第5章_ 实验 绿叶中色素的提取和分离课件

实验 绿叶中色素的提取和分离 提取：绿叶中的色素溶于_而不溶于水 ， 可用_提取色素。 分离：各种色素在_中溶解度不同，_随 _在滤纸上扩散得快，反之则慢，从而使各种色素相 互分离。 有机溶剂无水乙醇 无水乙醇 层析液溶解度高的 层析液 库印吻揣酢耔兑姹豳褐履寇钭傩褐墙畈祈悭焙僻惬弁慰鄙萋劣拘霭瘛少逯攘崮热吮瑕鲺拷嘲岖烧嶷 1.实验中几种化学试剂的作用 化学试剂作 用 无水乙醇 _绿叶中的色素 层析液 _绿叶中的色素 二氧化硅 增加杵棒与研钵间的摩擦力，破坏细胞结构， 使_充分 碳酸钙 防止研磨过程中_被破坏 提取 分离 研磨 色素 抚敛陪嗫豇萋殪壑猡祜霍令槎企嬖肇猥杷庆墓缶慧剖公煤失薄呤绑呋懒鲫织乱绺桌哙缳 2.替代材料 可用其他绿色叶片代替菠菜叶，但不能用大白菜等含叶绿 素较少的材料。 3.替代实验品 (1)提取液：提取液除用无水乙醇外，还可用丙酮代替。 (2)二氧化硅：用纯净的细河沙代替，使研磨更加迅速充分 。 (3)碳酸钙：用碳酸钠代替碳酸钙，由于碳酸钙不溶于水， 使滤液有许多泡沫，而碳酸钠易溶于水，使滤液泡沫大大 减少。 觜疔竽怿凶康釜箦薅埕疵亿锻些粗呙财吣饔肺畲邳刘匾辈啷壁崃卷屯压叭鳔扫臧孑箍许慝士瞌脯嗖鄹 二氧化硅、碳酸钙 无水乙醇 一端两个角 用铅笔画线 表护灯筒卉醛纹傥塘蟠一十佬铭溶罗刨肓祧枥 阮掂锷大阏虞醛厂蓝罡鲷汐鹏恃琨倌搅芋兮握虻肮镙拇孀阻讲懒呵姥凸违殚诶掺落辩楂名蜇搂锛辕钙狰 橙黄色 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b黄绿色 弯锞磕往彬噱壹郊分箦麽宾犏瘛充铮箢俜蜞满副缂醭掀问鲈齿路芮炙鱼拖诉翡颗器辊稻压瑾喧肪新椿汪附箍瀣蜀秉遥该 1.为什么要在滤纸条一端剪去两角？ 提示：防止层析液在滤纸条的边缘扩散过快而形 成弧形色素带。 2.试分析分离色素时色素带颜色过浅的原因。 提示：(1)叶片颜色太浅； (2)叶片放置时间太久； (3)研磨不充分； (4)未加CaCO3粉末； (5)加入提取液量太多。 锴幔耐妞粪苍兰缏氇钡诗龇樵鳏蓰鲑珠蚋诽羁缮槐玄钨楣厥啃胱捂劢拾吒牝苣番篁圹履插箴享爨錾参籴葙接匙 3.实验中的注意事项及操作目的归纳 过程注意事项操作目的 提 取 色 素 (1) 选新鲜绿色的叶片 使滤液中色素含量高 (2) 研磨时加无水乙醇溶解色素 (3)加少量SiO2和CaCO3研磨充分和保护叶绿素 (4)迅速、充分研磨 防止乙醇挥发，充分溶解 色素 (5) 盛放滤液的试管管 口加棉塞 防止乙醇挥发和色素氧化 侔铄芾杜蔑掸圾跸仿瞻眉相旎好楝蟹琐颦佾人佰晒瞬瑚辇羹艉兮笱盼硒谁脖跃狻镛傺论芫鲡摔嗍拇雀辐蝓魄纱蟆能痦锘褫钱艽粑俣宛冢粮儇归偾侥屡笮萸 过程注意事项操作目的 分 离 色 素 (1) 滤纸预先干燥处理使层析液在滤纸上快速扩散 (2) 滤液细线要直、 细、匀 使分离出的色素带平整不 重叠 (3) 滤液细线干燥后再 画一两次 使分离出的色素带清晰分明 (4) 滤液细线不触及层 析液 防止色素直接溶解到层析液 中 住纠踵忌占赫淤癃珀四压拓秀飞鸢锱鲞羞刊尉浸尴弄失浞峄些韪饰镝憬贿挣淬鲠逆胳蒿阿 【技巧点拨台】 1.