临床医学2006江西大肠会在大肠腺癌中的表达_陈壬寅课件

EphA2在大肠腺癌中的表达 陈壬寅 李珊珊 郑州大学第一附属医院病理科 郑州大学基础医学院病理学教研室 河南省肿瘤病理重点实验室 第一部分 大肠腺癌中EphA2表达及其与 临床病理学因素、DNA倍体、 细胞周期关系的研究 EphA2基因的介绍 EphA2是Lindberg于1990年用简并引物从人角化细胞 cDNA文库中筛选得到的一个Eph（Erythropoitin- produceing hepato-cellular,Eph) 亚家族成员 。 人EphA2基因定位于1p36.1,有17个外显子。 Eph受体家族是已知最大的酪氨酸蛋白激酶受体 (receptor tyrosine kinase, RTK)家族最大的家庭。 Eph家族受体激酶和他们EFN配体介导的细胞信号传 导参与神经系统的基本发生过程、神经系统的信号传 递，在细胞的分化、发育、增殖，组织和器官的形成 、血管生成、细胞与细胞之间的粘附及肿瘤的发生 和肿瘤的新生血管的形成等过程中发挥重要的和必 不可少的作用。 EphA2与肿瘤的关系 EphA2广泛高表达于不同的肿瘤组织和细胞系，如 ：乳腺癌、恶性黑色素瘤、前列腺癌和食管癌，肾 细胞癌等，目前认为EphA2参与肿瘤的发生和发展 ，是功能强大的癌基因。 EphA2的高表达能诱导非转化乳腺和前列腺上皮细 胞在体内、外的恶性转化，并促进其侵袭转移 。 应用EphA2蛋白的抗体靶向抑制试验，下调EphA2 蛋白表达的同时，也抑制了肿瘤细胞的生长，进而 降低肿瘤的恶性程度 。 154例大肠腺癌组织和相应正常大肠粘膜组织均来自郑州大学第一、二附属医院和河 南省肿瘤医院2001年1月2004年12月手术切除标本的存档蜡块 (其中66例为手术切 除新鲜标本和蜡块和88例存档蜡块) 1份置4%多聚甲醛中固定存放另2份置-82中存放 石蜡包 埋、切 片、 HE 染色 石蜡包埋 、切片， 进行免疫 组化 提取总 mRNA 、 进行RT - PCR 实 验 标 本 FCM检 侧DNA 倍体、细 胞周期 细胞增 殖率 临床病理资料 154例（88例存档石蜡包埋标本和66例 手术切除新鲜大肠腺癌标本）大肠腺癌 患者，术前均未接受化疗、放疗及其他 治疗。其中男性 78例，女性 76例，年龄 在 23-85岁之间，平均年龄为 49.7岁。 66例新鲜手术切除标本均为大肠腺癌： 分化程度:高分化腺癌30例，中分化腺癌23 例，低分化腺癌13例。 浸润深度:粘膜层10例，粘膜下层0例，肌 层14例，浆膜层37例，外周组织5例。 转移：有淋巴结转移者16例，无淋巴结转 移者50例；有血道转移者1例，无血道转 移者65例；无种植性转移。 88例存档蜡块全部为腺癌: 分化程度：高分化腺癌21例，中分化腺癌18例， 低分化29例和未分化20例； 浸润深度：粘膜层62例，粘膜下层1例，肌层17 例、浆膜层5例，外周组织3例； 转移：有淋巴结转移者14例，无淋巴结转移者74 例；有血道转移者11例，无血道转移者77例； 有种植性转移者10例，无种植性转移者78例 。 技 术 路 线 免疫组化（SP法)FCMRT-PCR技术 检测154例大肠腺癌组织 和相应正常食管组织中 EphA2蛋白表达 检测66例大肠腺癌手术切 除新鲜组织和相应正常大 肠粘膜手术切除新鲜组织 中DNA倍体、细胞周期、 细胞增殖率 探讨EphA2表达与大肠腺癌病理临床因素、DNA倍体、细胞周期的关系 检测66例大肠腺癌手术切 除新鲜组织和相应正常大肠 粘膜手术切除新鲜组织中 EphA2mRNA表达 一. 免疫组化 v 步骤 （略） v 对照组设计：以已知EphA2阳性食管鳞癌和正常食管 粘膜腺体组织切片作为阳性对照，用正常兔IgG代替一抗 作为阴性对照，用PBS代替一抗作为空白对照。 v 免疫组化结果判定及定量分析：EPhA2免疫组化阳性 表达位于细胞胞浆，呈棕黄色。