医学课件肠杆菌科

第十章 肠杆菌科 (Enterobacteriaceae) 病原生物学教研室 ， 一大群寄居在人和动物肠道中生物学性 状近似的革兰阴性杆菌 44个属，170余种 肠杆菌科中与医学有关的常见菌属 埃希菌属 大肠埃希菌 志贺菌属 痢疾志贺菌 沙门菌属 伤寒沙门菌 耶尔森菌属 鼠疫耶尔森菌 枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌 克雷伯菌属 肺炎克氏菌 肠杆菌属 产气肠杆菌 哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌 沙雷菌属 粘质沙雷菌 变形杆菌属 普通变形杆菌 摩根菌属 摩氏摩根菌属 普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌 爱德华菌属 迟钝爱德华菌 菌属 代表种 第一节 埃 希 菌 属 (Escherichia) 肠道正常菌群成员 代表菌种：大肠埃希菌（E.coli） 条件致病菌肠道外化脓性感染 致病性大肠埃希菌胃肠炎（某些特殊血清型） 卫生学检测指标 一、生 物 学 性 状 1. 杆菌 周身鞭 毛 有菌毛 无芽胞 2、营养要求不高 普通琼脂平板：圆形凸起 灰白色S型菌落； 肠道鉴别培养基：有色菌落 (S培养基) 3.发酵葡萄糖、乳糖等多种糖类，产酸 产气 糖发酵管 未接种管 大肠杆菌 生长管 结果： 葡萄糖 + 乳糖 + 动力 + H2S - 双糖铁培养基 吲哚甲基红VP枸橼酸盐利用实验 IMViCIMViC试验结果为试验结果为“” 4.分型 (1)抗原构造:O、H和K三种抗原 (血清型O:K:H) (2)大肠菌素（colicine） 鞭毛抗原（H） 菌体抗原（O） K抗原 二、致 病 性 (一)致病物质 1.一般毒力因子：LPS、荚膜、型分泌系统 2.特殊毒力因子 黏附素（CFA、AAF、BfP、紧密黏附素、Ipa等 ） 外毒素（ST、LT、 Stx 、溶血素A等） 黏附素 (二)所致疾病 1.肠外感染:化脓性感染,内源性感染 大肠埃希菌败血症 新生儿大肠埃希菌性脑膜炎 泌尿道感染 UPEC(uropathogenic E.coli) 2.胃肠炎 : 外源性感染 表现为急性腹泻， 有五种类型： ETEC、EIEC、 EPEC、 EHEC、EAEC 引起胃肠炎的大肠埃希菌 肠产毒素性大肠埃希菌（ enterotoxigenic E.coli,ETEC） 5岁以下婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌 致病物质： 肠毒素（LT,ST） 定植因子 （colonization factor antigen,CFA- ） CFA抗原性强，其抗体可阻抑细菌的粘附，因此可制备抗原性强，其抗体可阻抑细菌的粘附，因此可制备CFACFA疫苗疫苗 加热6530分钟失活 不耐热肠毒素 （heat labile enterotoxin,LT） A亚单位毒素活性中心，激活肠黏膜细胞上 的腺苷酸环化酶，使ATP转化为 cAMP； 与霍乱弧菌肠毒素氨基酸有80%同源性 B亚单位 毒素结合中心，与小肠黏膜上皮 细胞上的GM1神经节苷脂受体结合， 引导 A 亚单位进入细胞内 LT化学 结构 与致病 机理 A1 B亚单位 A2 受体GM1 细胞膜 腺苷环化酶 ATP cAMP 分泌亢进 重吸收受阻 腹泻 腹泻 腹泻 耐 热 肠 毒 素 （heat stable enterotoxin,ST） 加热10020分钟不失活 与霍乱弧菌肠毒素无同源性 两型：STa、STb 鸟苷酸环化酶 cGMP 腹泻 腹泻腹泻 水电解质平衡率乱 STa化 学结构 与致病 机理 STa ETEC引起的水样腹泻 肠侵袭性大肠埃希菌 （enteroinvasive E.coli,EIEC） 侵犯较大的儿童和成人 本菌无动力，易与志贺菌混淆，应注意鉴别！ 