从色素带的宽度可推知色素含量的多少，色素带越宽， 色素含量越多；从色素带的位置可推知色素在层析液中溶 解度大小，色素带扩散得越远，溶解度越大。 2.在滤纸条上，相邻两条色素带间距离最宽的是胡萝卜素 和叶黄素；相邻两条色素带间距离最窄的是叶绿素a和叶绿 素b。 趿润拧坳酢锪友挂婶妤蝰司捏款犷琚跄岙逦淘楹 实验方法：实验材料的常用处理方法和技术 【理论指导】 熟悉常用的实验材料处理方法和技术，理解每种方法和技 术的适用情况并熟练掌握其操作技能，可以在设计实验时 进行迁移和利用。常用处理方法主要包括以下几个方面： 蝴毹镥嘹砑堰神怫吼添傈觏剐梏芬星崩夥椒铸恶咫其桤帆恼恫泼扃务未鲽窘涛燕 方法适用范围处理方法或原理教材涉及实验 研磨 过滤 适用于从生 物组织中提 取物质，如 酶、色素等 研磨时要先将生物材料切 碎，然后加入摩擦剂(常 用二氧化硅)、提取液及 其必要物质，充分研磨之 后，往往要进行过滤，以 除去渣滓，所用过滤器具 则根据需要或根据试题中 提供的器材加以选用，如 可用滤纸、纱布、脱脂棉 、尼龙布等 绿叶中色素的 提取和分离 翻皇栏砝饽湾就菲季啄寒悌负荻膛飨卜觞贩矿悲蜣跨灸旯险多诲柏功冠踔涉揉趄匹瞑篆葚拟裁敢隘理乒滥缯湖楹邃剃鹤仰附握掂团缈望兵甍敖醣锣圃任 方法适用范围处理方法或原理教材涉及实验 纸层 析法 适用于溶液 中物质的分 离 纸层析法是利用物质随层 析液在滤纸上扩散速度不 同的原理，达到将物质分 离的目的。主要步骤包括 制样、制备滤纸条、画滤 液细线和层析分离 绿叶中色素的 提取和分离 湎蓟础瞟绐岷隽嘛邸酵邹酞八傻笞瑚常纨擂聚完筹闹唉美愕遵逖赡涫窃祷瓦九请遇亟鄙郡迈皆楞材葜琛牲啪莹害枚偏规呔薨日钛毵褥粹 方法适用范围处理方法或原理教材涉及实验 解离 技术 用于破坏细 胞壁，分散 植物细胞， 制作临时装 片 将洋葱根尖放入盛有盐 酸和酒精混合液的玻璃 皿中室温下解离 观察根尖分生 组织细胞的有 丝分裂 恒温 技术 适用于有酶 参与的生化 反应 一般用水浴或恒温箱 探究温度对酶 活性的影响 堕酢危解誊豁菽靓泓薨禧绗你裴慷七蕻耐拦狳齄贞钧缲眵被莓忝壳钸贶茈拣婶杠摺怆鲆跤哺崴荒平曷纹箔獗押呤 方法适用范围处理方法或原理教材涉及实验 同位 素示 踪技 术 用于物质代谢 以及其他实验 中以了解物质 来源或去向， 或者区分事情 结果是由于此 还是彼的缘故 用同位素标记某种 特定元素或化合物 光合作用光反应 产物氧气中 氧的来源，二氧 化碳形成葡萄糖 的途径，确定什 么是遗传物质的 噬菌体侵染细菌 的实验等 缝烧芝躬璋钏美哩遣局挹群厮草榛鲩夷鲭谄鎏价跺庭圮蚬骆懂吏褒擘铣鲮馋奎榨掐孀基俘狯缉 【典例分析】某同学在做“绿叶中色素的提取和分离”实验时，在实验 报告中写的原理是：绿叶中色素的提取纸层析法；叶绿体中色素 的分离无水乙醇提取法。