“三基”训练检验分册351-385ppt课件

医学临床“三基”训练 检验分册(第四版） 基础理论、知识问答（351-385） 5.2基础理论和基本知识问答 351.抗原抗体反应有何特点? 抗原抗体反应的特点是:特异性。按 比例。可逆性。 352.抗原抗体反应可分为几个阶段? 抗原抗体反应可分为两个阶段。第一阶段 为特异性结合阶段,此阶段反应快,但不出现可 见反应。第二阶段为反应阶段,在各种环境因 素影响下,抗原抗体进一步交联和聚集,出现肉 眼可见反应,此阶段反应慢。实际上两阶段难 以严格区分,若反应开始时抗原抗体浓度较大 且两者比例适合,在多种因素影响下,可很快形 成可见反应。 353.影响抗原抗体反应有哪些因素? 影响抗原抗体反应的主要因素是电解质、 酸碱度和温度。适当振荡也可促进抗原抗体分 子接触,从而加速反应。 354.血清学反应的应用原则是什么?试举例 说明o (1)用已知抗原检测未知抗体,如诊断伤寒 的肥达试验和诊断梅毒的LJSR试验。 (2)用已知抗体检测未知抗原,如用诊断血 清鉴定病原微生物,用抗甲胎蛋白血清检测甲 胎蛋白等。 355.何谓凝集反应?一般可分几种? 凝集反应是指颗粒性抗原或细胞性抗原与 其相应抗体,在适量电解质和一定温度条件下, 经过一定时间,出现肉眼可见凝集的现象。凝 集反应可分为直接凝集反应、间接凝集反应、 胶乳凝集试验、协同凝集反应、抗球蛋白试验 以及病毒血凝及血凝抑制反应等。其中间接凝 集反应又可分为正向间接凝集反应、反向间接 凝集反应和间接凝集抑制反应。抗球蛋白试验 又可分为直接试验和间接试验。 356.何谓沉淀反应?沉淀反应试验可分几种 ? 沉淀反应是指可溶性抗原(血清蛋白质、 细菌培养滤液、细菌浸出液等)与其相应抗体 结合后,在适量电解质和一定温度条件下,且两 者比例适合时,产生肉眼可见的沉淀物的现 象。 常用的沉淀试验有环状沉淀试验、絮状沉淀试 验和在凝胶中的沉淀试验。凝胶中的沉淀试验 是指可溶性抗原与其相应抗体在凝胶中自由扩 散,或在电场中扩散,在适量电解质和一定温度 条件下,在抗原抗体比例适合处,形成白色沉淀 线、沉淀环或沉淀峰。自由扩散有单向扩散和 双向扩散试验,电场中扩散有单向电扩散(火箭 电泳)和双向电扩散(对流电泳)。此外,还有免 疫电泳,即琼脂平板电泳与双向扩散等。 357.试述间接荧光素标记抗体技术的原理。 将含有抗原的细胞制成抗原片,加上待测 血清后,其中所含的相应抗体可与细胞内或细 胞表面的抗原结合,再加入标记有异硫氰酸荧 光素的第二抗体(抗抗体,一般是抗人lgG)时, 荧光素标记抗体又可和已与抗原结合的待测血 清中的抗体反应,在荧光显微镜下,即可见到抗 原部位呈现荧光,间接证实待检样品中存在某 种抗体。 358.试述酶联免疫吸附试验(ELISA)的原 理。 将抗原包被于固相载体,加人待测血清,如 其中含有相应抗体,可与包被抗原结合。洗去 不参与反应的无关蛋白成分后,再加入酶标记 的第二抗体或酶标记抗原,使与待测抗体反应, 在固相载体上形成抗原一待测抗体一酶标记抗 抗体或抗原一待测抗体一酶标记抗原的复合 物。 待加入底物后,酶催化底物,产生呈色物质。根 据着色深浅,可判定待测抗体的有无及含量。 如检测lgM类抗体,可用抗弘链抗体包被固相载 体,再依次加入待测血清、抗原、酶标记的针 对抗原的特异抗体。如检测抗原,可采用抗原 捕获(双抗体夹心)EIJSA。除此之外,EIJSA还 有很多其他的衍变方法,如竞争抑制法等。 359.简述抗球蛋白试验的原理。 红细胞表面包被了lgG抗体分子或补体分子 C3、C。片段,但不能产生凝集现象。