珠海可见异物检查法讲义课件

增订附录可见异物检查法情况简介 北京市药品检验所 余立 2005年9月 可见异物检查法 lChp.2005增订的7个附录之一 l（一部、二部、三部） l是对注射剂、滴眼剂中在规定条件下目 视可以观测到的不溶性物质的检查 （外源性、内源性，大于50m ） l与不溶性微粒检查相衔接的一个项目 可见异物检查法收入药典附录的意义 l临床意义 l安全性检查（过敏反应、微循环障碍、血 管栓塞） l滤膜使用率和滤膜质量不是太高 l生产意义 l间接检查和控制了生产环境、容器处理、 剂型处方等因素 l政治意义：赶超先进、维护权益 l多了一个我国首创的药检方法，提高 中国药典的国际地位；符合依法管药 、依法检药的需要 lBP2002 附录 B =EP 第4版 2.9.20 Visible Particles，均采用灯检法 可见异物检查的方法 l中国药典2005年版收了两种检测方法 灯检法和光散射法 l灯检法经典的延续和改进,一般常用法 l光散射法-现代检验的需要，科技发展的 l 必然。未来的趋势。 l 灯检法不适用的品种应选用本法 l显微镜法-破坏性检查，有二次污染的机 l 会，代表性与工作量是对矛盾， l 未收入药典，但仍有一定使用价值 灯检法的溯源 l我国医药工作者结合生产检验实际首创 的、已使用了几十年，在一定的历史时 期为保障人民用药安全起到了相当大的 作用，但一直作为内部标准、卫生部 药品标准1993年版- 澄明度检查细 则和判断标准，未收入过中国药典 灯检法的操作 l除另有规定外，取供试品置伞棚装置边 缘处，在规定的光照条件下，在明视距 离（指供试品至人眼的距离，通常为 25cm）内，分别在黑色和白色背景下 ，手持供试品瓶体颈部使药液轻轻翻转 ，用目检视。 与澄明度检查细则和判断标准的差异 l距离 l2025厘米明视距离 通常25厘米 l人员 l不包括矫正视力 包括矫正视力 l总取样量 l200支 20支 l支/次 l 36支/次 未规定 l时间 l1521秒 未规定 注射用无菌粉末 l除另有规定外，取供试品5支（瓶）， 用适宜的溶剂及适当的方法使药粉全部 溶解后，按上述方法检查。配带有随行 溶剂的注射用无菌粉末，应先将随行溶 剂按溶液型供试品检查后，再用无可见 异物的溶剂溶解注射用无菌粉末。 无菌原料药 l除另有规定外，称取各品种制剂项下的 最大规格量5份，分别置洁净透明的专 用玻璃容器内，用适宜的溶剂及适当的 方法使药物全部溶解后，按上述方法检 查。 关于适宜溶剂 l注射用无菌粉末及无菌原料药所选用的 适宜溶剂应无可见异物。如为水溶性药 物，一般使用不溶性微粒检查用水（参 见附录 C不溶性微粒检查法）进行溶 解制备；如为其他溶剂，则应在各品种 正文项下进行规定。溶剂量应确保药物 溶解完全（但一般不超过制剂容器体积 ）并便于观察 关于适当方法 l注射用无菌粉末及无菌原料药溶解所用 的适当方法应与其制剂使用说明书中注 明的临床使用前处理的方式相同。如除 振摇外还需辅助其他条件，则应在各品 种正文项下进行规定。 l无色供试品溶液，检查时的光照度应为 10001500lx；用透明塑料容器包装或 有色供试品溶液，光照度应为2000 3000lx；混悬型供试品仅检查色块、纤 毛等明显可见异物，光照度为4000lx。 限度的改变 l原来：不合格率出厂时5，效期内7.5 l现在：各类注射剂、滴眼剂在旋转时均 不得检出烟雾状微粒柱，且不得检出金 属屑、玻璃屑、长度或最大粒径超过2 的纤维和块状物等明显外来污染的可 见异物。除此之外的其他可见异物（如 2以下的短纤维及点、块等）如有检 出，除另有规定外，应分别符合下列规 定。 溶液型静脉用注射液、注射用浓溶液 l20支（瓶）检查的供试品中，均不 得检出可见异物。如检出其他可见 异物的供试品仅有1支（瓶）， 应 另取20支（瓶）同法复试，不得检 出 溶液型非静脉用注射液 l20支（瓶）检查的供试品中，均不 得检出可见异物。如检出其他可见 异物，应另取20支（瓶）同法复试 ，初、复试的供试品中，检出可见 异物的供试品不得超过2支（瓶） 滴眼液 l20支（瓶）检查的供试品中，均不得检 出可见异物。如检出其他可见异物，应 另取20支（瓶）同法复试，初、复试的 供试品中，检出其他可见异物的供试品 不得超过3支（瓶）。 