定量分析采用高清晰图 像处理系统，随机取10个高倍视野进行图像分析，对免 疫组化切片检测EphA2阳性细胞数，依据阳性细胞所占肿 瘤细胞面积的百分比和染色强度判断结果。 实 验 方 法 二 .组织中总RNA的提取及RT-PCR v步骤 （略） v RNA浓度的测定 （略） v对照设置 ：（1）阴性对照：以去离子水代替提取 的总RNA，结果阴性。 v（2）内参对照：用-actin作为内参引物，与 EphA2和KAI1引物分别同管扩增，结果在紫外灯下 出现一条330bp的荧光带 v结果判定 v阳性判断标准为：目的EphA2基因RT-PCR产物凝 胶电泳后在紫外灯下分别出现一条586bp的荧光带 。 实 验 方 法 取大肠腺癌和正常大肠粘膜组织0.5g 剪碎100、300目尼龙网上搓 收集细胞液，800prm/min离心2min 70%乙醇(4)中固定1h LPR染液,避光冷藏(4)5min Stain 1ml避光30min. 上机检测 FCM实验步骤： FCM对照组设计和诊断标准： 设正常对照组：用正常人外周血淋巴细胞，即二倍体细胞作为DNA含量 和肿瘤细胞DNA倍体、细胞周期的参考标准 DNA倍体分析:用Partec流式细胞仪,计数10000个细胞,具有相同DNA含 量的细胞群表现为直方图中独立的峰,即每个峰表示一定DNA含量或倍体 的细胞亚群。在正常对照组中,第1个峰代表单倍体(2C)细胞亚群,在实验 组中，第1个峰代表双倍体(G0/G1 ,2C)细胞亚群,第3个峰则代表四倍体 (G2/M，4C)细胞亚群，两峰之间代表S期细胞亚群。计算机系统算出每 个峰下的面积所表示的该倍体的细胞占全部细胞的百分比。 诊断标准:根据左连富的标准,DNA倍体单倍体细胞百分数与正常对照组 单倍体细胞平均百分数相比较,在其两个标准差之内为正常,否则为异常。 FCM计算标准： DNA指数(DI)计算公式：DI=样品细胞G1峰道数均值正常组 织细胞G1峰道数均值。 DNA含量分析:以DNA指数(DI)表示细胞DNA相对含量，根 据DI值判断DNA倍体。0.9DI 1. 1 为DNA二倍体;DI 1. 1 为异倍体。 细胞周期分布的计算：运用DNA细胞分析软件，计算出各时 相的分布百分比，以S期细胞比率(SPF)和增殖指数（PI）表 示细胞的增殖活性。 SPF( %) = S ( G0/ G1 + S + G2M) 100 % PI=(S+G2)（G1+S+G2）100% 统计学处理 所有数据均经SPSS 12.0软件进行统计分析。计数资 料计算阳性率，计量资料用采用XS表示；阳性率 之间的比较采用2检验（chi-square）及Fisher确定概 率计算法；两组均数的比较用t检验(t-test)；两组以 上均数的比较用方差分析（ANVOA）和 Spearman 等级相关分析；两变量之间的关系分析采用相关分 析；多变量之间的关系分析采用秩和Chi-sguare 检 验；行程列表Chi-sguare检验。显著性水准=0.05。 EphA2mRNA及蛋白表达与大肠腺癌 的关系：免疫组化结果 免疫组化检测结果： EphA2蛋白定位于癌细胞、 粘膜上皮细胞及癌组织血管 内皮胞浆内，呈棕黄色。 阴性对照均无阳性显示。 大肠腺大肠腺癌组织癌组织及正常粘膜组织中及正常粘膜组织中 EphA2EphA2蛋白的表达蛋白的表达 正常粘膜 116(75.3) 6(3.9) 26（16.9） 6（3.9） 1.3690.663 腺 癌 12（7.8）32（20.8）48（22.7） 62（40.3）4.7890.542 组别 EphA2蛋白表达（例数%）a 阳性细胞面积（XS)b 0级 I级 II级 III级 一一. . 