lg6抗体和 补体都是人球蛋白,以此免疫动物,或用杂交瘤 (hybridoma)技术可以得到抗球蛋白。这类抗 体的特异性是针对lgG-分子的Fc段或补体G、G 的片段,可以和包被在红细胞上的抗体分子和补 体分子作用,使红细胞发生凝集,抗球蛋白分子 起着搭桥的作用。红细胞包被的抗体还可以是 lgA或lgM,这必须用相应的抗lgA和抗lgM才能检 出。 抗球蛋白试验可分直接法和间接法。直接法 是检测体内被抗体补体致敏的红细胞,如自 身免疫性溶血性贫血和新生儿溶血病的诊断 等。间接法是检测红细胞在体外致敏的方法, 亦即检测血清中有无游离的不完全抗体,可用 于检测孕妇Rh抗体和鉴定Rh血型等。 360.什么是免疫浊度法? 免疫浊度法是抗原抗体在一种特殊缓冲液 中快速形成抗原抗体复合物,反应物中呈现浊 度,与一系列标准品对照,从而计算出受检物的 含量。免疫浊度法现在已有免疫透射比浊测定 法、免疫胶乳浊度测定法和免疫速率散射浊度 比浊法。免疫浊度法较一般沉淀试验操作简 单、测定时间短、敏感度高,且可以使用于自 动化仪器。此项技术已应用于临床体液蛋白的 检测。 361.什么是自身免疫病? 当某些原因使自身免疫应答过分强烈,导致 相应的自身组织器官损伤或功能障碍,这种病 理状态被称为自身免疫病。 362.自身抗体检测有何临床意义? 多数自身免疫病病人血清中都会出现针对 自身抗原的自身抗体,虽然有些自身抗体在自 身免疫病中的确切意义尚未得到严格证实,但 其相关性已得到认可,故血清自身抗体检测对 自身免疫病的诊断、治疗和评价等方面仍有重 要意义,如ANA、ENA、dsDNA的检测等。 363.什么是抗核抗体?有什么临床意义?有些什 么类型? 抗核抗体(ANA)是泛指抗各种核成分的抗体,是 一种广泛存在的自身抗体。ANA可以与不同来 源的细胞核起反应,无器官特异性和种属特异 性。 ANA在系统性红斑狼疮病人血清中滴度较 高,但也出现在其他许多自身免疫病病人中,故 有时临床将检出ANA作为自身免疫甚至自身免 疫病的依据。 由于细胞核成分复杂,不同成分的抗原性亦有 不同,故有多种不同的ANA,如抗核蛋白抗体(抗 DNP)、抗DNA抗体、抗可提取性核抗原抗体(抗 ENA)。抗ENA又可分为十几种。 364.类风湿因子是什么?其对类风湿性关节 炎诊断有无特异性? 类风湿因子(RF)是抗变性lg6自身抗体,主 要为1 9S的lgM,也可见到7S的lg6及lgA。 RF主要出现在类风湿性关节炎病人血清 中。RF阳性支持早期类风湿性关节炎的倾向性 诊断,但RF也如ANA一样,并不是类风湿性关节 炎独有的特异性抗体。其他疾病如结缔组织 病、病毒性肝炎等,甚至老年人中亦有不同程 度的阳性率。 365.什么是细菌?简述其基本形态和构造? 细菌是一类最常见的单细胞原核微生物。 细菌的形态多种多样,归纳起来可分为球状、 杆状、弧形(弧菌、弯曲菌)和螺旋状(螺菌、 螺旋体)等4种基本形态。细菌的基本构造有细 胞壁、细胞质、细胞膜和细胞核等。 366.简述革兰染色法原理。 革兰染色的原理尚未完全明了。目前被广 泛接受的观点认为与细菌细胞壁结构及化学组 成有关。 革兰阳性菌细胞壁结构致密,肽聚糖层厚, 脂质含量少,结晶紫及媒染剂进入细胞内,形成 结晶紫一碘复合物。脱色过程中乙醇虽然溶解 细胞壁脂质成分形成小孔,但其脱水作用使细 胞壁收缩又构成屏障,因而阻止结晶紫一碘复 合物被乙醇溶出,细菌保持紫色。 革兰阴性菌细胞壁疏松,肽聚糖层较薄,脂质含 量高,乙醇溶解脂质,细胞壁通透性增高,结晶 紫一碘复合物被溶出,使菌体脱色,经复染而呈 红色。 