混悬型注射液和滴眼液 l20支（瓶）检查的供试品中，均不 得检出金属屑、玻璃屑、色块、纤 毛等明显可见异物。 l条件所限，检测、规定不能很细 注射用无菌粉末 l5支（瓶）检查的供试品中，均不 得检出可见异物。如检出其他可见异 物，每支（瓶）供试品中检出其他 可见异物的数量应符合下表的规定 ；如有1支（瓶）不符合规定，另 取10支（瓶）同法复试，均应符合 规定。 化学药 每支（瓶）中4个 l生化、抗生素和中药 l规格2g 每支（瓶）中10个 l规格2g 每支（瓶）中8个 l 配带有随行溶剂的注射用无菌粉末，随 行溶剂应符合相应的溶液型注射液的规 定。 无菌原料药 l5份检查的供试品中，均不得检出可见 异物。如检出其他可见异物，每份供试 品中检出其他可见异物的数量应符合下 表的规定；如有1份不符合规定，另取 10份同法复试，均应符合规定。 l化学药 每份中2个 l生化、抗生素和中药 每份中5个 l既可静脉用也可非静脉用的品种应执行 静脉用制剂的标准 l冻干粉针属于注射用无菌粉末 l大输液属于溶液型静脉用注射液 灯检法的优点 l简便，检测成本低； l可少量计数异物，直观感受污染程度； l可辨别较大异物的种类，从而可以分析 可见异物的来源，找出污染的环节； l有经验的检验者可以较好排除气泡等的 干扰。 灯检法的缺点 l漏检率受人为主观影响较大，其中包括 检验者的检测经验水平，身体、心理状 态、视力疲劳程度等； l供试品溶液颜色较深，容器有颜色时人 工检视的灵敏度会显著受到影响； l对粒子捕捉、辨别、判定的尺度难于统 一规范 、传达和表达 应借助标准粒 子 光散射能量法 l利用光电与电脑技术、主要使用仪 器同时与人工目视适当地衔接，使 人机优势结合互补 l实验过程一般可分为两个部分： l首先取供试品20支，用仪器逐支将供试 品检测3次。 l凡仪器判定有1次不合格者，再用灯检 法确认。 l用有色透明容器包装或液体色泽较深等 灯检法检查困难的品种不用灯检法确认 l国外：目前国外药典没有把该方法收入附录 的 l日本、德国等也有检查可见异物的全自动检 测仪出现；但只用于生产在线检测，且无论 从原理、机械设计、技术参数应用等方面均 与国内目前的仪器有较大差异 ；例如德国 Seidenader 机械制造集团公司所制造的“自动 检测仪”（Automatic Inspection machines) l日本第一制药、德国拜耳 l国内： l湖南一家科研单位研制出全自动检测仪 l药典会对此非常关注并派人进行了考察（98 年），认为依据的原理有科学的理论基础， 有发展前景 l仪器已向中国专利局申请了发明专利。 光散射法的建立 l国家药典委员会于2002年7月批准了北京市药 品检验所和北京卫标药品标准研究发展中心 呈报的“注射剂中可见物质的全自动检测方法 的研究”立题报告。 l2002年12月课题组在北京市药检所召开了第 一次会议，就课题组成立及分工、本课题前 期工作总结汇报、今后的研究方向、工作的 进度计划和资金预算等事宜进行了研究。 全自动检测仪的构造 l上、下瓶传送装置 l旋瓶装置 l激光光源 l图像采集器 l计算机数据处理系统 l终端显示器 仪器检测的基本原理 以激光为光源,当入射光照射溶液时,溶 液中存在的不溶性物质使入射光发生散 射，散射的能量与不溶性物质的大小有 关。仪器通过对激光散射能量进行测量 并与规定的阈值比较，确定溶液中是否 存在体积达到或超过规定的固体物质。 当散射粒子的尺寸比光的波长小 时，散射光强正比例于 。这种规 律称为“瑞利散射”。 当散射粒子的尺寸比光的波长大 的多时，散射光的强度就服从“米氏 散射”规律。 粒子激光散射示意图 全自动检测仪工作流程 1、用标准粒子对仪器进行日常校验 2、根据供试品瓶体大小调节设置检测参 数 4、旋瓶装置使样品沿垂直中轴线旋转一 定时间使药液中存在的异物悬浮后迅速 停止 全自动检测仪工作流程（续） 5、静置一定时间待药液涡流基本消失但 药液因惯性继续旋转时，图像采集器在 特定角度对药液中不溶性物质对光产生 的散射能量进行连续采像，采集图像不 少于75幅 6、数据处理系统对采集的序列图像进行 处理，并与规定的阈值比较 7、记录并显示检测或判定结果指令下瓶 传送装置自动分检合格与不合格样品 l开机 校验 调节设置参数 上瓶 旋瓶 静置 摄 像 l 处理图像 判断有无粒子 下瓶 记录结果 打印结果 需要设定的参数 l取样视窗-摄像机的视野 l旋转时间-使供试品旋瓶的时间 l静置时间-供试品旋转后需要静置的短 暂 时间 l嵌瓶松紧度-机械手嵌住瓶体的力度大 小 仪器判定溶液中“有粒子”的必要条件 l粒子要在检测区内出现，因为目前检测 区不能覆盖整个容器。 