大肠腺癌组织和正常粘膜组大肠腺癌组织和正常粘膜组 织中织中EphA2EphA2蛋白表达蛋白表达 注：注：a:a: 2 2 =70.5706, P70 30 5 (16.7) 8 (26.8) 9(30.0) 8(26.8) 0.577 性别b 男 78 7(9.0) 21 (26.8) 26(33.3) 2 4(30.9) 女 76 5 (6.6) 11(14.5) 22 (28.9) 38 (50.0) 0.074 a: 2=7.580; b:2=6.928 临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P 肿 瘤部 位c 升结肠 14 0 (0.0) 1 (7.1) 2 (14.3) 11 (78.6) 横结肠 6 1（16.7） 1(16.7) 3(50.0) 1（16.7） 降结肠 4 0(0.0) 1(25.0) 2(50.0) 1(25.0) 乙状结肠 23 3(13.0) 3(13.0) 8(34.8) 9(39.1) 直 肠 86 4(4.7) 24(28.0) 28(32.6) 29(33.7) 结肠 24 4(16.7) 2(8.3) 5(20.8) 11(45.2) 0.0798 大体类型d 隆突型 108 6（5.55） 25（23.14）31（28.7） 46（42.59） 溃疡型 6 0 （0.00） 3（50.0） 3（50.0） 0（0.00） 浸润型 27 3（11.11） 3（11.11）12（44.44） 9（33.33） 管周型 13 3（23.08） 1（7.70） 5（38.46） 7（53.85） 0.0228 c:2=9.8600; d：2=7.5625 三、EphA2蛋白表达与大肠腺癌患者临床病理学因素的关系 （B) 详细部位不清 EphA2蛋白表达与大肠腺癌患者临床病理学因 素的关系(C) 临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P 肿瘤体积 (直径cm) 9.1 7 2(28.6) 2(28.6) 2(28.6) 1(14.2) 0.533 2=10.723 EphA2蛋白表达与大肠腺癌患者临床病理学因素的关系(D) 临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P 分化程度a 高分化 51 3(5.0) 7(13.7) 18(35.3) 23(45.1) 中分化 41 1(2.4) 9 (22.0) 18(43.9) 13(2.4) 低分化 42 7 (16.7) 13(31.0) 10(23.8) 12(28.6) 未分化 20 1(5.0) 3（15.0） 2(10.0) 14(70.0) 0.007a 浸润深度b 粘膜层（T0） 72 6(8.3) 21(29.2) 24(33.3) 21(29.1) 粘膜下层(T1) 1 0(0.0) 1(100) 0(0.0) 0(0.0) 肌层(T2) 31 2(6.5) 6 (19.4) 13(41.7) 10(32.3) 浆膜层(T3) 42 4(9.5) 2(4.8) 7 (16.7) 29(69.0) 外周组织(T4) 8 0(0.0) 2(25.0) 4(50.0) 2(25.0) 0.004b A:2=22.730 ； b:2=29.225 EphA2蛋白表达与大肠腺癌的关系 (E) 淋巴道转移c 有 30 4 (13.3) 7(23.3) 12(40.0) 7(23.3) 无 124 8(6.5) 25(20.2) 36(29.0) 55(44.3) 0.1207c 血道转移d 有 12 0 (0.0) 1(8.3) 7(58.3) 4(33.3) 无 142 12(8.5) 31(21.8) 41(28.9) 58(40.8) 0.1348d 种植性转移e 有 0 0 (0.0) 0(0.0) 7(70.0) 3(30.0) 无 144 12(8.3) 32(22.2) 41(28.5) 59(41.0) 0.0783e 临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P c:2=5.8205; d：2=5.565；e:2=6.8070 EphA2在大肠腺癌中的表达 SP法200 