致病机制：不产生肠毒素 质粒编码的侵袭蛋白作用 黏附并侵袭结肠上皮细胞 扩散临近细胞 临床表现类似菌痢 EIEC 肠致病性大肠埃希菌（ enteropathogenic E.coli,EPEC） 最早发现的引起腹泻的大肠埃希菌 主要侵犯婴幼儿 致病机制：不产生肠毒素和侵袭力 黏附素介导的对肠绒毛破坏 干扰肠道对液体的吸收功 能 肠出血性大肠埃希菌（ enterohemorrhagic E.coli,EHEC） 出血性结肠炎、溶血性尿毒综合征的病原体 志贺毒素(shiga toxins,stx) Stx A亚单位：(毒性部分)终止蛋白 质合成 B亚单位：(结合部分)糖脂受体 结合 肠绒毛结构破坏 吸收分泌 腹泻 肠毒性,细胞毒性 1977年首次提出大肠埃希菌可引起出血性腹泻 1983年命名为肠出血性大肠埃希菌（EHEC） 1982年美国首次分离O157：H7大肠埃希菌最具代 表性人类因食入消毒不完全的牛奶、牛肉等而感染 1999年至2000年在我国江苏、安徽、河南等省发生 了较大规模的暴发流行 1996年日本大坂地区暴发流行 目前O157感染已成为一个世界性的卫生问题，美 国、加拿大、日本、瑞典及我国等国家先后将其作为 法定报告传染病 新现传染病（emerging infectious disease） O157：H7大肠埃希菌 临床表现-1 出血性结肠炎 鲜血样便 腹部痉挛性疼痛 低烧或不发烧 临床表现-2 溶血性尿毒综合症 （hemolytic uremic syndrome，HUS） 血小板减少 溶血性贫血 急性肾功能衰竭 多数发生于儿童和老人急性腹泻数天或1-2周 后 血栓性血小板减少性紫癜 血小板减少 溶血性贫血 肾功能异常（血尿、蛋白尿等） 神经系统损害（头痛.轻度瘫痪.昏迷) 病死率高,主要发生在成年人，尤其老年人。 临床表现-3 新 进 展 1.志贺毒素(stx)用于治疗某些肿瘤 2.头孢菌素、喹诺酮类抗生素杀菌 同时也增加了Stx释放； 3.最新研究表明，罗红霉素可抑制 EHEC并抑制Stx释放 肠集聚性大肠埃希菌（ enteroaggregative E.coli,EAEC） 致病机制：质粒介导呈砖块状集聚黏附 于肠黏膜上皮细胞，阻止液体吸收 引起婴儿持续性腹泻，脱水 三、微 生 物 学 检 查 1.临床细菌检查 致病性大肠埃希菌需血清学试验鉴 定型别 2.卫生细菌学检查 以“大肠菌群数”作为饮水、食品 等粪便污染的指标之一 在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标 3个大肠菌群/1L饮水 5个大肠菌群/100ml果汁饮料 卫生学指标 大肠菌群指数 我国的卫生标准： 四、防 治 原 则 1.特异性预防:疫苗接种 2.非特异性预防 3.抗生素治疗:药敏试验 第二节 志 贺 菌 属 (Shigella) 通称痢疾杆菌（dysentery bacterium） 人类细菌性痢疾的主要病原菌 细菌性痢疾是一种常见病，流行于发展 中国家 一、生 物 学 性 状 1.G直杆菌 有菌毛 无鞭毛 动力- (痢疾杆菌) 动力+ (大肠杆菌 ) 2.2.葡萄糖葡萄糖 + + （产酸不产气）（产酸不产气） 乳乳 糖糖 - - （宋内氏迟缓发酵）（宋内氏迟缓发酵） 不产生H2S 葡萄糖发酵管乳糖发酵管 SS平板上呈 无色半透明菌落 SS培养基 未接种管 大肠杆菌 生长管 结果： 葡萄糖 + 乳糖 - 动力 - H2S - 痢疾杆菌 生长管 无动力为要点！ 双糖铁培养基 3.O抗原（分类依据）包括群和型特异性抗原 菌种 群 型 亚型 l痢疾志贺菌 A 110 8a、8b、8c l福氏志贺菌 B 16、 1a、1b、2a 、2b x，y变型 3a、3b、3c、4a、4b l鲍氏志贺菌 C 118 l宋内志贺菌 D 1 4.抵抗力弱 对热、酸敏感 粪便标本立即送检! 