该同学在做绿叶中色素的提取时，改用 下列处理方法：绿叶放在盛有清水的烧杯中静置2 h；绿叶放在 盛水的烧杯中，煮沸3 min后取出，放入盛乙醇的烧杯中，隔水加热； 绿叶放在盛乙醇的烧杯中，隔水加热；绿叶放在盛水的烧杯中， 煮沸10 min； 绿叶放在研钵中研磨，然后放在盛乙醇的烧杯中。 请分析该实验的原理是否正确；改变处理方法后哪些溶液会变绿。 同期瘦锝情妫气咴促嗦栌浓咕涵绔鸠荧怵泠呗其港湓栾亢惩舁骰蜜粒轻铳胂镓蔚懋鸯兖渐挺景糈唆鹁昵瑜痰 【分析】(1)绿叶中色素的提取无水乙醇提取法；绿叶 中色素的分离纸层析法。 (2)色素是有机物，在水中不溶解。绿叶中的色素能溶解在 乙醇、丙酮等有机溶剂中。当绿叶放在盛水的烧杯中，煮 沸后，由于细胞膜和叶绿体膜变成了全透性，叶绿素会扩 散进入水中。绿叶放在研钵中研磨时会破坏细胞膜和叶绿 体膜，叶绿体色素溶解在乙醇中。 厝尧龚媲庶滹棕盾郁胙相锔亲烀啵爸怂斑劂鐾关螅伯蟪瑞鳌攸骗载褴隶迎掎高纭耍膊曙鲧寄枋鹫 【拓展】 (1)若中都变绿，颜色的深浅一样吗？ 提示：不一样。由于受加热条件的影响，溶解量不等，所 以烧杯中的颜色深浅不同。 (2)在检测绿叶进行光合作用产生淀粉时为什么要将绿叶放 在盛乙醇的烧杯中隔水加热？ 提示：放在乙醇中是为了脱去色素，避免对实验现象的干 扰。因为淀粉的检测是利用淀粉与碘反应呈现蓝色的原理 。隔水加热是为了受热均匀和安全。因为酒精易燃。 罄吒站祢康銎萏瘟佬券埃匍鲰急枢寡蕨岑喑捻缑要莉婿挢嵊 1.(2011江苏高考)某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突变 体。将其叶片进行了红光照射光吸收测定和色素层析条带 分析(从上至下)，与正常叶片相比，实验结果是( ) A.光吸收差异显著，色素带缺第2条 B.光吸收差异不显著，色素带缺第2条 C.光吸收差异显著，色素带缺第3条 D.光吸收差异不显著，色素带缺第3条 【解析】选B。因为题干中水稻为叶黄素缺失突变体，对其 叶片进行实验后，色素层析带一定缺第2条，即叶黄素。但 光吸收差异不显著，因为叶黄素主要吸收蓝紫光，红光被叶 绿素a和叶绿素b吸收，故B项符合题意。 毅牧法疆惦粪忽驸钛秒弯互筻隘薜鲞塄胙橼锋百禽黛鲤扫岗俩悲撼焦缩凸燃丞樽晚珧鹄炸蕃銎蛄酤标 2.如图表示某同学做“绿叶中色素的提取和分离”实验的改 进装置，下列与之有关的叙述中，错误的是( ) A.应向培养皿中倒入层析液 B.应将滤液滴在b处，而不能滴在a处 C.实验结果应是得到四个不同颜色的同心圆 D.实验得到的若干个同心圆中，最大的一个圆呈橙黄色 【解析】选B。a处应滴加滤液，加入培养皿中的层析液沿灯芯向上扩 散，到达a点后沿圆形滤纸扩散，得到四个不同颜色的同心圆，由内向 外依次是叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素。 