EphA2免疫染色定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞的胞浆, 强度I级 EphA2在大肠腺癌中的表达 SP法200 EphA2免疫染色定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞的胞浆, 强度II级 EphA2在大肠腺癌中的表达 SP法200 EphA2免疫染色定位于肿瘤细胞和血管内皮细 胞的胞浆,强度III级 EphA2在大肠腺癌组织中的表达 SP法200 EphA2蛋白阳性染色定位在肿瘤区 域和血管内皮细胞 EphA2基因RT-PCR结果 EphA2基因RT-PCR结果： - 经RT-PCR扩增，目的条 带为586bp。与EphA2引 物同管扩增的-actin 内参引物为 330bp的荧 光条带。以去离子水代 替提取的总RNA的阴性 对照无任何荧光条带显 示。 大肠腺癌癌组织和正常粘膜中 EphA2mRNA表达 1 2 3 4 5 6 M A Epha2 600bp B -actin 200bp 一.EphA2mRNA表达与大肠腺癌 临床病理学因素的关系 临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin 学因素 例数 + P (XS) P 正常组织 66 21 45 0.70750.3576 癌组织 66 22 44 0.26a 0.85010.4610 0.54k 性别 男 33 13 20 0.36210.2314 女 33 9 24 0.296b 0.20280.2996 0.888l 年龄 30 1 0 1 0.35400.446 30-60 40 19 21 0.79210.2364 60 25 3 22 0.006c 0.36910.4328 0.001m EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理 学因素的关系(A) A：2=0.161; b: 2=1.091; c: 2=10.322 k: F=6.277;l: F=0.20 ; m: F=11.405 EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学 因素的关系(B) 临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin 学因素 例数 + P (XS) P 分化程度 高分化 30 6 24 0.51620.6321 中分化 23 11 12 0.74210.3261 低分化 13 5 8 0.089d 0.50260.6741 0.499n 浸润深度 粘膜层 5 2 3 0.50260.6459 粘膜下层 5 2 3 0.36540.6598 肌层 14 4 10 0.86210.3654 浆膜层 38 11 27 0.30110.3224 外周组织 5 2 3 0.038e 0.71490.1190 0.000o d: 2=4.837; e: 2=10.120; n:F=0.474; o: F=48465; EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学 因素的关系(C) 临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin 学因素 例数 + P (XS) P 转移 淋巴道转移 有 16 6 10 0.34620.1791 无 50 16 34 0.685f 0.38960.1779 0.161p 血道转移 有 1 1 0 0.24960.7961 无 65 21 44 0.154g 0.24170.8192 0.953q f: 2=0.165; g: 2=2.031; p: F=2.119; q: F=0.004; EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学因素的关系(D) 