367.抗酸染色法主要用于鉴别什么细菌? 抗酸染色法主要是用强染剂苯酚复红 加温染色,以促使菌体着色,然后以盐酸酒精脱 色,再用吕氏亚甲蓝复染。目前认为抗酸性细 菌的分枝杆菌属细菌细胞中含有分枝菌酸,能 与苯酚复红牢固结合,而不易被脱色,故保留红 色。非抗酸性细菌则不含分枝菌酸,能被盐酸 酒精脱色,故复染时被亚甲蓝染成蓝色。抗酸 染色法主要用以鉴别抗酸性与非抗酸性细菌。 368.细菌学检验中常用的培养基有哪些种类 ? (1)基础培养基:如肉浸液等。 (2)营养培养基:如葡萄糖肉汤培养液、营 养琼脂、血琼脂等。 (3)鉴别培养基:如双糖铁琼脂、枸橼酸盐 琼脂、各种单糖发酵管等。 (4)选择培养基:如SS琼脂、伊红亚甲蓝琼 脂等。 (5)特殊培养基:如厌氧培养基、I。型细菌 培养基、结核分枝杆菌培养基、沙保罗培养基 等。 369.试述真菌的概念及其常用的检验方法。 真菌有细胞核,不含叶绿素,胞浆内有完整 的细胞器,能进行有性和无性繁殖,以寄生或腐 生方式生存的真核细胞型微生物称为真菌。 目前大多数真菌的检验依靠形态学鉴定, 即直接涂片法检验。在临床检验中常见的是酵 母样菌的感染,其中以假丝酵母菌属、隐球菌 属、毛孢子菌属、酵母菌属等为多见。 酵母样菌的检验方法包括直接涂片、分离培 养及鉴定、动物接种和血清学试验。如新生隐 球菌和白假丝酵母菌的基本检验为尿素酶和芽 管形成试验,尿素酶阳性为新生隐球菌,有芽管 形成者为白假丝酵母菌。 370.简述世界卫生组织推荐的药物敏感试验 方法及其优点。 世界卫生组织推荐的药物敏感试验方法为 KB纸片琼脂扩散法,该法主要优点是操作简 便,易于掌握,且重现性好。 371.在药物敏感试验中。何谓敏感、中度敏 感和耐药o (1)敏感:表示在常规剂量给药后,测试菌 能被体内达到的血药浓度所抑制或杀灭。 (2)中度敏感:指测试菌可被测定药物大剂 量给药后在体内能达到的浓度所抑制或在测定 药物浓集部位的体液中(如尿中)被抑制。 (3)耐药:表示测试菌不能被在体内感染部 位可能达到的抗菌药物浓度所抑制。 372.试述葡萄球菌属的分类学位置。其在医 院感染学上有重要意义的菌 株有几种? 葡萄球菌属与口腔球菌属、游动球菌属、微球 菌属同属微球菌科。 在医院感染学上,耐甲氧西林金黄色球菌 (MRSA)和耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)已成 为重要的病原菌。 373.试述链球菌的分类。 近年来随着分子生物分类学研究的进展, 原来属于链球菌属、分类为D群和N群肠球菌和 乳球菌已分化成独立的肠球菌属和乳球菌属, 厌氧链球菌归为消化链球菌属。 目前链球菌属分为40个种及亚种。根据链 球菌在血平板上的溶血现象将其分类, I.,ancefield血清学分类等传统方法目前仍是 临床实验室鉴定链球菌时常规使用的方法。 374.何谓ljl一内酰胺酶?产生此酶的菌株 主要有哪些? 能裂解青霉素族和头孢菌素族抗生素的基 本结构p一内酰胺环,从而使其丧失抗菌活性的 酶,称为p一内酰胺酶。 大部分金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、 淋病奈瑟菌、革兰阴性厌氧菌和少数肺炎链球 菌等菌株可产生13一内酰胺酶。 375.试述大肠埃希菌科的致病因素o （1)内毒素:可引起发热、白细胞变化及代谢 改变等,严重者可导致休克。 (2)肠毒素:可致腹泻。 (3)其他致病因素:如穿透肠道上皮和粘附 于粘膜的能力等。 376.引起肠道感染的大肠埃希菌有哪些?