对抗生素敏感, 但易形成抗药性 污染物品及瓜果、蔬菜存活10-20天 二、致 病 性 1.侵袭力(与脓血粘液便有关） (一)致 病 物 质 2.内毒素（与菌痢症状有关） 破坏肠粘膜-脓血粘液便 肠壁植物神经系统-腹痛、里急后重 发热,中毒性休克 3.外毒素:志贺毒素 Sxt A群志贺菌型和型产生,介导肾小球内 皮细胞损伤,导致溶血性尿毒综合征(HUS) 痢疾杆菌的侵袭力 侵袭力和内毒素作用局部肠黏膜 导致肠黏膜上皮细胞损伤 肠壁形成溃疡 脓血粘液便 痢疾杆菌引起细菌性痢疾 (二)所致疾病 1.细菌性痢疾 -夏秋季节肠道传染 病 传染病流行三环节 传染源：病人和带菌者 传播途径：粪-口途径 易感者: 人类易感, 敏感性较高 2.临床类型 急性菌痢 慢性菌痢 急性中毒性菌痢（多见小儿） 无症状带菌者 中毒性痢疾病人 三、微 生 物 学 检 查 ？ (二)细菌学检查 (三)快速诊断法 免疫荧光菌球法、协同凝集试验、分子生物学方 法 （一）标本采送 1.服药前取脓、血或粘液样粪便 2.粪便应新鲜, 及时送检 3.中毒性菌痢者可取肛拭 四、防 治 原 则 (二)特异性预防 口服减毒活疫苗(SIgA) 减毒突变株;杂交株;营养缺陷减毒株 (一)非特异性预防 食品和水卫生学监测 (三)治疗 早诊断、早隔离、早治疗 第 三 节 沙 门 菌 属 （Salmonella） 李 秀 真 微生物学教研室 近2500种血清型 对人致病 伤寒沙门菌 副伤寒沙门菌 肠热症 （甲型、肖氏、希氏） 对动物致病鼠伤寒沙门菌 猪霍乱沙门菌 食物中毒 肠炎沙门菌 败血症 一、生物学性状 形态染色 革兰阴性直杆菌 周身鞭毛 有菌毛 无芽胞 无荚膜 动力实验 生化反应与培养 SS琼脂培养基 形成乳糖不发酵菌落 产硫化氢菌株 可形成中心黑色菌落。 双糖铁培养基， 葡萄糖 + 乳糖-,动力+， 硫化氢+/-; 除伤寒杆菌 对葡萄糖不产气外 均产酸产气 (与大肠埃希菌 志贺菌区别) 尿素酶试验(-) 与变形杆菌区别 变形杆菌(左) 沙门菌(右) 生化反应对沙门菌种的鉴定有重要意义 O抗原菌体抗原,58种, 分为A-Z，O51-O63，O65-O6742组(A-E组;IgM) H抗原鞭毛抗原 相(特异性高,a,b,c.) 相(特异性差,1,2,3.) (IgG) Vi抗原-毒力抗原,阻止O凝集(Vi抗体) 抗原构造 抵抗力 较差 对胆盐、煌绿耐受力较其他肠道菌强 水中具生命力 二、致病性与免疫性 （一）致 病 物 质 1、侵袭力：侵袭小肠末端的M细胞，突 破M细胞进入其下的吞噬细胞，被吞噬 并在其中繁殖，为不完全吞噬，可扩散 。 2、内毒素：发热、休克等。 3、肠毒素：与食物中毒有关。 （二）所 致 疾 病 1、肠热症 侵袭力 多毒力因子 沙门菌 穿入固有层和集合淋巴结-M吞噬-胞内菌-入 血 | 淋巴液 胸导 管 |- | 肠系膜淋巴结- M吞噬- 胞内菌繁殖- - 菌入 肝胆 吞噬 菌血症(前驱症状)- 骨髓 -菌血症（高热、肝脾肿大、玫瑰疹等 ）- 1w 脾肾 繁殖. 2-3w 菌入-肾-随尿排出（菌尿具传染性） -| 4w后 | 随粪便排出（粪便具传染性）-恢复期带 菌者 -胆囊-通过胆汁入肠道-| 致敏组织超敏反应-肠出血或肠穿孔(并发 症） 特点： （1）两次菌血症 （2）以全身中毒症状为主 （3）发病2-3周，病菌从粪便和尿中 排出 （4）1%-5%患者转变为无症状带菌 者，胆囊储菌（重要传染源） 2、食物中毒 3、败血症 4、无症状带菌者 伤 寒 玛 丽 （三）免 疫 性 标本采集、分离培养鉴定 肠热症按不同病程取标本 (血液、骨髓液、尿液、粪便） 食物中毒取粪便、呕吐物、残余食物 败血症取血液 三 微 生 物 学 检 查 血液、骨髓 增菌培养 （胆汁葡萄糖肉汤） 35 24-48h 粪、尿、残余食物等 增菌培养 （GN肉汤） 分离培养 （血平板、 SS） 35 18-24h 挑取可