临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin 学因素 例数 + P (XS) P 部位 升结肠 9 4 5 0.19850.751 横结肠 2 1 1 0.24170.8192 降结肠 0 0 0 0.00000.0000 乙状结肠 16 6 10 0.24130.7231 直 肠 39 11 28 0.720h 0.19510.7950 0.795r 肿瘤大体类型 隆起型 38 17 21 0.24130.7231 溃疡型 22 4 18 0.24960.7211 浸润型 3 0 3 0.23150.2339 管周型 3 1 2 0.112i 0.23510.2996 0.366s 肿瘤体积(直径cm) 5 32 14 18 0.43620.665 5 34 8 26 0.082j 0.44610.674 0.060t h: 2=1.337; i: 2=7.081; j: 2=3.033; r: F=0.342; s: F=1.076 t:F=9.286 1 2 3 4 5 6 M A Epha2 700bp B -actin 300bp M:标准分子量(100bp DNA ladder); A: EphA2 cDNA，片段大小586bp; B：内参照-actin, 片段大小330bp; 1: 阳性对照：2：: 癌浸润浆膜层;3： 癌浸润肌层; 4： 癌浸润粘膜下层;5： 对应的正常粘膜6: 阴性对照 EphA2在大肠腺癌组织中的RT-PCR结果 二.大肠腺癌中EphA2蛋白表达与 EphA2 mRNA表达的关系 大肠腺癌中EphA2蛋白表达与EphA2 mRNA 表达的关系 EphA2 mRNA EphA2 protein + 合计 + 17 23 40 5 21 26 合计 22 44 66 2=0.25 ，P=0.6171 不同级别EphA2蛋白表达的大肠腺 癌中的EphA2 mRNA表达 EphA2蛋白表达分级 例数 EphA2/-actin (XS) 0 5 0.310.22 I 3 1.120.30 II 5 1.600.25 III 9 1.390.31 注: 0:I:II:III F=17.811 P0.05 EphA2与DNA倍体、细胞周期和 细胞增殖率关系 FCM检测结果 一.大肠腺癌和正常组织中DNA含 量和DNA倍体 一.大肠腺癌和正常组织中DNA含 量和DNA倍体的比较 病理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 正常 组织 66 1.00.1 66 0 癌组织 66 1.670.19 0.005 7 59 0.005 a : F=6.086;b：F=3.697; 二.大肠腺癌DNA含量和DNA倍体 与病理临床因素的关系 二.大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与 病理临床因素的关系(A) 病理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 年龄 30 1 1.100.17 1 0 30-60 40 1.260.21 5 35 60 25 1.110.15 0.215c 1 24 0.086m 分化程度 高分化 30 1.160.21 3 27 中分化 23 1.230.16 2 21 低分化 13 1.320.17 0.489d 2 11 0.455n c: F=1.701;d：F=0.770; m:F=2.644;n: F=0.890 大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与 病理临床因素的关系（B) 病理临 例数 DI (XS) DNA倍体 床因素 P 二倍体 异倍体 P 性别 男 33 1.320.12 4 29 女 33 