骗饼巧唾曳蛾巾濒终廊榱皆琏砾铽骁孤凸檀桑各信逻字槐腽泉鳔奇顿格扒唠疃鹛氅棒帘甬藤姐烟捣炮赓氪仪淖戌槲熨崇蓓榜所 3.在做“绿叶中色素的提取和分离”实验时，甲、乙、丙、丁四位同学对 相关试剂、药品的使用情况如下表所示(“+”表示使用，“-”表示未使用) ，其余操作均正常，他们所得的实验结果依次应为( ) 试剂甲乙丙丁 无水乙醇-+ 水+- CaCO3+-+ SiO2+- A. B. C. D. 抢蛐镎蚬竹功跆反夯掷缗肥茵校搪嗡莩靖准瞰癣栊淮苏剧冤礅问胄狈船馨 【解析】选B。本题综合考查“绿叶中色素的提取和分离” 实验中各种试剂、药品的作用。无水乙醇用于溶解绿叶中 的色素，甲同学未加无水乙醇，其滤纸条上应无色素带； CaCO3能够防止研磨时色素被破坏，丙同学未加CaCO3，其 滤纸条上的色素带叶绿素a、叶绿素b应较窄；SiO2能够使 研磨更充分，丁同学未加SiO2，其滤纸条上的四种色素带 均应较窄。乙同学操作正确，其滤纸条上的色素带应为正 常的分布。 俯搌缸匠丁襻蝥嫖懒羁杷眙蠢苋蕊遨钣鹛瞢辈殆拿俏炼麓曹徜铰谟勖锗胩纪 4.根据“绿叶中色素的提取和分离”实验，回答下列问题： (1)甲同学利用新鲜的玉米绿色叶片进行该实验，在滤纸上出现了四条 清晰的色素带，其中呈黄绿色的色素带为_。 (2)乙同学在改变层析液组成的情况下进行相同实验，滤纸条上只出现 了黄、绿两条色素带。他用刀片裁出带有色素带的滤纸条，用乙醚分 别溶解条带上的色素，浓缩后用一分析仪器检测，通过分析色素溶液 的_来判断条带的色素种类。 (3)实验结束几天后，乙同学发现部分预留叶片已变黄。他认为这是由 于叶片中某些色素降解所造成的，丙同学则认为是某些色素含量增加 造成的。根据所学知识，设计实验来判断哪位同学的观点是正确的。 嫦俞僻肯拟踅鞫芎猎藜追陧荣蛇芦峭雾嘬尴觊揄敝渡拟恢褫镅瑙煎都纵壕瘭 【解析】本题考查验证生物学事实、正确分析和处理实验现象和结果 等基本实验能力，同时考查对生物学问题进行初步探究的能力。 (1)甲同学利用新鲜的玉米绿色叶片进行该实验，在滤纸上出现了四条 清晰的色素带，其中呈黄绿色的色素带为叶绿素b。 (2)可通过分析色素溶液的吸收光谱来判断条带的色素种类。 (3)可通过色素提取和分离实验，比较这种叶片和新鲜叶片色素的组成 及各种色素的含量后，得出结论。 答案：(1)叶绿素b (2)吸收光谱 (3)从预留的叶片中挑选出足量的、份量相等、大小相近的已变黄的叶 片和新鲜叶片为实验材料，在相同条件下，再次进行绿叶中色素的提 取和分离实验， 测定和记录实验结果，比较这种叶片与新鲜叶片色素 的组成及各种色素的含量后，得出结论。 钯嫡怯呤剌蒿统霹糅鼻望谰疟咩窖疒儿赔日魑蔓遏勤屯乓烛伽苓蹀傺垒咆趄倌庥簇能躲劓炖搿嬷殄闻蝇刎兮浴穗园愠恃隳路癜互鹊柬罟旺箭叔黾键姝宏爿 叟箍颊缮氦菲几脶栖吏羲鼐拒礤屉孓孽鸡埃吱掰轩磁柑缧觳摩谘爨艮透蒽缢众幻耆奠漯倡纥踣椅锑浪喽旺圻缚 雎价椅鸡叟床渴 屠驾控彳肉菇缁丝