其 常用检验方法如何? (1)产肠毒素大肠埃希菌(ETEC):引起霍乱 样肠毒素腹泻(水泻)。该菌能产生两种肠毒 素,一种为不耐热肠毒素(I),另一种为耐热 肠毒素(sT)。检测I一般使用改良Elek法;检 测ST一般使用乳鼠胃内灌注法。 (2)肠侵袭型大肠埃希菌(EI.EC):引起志贺 样腹泻(粘液脓血便)。检测一般使用豚鼠角膜 侵袭力试验。 (3)肠致病性大肠埃希菌(EPEC):主要引起 婴儿腹泻。检测用EPEC多价诊断血清作凝集试 验。 (4)肠出血型大肠埃希菌(EHEC):此菌中最 具代表性的是0157:H7血清型,可引起出血性大 肠炎和溶血性尿毒综合征。一般检测是直接筛 选不发酵山梨醇的菌落(无色菌溶),生化反应 证实为大肠埃希菌,再经乳胶凝集试验测01 57 抗原。 (5)肠凝聚型大肠埃希菌(EAggEC):可引起腹 泻。用液体培养加凝集试验检测细菌对细胞的 粘附性或用DNA探针技术检测。 377.试述沙门菌的抗原基本构造。 沙门菌的抗原构造主要有3种,即菌体抗原 (O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)和表面抗原(Vi抗 原等)。 378.霍乱弧菌分几个生物型? 1 966年国际弧菌命名委员会将霍乱弧菌 分成两个生物型:霍乱弧菌古典生物型及霍乱 弧菌爱尔托生物型(ElFor biotype)。 379.疑似霍乱病人的粪便及呕吐物标本应接 种什么培养基? 先用pH值8.5的碱性蛋白胨水增菌培养,然 后转种至硫代硫酸盐一枸橼酸盐一胆盐一蔗糖 琼脂平板(TCBS)选择性培养基进行分离培养。 380.何谓支原体? 支原体是一群介于细菌与病毒之间,可通过 滤菌器,无细胞壁,能在无生命培养基中生长繁 殖的最小原核微生物。 381.何谓衣原体? 衣原体是一类形态相似,能通过滤菌器,严格 细胞内寄生,在宿主细胞内发育繁殖,有独特的 生活周期的原核微生物。 382.试述专性厌氧菌及其与人类疾病的关 系。 在有氧条件下不能生长,需在无氧环境中 才能生长的细菌,称专性厌氧菌。 , 厌氧菌大多为人体正常菌群,属于条件致 病菌。当细菌寄居部位改变、菌群失调、机体 防御功能减弱、长期大量地使用免疫抑制剂等 时,可以导致厌氧菌感染。 大多数厌氧菌感染为内源性感染。厌氧菌可引 起很多疾病,如脆弱类杆菌引起菌血症,艰难梭 菌引起伪膜性肠炎。少数厌氧菌可引起特殊感 染,例如破伤风梭菌引起破伤风,产气荚膜梭菌 引起气性坏疽,肉毒梭菌引起食物中毒等。 383.试述噬菌体及其实际意义。 噬菌体具有体积微小、结构简单和严格的 寄生性。噬菌体必须在活的宿主细胞(如细菌) 内繁殖,通常能将宿主细胞裂解,是一类属于病 毒的微小生物。 根据噬菌体寄生宿主细胞的高度特异性, 并使其裂解这一特点,可用于细菌鉴定,亦可用 于流行病学调查时的细菌分型。 384.试述L型细菌及其形成机制和培养特点o L型细菌即细菌细胞壁缺陷的细菌,因其首 先由李斯特(I。ister)研究院 所发现,故取其第一个字母而称之。 细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖,由于受作用 于细胞壁的抗生素、溶菌酶等因素的影响,当 肽聚糖结构遭受破坏或其合成受到抑制时,虽 然大多数细菌裂解死亡,但有时也有一些细菌 不死,这些细菌即L型菌。 L型菌需在高渗低琼脂(0.80.9)的含血 清(20)培养基中培养,生长缓慢,一般生长期 为27天,菌落为”油煎蛋“状,需放大100倍左 右才能看到菌落,可通过传代培养而返祖。 385.简述血、脑脊液、尿、粪便、