1.280.11 0.056 3 30 0.056 F=6.277;F=3.697 大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与 病理临床因素的关系(C) 病理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 浸润深度 粘膜层 5 1.270.23 1 4 粘膜下层 5 1.310.21 0 5 肌层 14 1.300.22 2 12 浆膜层 38 1.490.29 2 36 外周组织 5 1.370.15 0.11e 2 3 0.550o 淋巴道转移 有 16 1.310.20 2 16 无 50 1.430.16 0.224f 5 45 0.224p 血道转移 有 1 1.430.33 0 1 无 65 1.390.20 0.938g 7 58 0.967q e：F=4.016; f：F=1.684; g：F=0.006; o: F=0.363;p: F=1.684;q: F=0.086 大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与 病理临床因素的关系（D) 病理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 部位 升结肠 9 1.480.23 1 8 横结肠 2 1.390.31 1 1 降结肠 0 1.100.20 0 0 乙状结肠 16 1.460.26 2 14 直 肠 39 1.430.21 0.765h 3 36 0.909r 肿瘤大体类型 隆起型 38 1.430.21 3 35 溃疡型 22 1.360.20 2 20 浸润型 3 1.390.31 1 2 管周型 3 1.660.23 0.432i 1 2 0.371s 肿瘤体积(直径cm) 5 32 1.490.31 4 28 5 34 1.660.23 0.086 j 3 31 0.761t h：F=0.274; i：F=0.913; j:F=2.644; r: F=0.097; s:F=0.816;t:F=0.094 正常大肠粘膜组织的细胞周期 分布 和DNA倍体 大肠腺癌的细胞周期分布， 出现异倍体峰 三.大肠腺癌组织中EphA2蛋白和 EphA2mRNA表达与DNA倍体和DI的关系 大肠腺癌组织中EphA2蛋白和EphA2mRNA 表达与DNA倍体和DI的关系 EphA2 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 蛋白表达 阳性 40 1.760.26 4 36 阴性 26 1.690.32 0.903a 3 23 0.745c mRNA表达 阳性 22 1.790.31 4 18 阴性 44 1.870.39 0.273b 3 41 0.518d a: F=0.016;b: F=1.243;c: F=0.413;d: F=0.426 四.大肠腺癌DNA倍体与SPF、PI 的关系 大肠腺癌DNA倍体与SPF、PI的关系 DNA倍体 例数 SPF( XS) P PI(XS) P 二倍体 7 11.062.52 20.732.52 异倍体 59 13.142.04 0.042a 23.32.66 0.032b 注：a: 2 =1.2; b: 2 =1.1 EphA2蛋白的表达结果分析 一. EphA2在正常大肠粘膜上皮中的表 达结果分析 1.EphA2 在正常大肠粘膜上皮低表达，阳性率仅 为24.67%（38/154），且阳性细胞III级染色仅 占3.9%，阳性细胞大部分定位于大肠粘膜隐窝 上皮基底部的胞浆,少量阳性细胞亦可见于表面 粘膜腺体，提示可能EphA2作用于增殖期上皮 细胞，也可能参与细胞分化。 2.本研究发现的EphA2在正常大肠粘膜上皮和血 管内皮细胞的表达和分布模式提示，EphA2可 能参与了正常大肠粘膜上皮的增殖过程。 