。9 例为初诊患者，2 例继发于慢性粒细胞白血病。临床 表现发热、乏力、出血、腹痛和腹胀，外周血检查以全血 细胞减少和贫血为主；病理检查显示 5 例患者继发骨髓纤 维化。所有患者经形态、病理、细胞组织化学、染色体、 细胞流式仪或免疫组织化学检查，确诊为 M7（表 1） 。 电子显微镜标本制备 常规透射电子显微镜和 PPO 组织化学标本制备按文献 3完成。部分骨髓有核细胞加入血小板过氧化物酶孵育 液（molLTris 缓冲液，pH；1ml 加 3,3二氨基联苯胺 2mg、3H2O220m） ，37避光振荡孵育 90 分钟；其它细 胞用戊二醛 4固定 2 小时，用于透射电镜观察。包埋、 超薄切片按常规进行，常规用铅铀染色，PPO 组织化学标本 不染色。 电子显微镜观察 先观察 PPO 标本，计数 PPO 阳性细胞占有核细胞的百 分比，测定阳性细胞直径。细胞大小用一个网眼内细胞最 大和最小直径表示，最大和最小直径大于 5m 为大小不均。 根据组织化学对比观察常规标本中巨核细胞结构，表面无 或偶见伪足和突起用“表示，“为 1/3 细胞以下有伪足， “为 1/3 到半数以内可见突起，“表示半数以上细胞有伪 足。核质比用同一网眼中巨核细胞核与胞体直径比表示。 同网眼中半数以上细胞核为圆形，刻痕和切迹深度小于最 长直径 1/8，为核轻度不规则，用“表示；折叠或切迹深度 大于最长直径 1/8 而小于 1/4，为中度不规则，用“表示； 细胞核扭曲、多极，大于最大直径 1/4，或长短直径比大于 2，为极度不规则，用“表示。细胞不含分界膜或管道结构 为“，1/3 以下细胞有为“，1/3 到 2/3 之间为 “，2/3 以上为“，致密颗粒多少评定方法相同。 结果 超微结构观察显示不仅不同患者幼稚巨核细胞数量和 细胞器结构分化发育差别显著，而且同一患者骨髓内巨核 细胞 PPO 阳性率和阳性强度也存在差别，部分细胞阳性明 显，部分为阴性或弱阳性（表 2） 。 所有病例骨髓内可见分化程度不同幼稚巨核细胞，成 熟巨核细胞少见，幼稚细胞形态不一，管道系统幼稚简单， 无明显分布规律，分界膜内无血小板，颗粒少或电子 密度低，11 例中 7 例患者巨核细胞体积小，直径在 20m 以内，外形规则，大小均匀，表面突起少，7 例中 2 例（病 例 1、4）细胞 PPO 阳性率在 50%以上，外观似淋巴细胞， 直径在 10-15m 之间，核轻度不规则，核质比大，异染色 质多，核仁小，多数细胞有细小颗粒，大部分无 颗粒， 其它细胞器少；少数细胞含典型 颗粒，分界膜细小、 狭窄，或呈囊腔样结构，散在分布，有时难以与未成熟高 尔基体鉴别，胞浆含粗细一致的管道结构，排列无规律 （图 1A，B，C） 。另外 5 例患者（病例 5、6、7、8、10） PPO 阳性率在 8%-22