l对光的散射能量要超过一定数值，因为 仪器设定了检测域值。 l所处的位置必须是变换的，因为为了排 除瓶壁污渍的干扰，给仪器设立一种图 像处理功能，让仪器自动将固定不动的 光散射体排除 安培瓶 粒子 激光束 检测区域 旋转方向 一个粒子的激光散射能量图 t 20ms 所测量到的最大能量点 图像采集时间段 l液体的浊度 l可影响入射光的通过 l液体的颜色对测定基本无影响 l因为本仪器是依据光散射能量的采集来对液体中的 不溶物质进行测定的，所以，尽管液体的颜色有深 浅但只要是真溶液，不影响入射光的通过，对测定 的影响就不大 光散射法的优点 l人机结合优势互补 l准确性高，漏检率低 l客观、性能稳定、结果重现性好 l随时校准，便于统一规范 l台间差小，远远好于不同检验员之间的差异 l基本不受溶液、容器的颜色影响 l瓶壁小固定污渍不影响检测 l非破坏性检测，有益无害 光散射法的局限性 l浊度对测定结果影响较大 l对粘稠、易产泡不易消泡的液体会增加错检 率 l由于机械原因暂不能检测瓶体直径小于8， 大于25的样品 基本原理框图 检测阈值的确定 l是新方法建立要解决的首要问题，就如 同要丈量长度首先要把标尺找对刻度校 准一样。 l阈值太小错判太多与我们检测的要求不 符，人机吻合度不高 l阈值太大漏判增加 l适宜的阈值设定在50m 仪器的标定与校验工作的方法 （4）运用一元线性回归模型拟合出标定曲线 。 采用激光面上粒子能量感应平均法。 （1）制备好40m, 60m , 80m , 100m 标 准微粒溶液 （2）用仪器测量他们的图像能量 （3）在能量图上，选取在激光面上的点，计 算其能量平均值。 阈值日常标定与验证 l除另有规定外，分别用粒径为40m和60m 的标准粒子进行标定和验证，标定由仪器自 动完成，之后，仪器根据标定结果给出曲线 方程，操作者利用曲线方程计算出与粒径 50m相对应的检测象素值，把这个检测象素 参数输入设定后，即完成了仪器检测阈值的 设定，再以60m的标准粒子溶液作为供试品 溶液验证测定3次，每次应均被仪器判定为“ 有粒子” 参数的调整及对检测的影响 l取样视窗-左右边线和底线应与瓶体重合，上 边线与液面的弯月面成切线； l过小时使安瓿中液体的检测面积不足， 检测死角过大隐藏异物， l过大使气泡影响增加 l视窗上线太低容易漏检纤维毛，但对产 泡样品应调至泡下 视窗下线过高容易漏检较沉的异物 l旋转时间-设置应能使液面漩涡到底，以能带 动固体物质悬浮并消除气泡； l由于仪器对安瓿的旋转力度和速率是相同的 ，因此把大体积规格安瓿的旋转时间延长， 可以让其中的微粒悬浮更充分，从而也加大 了对它们的捕捉几率。 l静置时间-设置应尽可能短，但不能短于液面 漩涡平复的时间，以避免气泡干扰同时也保 证摄像启动时固体物质仍在转动； l不同体积规格的液体所需的最佳静置时间也 是不同的，对小体积规格的样品，静置时间 过长，液体旋转过缓，某些异物已经静止不 动，仪器不认为是液体中的异物，因此也会 出现漏检现象。通常设置在涡流刚刚消失 时刻 l嵌瓶松紧度-参数与瓶底直径（mm）基本相 同，可根据安瓿质量调整，如瓶体不平正， 转动时瓶体摇动幅度较大，气泡易产生，则 应将嵌瓶松紧度调大以减小摇动，但同时应 延长旋转时间，使漩涡仍能到底 其他影响因素 l光源：微粒的检测是通过采集微粒的光线散 射能量的积累，然而微粒过小在一般光源照 射下，其散射能量较小，不容易产生微粒图 像。因此需选用具有一定能量、单色、聚光 性和方向性极强的光，用它作为光源并通过 透镜系统直接照射在药液上 ，光源能量的变 化能够影响检测灵敏度（仪器有一定的代偿 能力） l外界光线 l检测限度 l图像采集数量 l太少对粒子的捕捉几率降低，多了没用 l会干扰本仪器对光能量的测定 l安瓿质量（光滑、光洁度等） l可影响液体的旋转状态，与气泡的生成和消