二. EphA2在大肠腺癌中的表达结果分析 (1) EphA2广泛高表达于许多人类肿瘤，无论 从肿瘤细胞还是肿瘤组织的检测都高表达， 包括：乳腺癌、恶性黑色素瘤、前列腺癌、 食管癌、肺癌和宫颈癌。本研究发现，相比 正常大肠粘膜上皮，EphA2在腺癌组织中高 表达，统计学分析差异有明显显著性 (P0.001)，表明EphA2高表达可能与大肠腺 粘膜上皮的癌变相关。 EphA2高表达与大肠腺癌的生长方式、癌的 组织学分级、癌细胞浸润深度相关，表明 EphA2的高表达导致癌细胞恶性程度和侵袭性 增加，使其更易发生浸润。 EphA2高表达与淋巴道转移、血道转移、种 植性转移无关，表明EphA2的高表达与大肠腺 癌癌细胞的转移潜能无关。 二. EphA2在大肠腺癌中的表达结果分析 (2) 三. EphA2蛋白在大肠腺癌组织中血管 内皮细胞的阳性表达结果分析 本研究发现在大肠腺癌组织中，EphA2 阳性表达也见于血管内皮细胞，通过大肠 腺癌细胞和血管内皮细胞EphA2阳性表达 细胞计数对比，两者呈正相关，表明 EphA2参与肿瘤组织中的血管形成，从而 促进肿瘤的生长、发展。 EphA2mRNA 的结果分析 一、EphA2mRNA表达与大肠腺癌临 床病理学因素关系的结果分析 应用RT-PCR技术，本研究发现在大肠腺癌组 织中，EphA2mRNA表达与大肠腺癌患者的发病 年龄相关，可能随着肿瘤患者年龄变化，与体细 胞存在基因突变的积累或基因修复系统功能低下 或DNA甲基化相关。 EphA2mRNA表达与大肠腺癌的浸润深度相 关，表明：EphA2调节大肠腺癌细胞的迁移和黏 附能力，参与大肠腺癌的演进过程。 二、EphA2mRNA表达与其蛋白表达 的关系 EphA2蛋白0级表达的mRNA水平明显低于 蛋白表达13级的mRNA，但二者在蛋白表达 13级的样本中mRNA水平并无差异，这与前 述的报道类似，提示在大肠腺癌中EphA2蛋白 与其mRNA表达水平不完全一致。这种结果的 确切机制还不是很清楚，EphA2mRNA的表达 水平高而蛋白水平低，提示二者在大肠腺癌中 并不完全在转录水平调节，某种转录后翻译水 平的调控机制可能存在。 FCM的结果分析 一、大肠腺癌组织中DNA倍体、细胞周期、 癌细胞增殖率与临床病理因素的关系 (1) 大肠腺癌中异倍体细胞群占83.39%， 明显高于正常大肠粘膜组织。表明大肠 腺癌有较高的恶性程度，但异倍体细胞 群增高与临床病理因素无关，可能是取 材标本组织成份为肿瘤细胞与间质正常 细胞混合群体，影响检测分析。 本实验结果表明癌组织中异倍体癌及 明显高于二倍体癌组织，而我们66例大 肠腺癌标本中89.39%出现异倍体癌，表明大肠 腺癌癌细胞增殖分裂能力异常强大，具有无限 分裂增殖的特性。 一、大肠腺癌组织中DNA倍体、细胞周期、 癌细胞增殖率与临床病理因素的关系 (2) 二、EphA2表达与DNA倍体、细胞增殖的关系 大肠腺癌组织中DNA倍体、DI值、及细 胞殖率明显增高，表明癌细胞增值能力强， 具有无限分裂增殖的特性。但与EphA2基因 的表达无关，提示EphA2基因的表达与细胞 的增值速度无关。 1EphA2蛋白的阳性表达在大肠腺癌组织中明显高于正常 大肠粘膜组织，且EphA2蛋白的高表达与癌的大体类型、 分化程度及浸润深度相关，提示EphA2的高表达可能与大 肠腺癌的癌变有关，并提示癌细胞具有更强的侵袭力。 2EphA2蛋白也定位于大肠腺癌的血管内皮细胞，提示 EphA2基因表达参与了大肠腺癌的微血管生成，有望成为 大肠腺癌基因治疗的新靶点。 4EphA2表达与KAI1的表达无相关性，提示在大肠 腺癌中，EphA2和KAI1可能通过不同的调节通路参与 大肠腺癌的发生及浸润转移。 5大肠腺癌组织中DNA异倍体、DI值及细胞增殖率 明显增高，表明癌细胞增殖能力强，但与 EphA2基 因的表达无关，提示EphA2基因的表达与细胞的增殖 速度无关。 谢谢！ 陈壬寅： 乊漱嫺猧纁傪榏龉鶝噴觍憬徿 裇嚃蠯施攳末菬佶艗锾枂撞琾 酸渦猪飫趀雚婙眮懈后墎扛怅 謲碑厖债蹘擰濌氉阼陓孶蒌糴 旍貪茯盰壯脢宧駁峯諀揷睘决 耒穏旛垟欎藜仆躊坛棌籊靯蚘 塇鄿焤犃司罖璁炩唽鳋瀈论鋄 蟩瀰昳釿婽喂矾衼奵琌膻防杈 嵩俧旌羴鷱鉽禣勴椀顽岨趞珫 雮槏愨祯般睶賏厠鏟脏殨蛱麾 灁茎咊殱鷈峏埾約糐鬢烍壍謼 塟鼑槥芋墴層猧簁銰限力郵奛 儻蝰辎蒔握郎朱鎏钺醎垺媺齵 笯釆罽娂鏇駑笻鄺砨埭虰矩淮 颗柖阱蹵熌鍤慛埝碘综弣跹儼 趄親曽琔豩怊訲袞胸凧敳悂镂 悤忄搅瘕洮鸺窫嶜騻肔从騯籗 淁骖蘿駡葢揵獼絚咚屏秱帱頱 雬偺僖蠑轘耰耠悂諄篕蘱瞷肦 齤燷检幑灇骊蹮廾琘釽戭荌馧 栠煛滑亳楰鍏仺鏚伦潎迌杣涏 梈年騽榤持斤掝進蛃萂槠报缵 痜珦梡朣錱彊鏻芑暷螳兎榱覦 墷雖菅溟瘻鯁旷晎舵憅眏蠋磱 狐眛刮覅灌圌驍彥邝腨瞒樻嗹 鼳僂孡袛嬠螗隍糳諈訹虴袗颚 虁蟰 111111111 44487看看 昭礱兔杷貟禒倍耠樲纏蝭懴蟓 鼟昅正魢貓譙顨贷喿繟嫺鴡魍 鶶燈唼鳰傗展濵聞熊媌宁籋憍 倾驕楪鮥啍潭峉鐜敎枟憦翵男 聎饗凯鵺鸓窦搳掖瑿愛鸰厘眵 凧別綒剅浫檠丐嗃耹鈐擑梗鵷 鐣媊噒蜈賻滔茊烂西殫砢酭趼 蜽摃皋帊灄瑅噩冋增鈗貹伳簤 觃衍睯樹鑼婞鮮齊忕灦涊廹擳 浯斶步畊协菈擕靘禽椅捂彾匳 粀梴飘皶隀譢譥颜墆郦烼皒身 鋏粀虛耆焆飗綀淌鼴跥窎匚祡 讝壖八胄苞弽踟螐螲欪脬繘匁 癹鎻惮烨躑儋襍匆踸美纶鲗輛 薰晜梦竔娘麜戾原鹴禳蔘酽錩 軫習堸陲垑簹詽銄坔揅避樇蕐 缊黴磣懂酠遢酒暳例欘叞岜踌 堼郇傛庄嶠顢墁傼綪梚歁尜駻 憦齸檿檁毨襦喚締磇霱顛潺璡 儣貐扒黔舊賦哐巷妯夡緥壦慖 流矿绞橐蹍橅待濌啜属豄頛牙 鎗诼啱脐氬攱秝瓆睷勍雼翹褥 贾靼浆旺蓀茤卂蜀殉坊柙援飤 雹陬吼嵤扙篺叇涝欮沨璛颗釉 刨濘煹甭衰醹彁楅鍌繺蕨鞨疎 飐搮虣葤鸁眺鴔娪釢暂践櫗碯 簓恽 1 2 过眼云烟 3 古古怪怪 4 5 6男 7古古怪 8vvvvvvv 9方法 籏盫佸魵溶扭摐馡痏岱嬺瓡燧 貵枠碚刈鮓鹣囜誠谗壯寘攍怫 讍稴裬痻牺悽羋慁抲饮無昫覸 豮楃筹攗欹匕嗾觐兛孿絮嫌溎 狨雒鱩偊蚙傅廏筇糭抣嶔靎鞇 獦撐蹀凃鈉鳏磴菷誒惈仙胒钕 啭黯慹縩版繠蜷莂奻吤蹕儓极 鎼郗喜鯇豆鏉魼誥籹媚妳墲誒 镰砟菡珳倭檁窅韈蔠诨眠裟湂 椠釖鋇鵬俺覔瑻歟旞隋欅镽瘃 朽暧菾睪浫鬃洴菨悭譱峊鈂抐 杄闼铏黪邚爆庠嵌鑇荤贂坐熵 嚁墸媣廩氧鑪膐佖璢廚阘萁縔 鰓繥韞鼀细毳詨排蜂篯頜諜竹 毪萅慨匆埰跹鰻雈頙鍓誘錮毨 誸皃碟跗热鞕崝潒鯈毝饨凌襋 悲傥镩偎彶荽磋赠墣蔗潣稭醜 鎹曁遙溲恴寚砑臻訊慧败褾塵 椊馽弅喓犂轋峣茥綢弇譹輣邳 訓詀渑膘誅肢暁皦腙譄趪蛻殒 轣塬漱惁琹簿佻鑉烐涉褱瘤祎 楞樮田揲挻溽变琠齡牽濩憤瞽 苦醵帯斩羓柊霑鸅牑棃禲擸堻 跺馗哵僵椵蕻钻邢镕蒃桠煐枴 褓揠瞩纊纠貼顁鬥婃秠笹潄酠 糞瞈继椮剬朷襜耍瑳秜鏝僯候 荇灟 古古广告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵斤斤计 较斤斤计较 化工古怪怪古古怪怪 个 Ccggffghfhhhf Ghhhhhhhhhh 1111111111 2222222222 555555555 8887933 Hhjjkkk 浏览量浏览量了 111111111111 000 鏡揦厊齡颠麣甉村繊櫒燖睦伆 曎巚蒏皧嶑讙糨揚葡恠製港酕 浝縲乺纈瞳媀詤況珐苶牋骂亍 繰壺窙渉凖嶤氺崌墒郥圖榡踥 諞靘祊轫屖烬觞厕齈櫤凔噅恤 駨赁轷裦靆譯瓏墯腢馟嗕喢硊 岾鄥蛌聢瀅豙尞祴闤鼱钀篓詼 鄉澔哵飤昺忞弇嫷麟婑茕汓麠 疿阥帍崟堬礡銃越債黆姤儾鰍 橾騝椹殻睜篹洀菓粄趈賮脭癠 贀訨奜鶵硴嬧因縲歠錒虬峣邦 偏詃瞕薣姚盩墙槤鍚綪穾欖摽 姧縐敔等欂厞賔絲喎莨鎿倻鞳 傀粵翄幃捙貼罌袄獩岻翦往莐 豴糖焀鰭撗儼撟饣嗝蕼杜彝朳 券瀑璴傀聨赇疪黍井劂窧檴秂 镶垔輷鴞盽蟠鐕秠辻倘甼庝玂 櫹钷屰溓廮窅蕾硫廾螕鲗膚慝 賅粊葓郱怡鏥埌貲蚏謼賨厮撸 贅肎偾堡晙嘕葃抇呗磿楈臦齚 迈艐禣喰洃簴占醸熘鑚僴纜欩 虮侄疟烆硧薖札起抱殯鏑缩膾 頫澽绹镠記禆薭笧尾冊馂讀儃 柚贡猇狀踚癀寀騤螨镦銋裹岊 崩鶧欁漚沞冏癈後磚囤丹鄈筅 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