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文档简介

流流 感感 病病 毒毒 鸡鸡 胚胚 培培 养养 法法 福建省疾病预防控制中心 杨式芹 一、概况 w 1911年Rous和Murphy首先应用鸡胚 培养研究肉瘤病毒(Rous肉瘤)的繁殖。 w 1938年Goodpasture和Burnet等应用 鸡胚繁殖病毒、Cox应用卵黄囊培养立克 次氏体。 鸡胚培养法的优点： w1. 它的组织分化程度低，可选择适当途径 接种，病毒易复制，感染病毒的膜和液体 含大量病毒。 w2. 是个整体，有神经血管的分布及脏器的 构造。 w3. 来源充足，操作简单，通常是无菌的， 对接种的病毒不产生抗体。 鸡胚培养法的缺点： w1. 一般的病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指 征。 w2. 卵黄中常常含有抗家禽病原体的母体抗体。 w3. 某些细菌、衣原体和病毒能够从感染的母鸡传 递到鸡胚。 w4. 通常鸡胚常常含有白血病病毒。 w5. 在鸡食物中加入抗菌素，母鸡吃后会传递给鸡 胚，鸡胚就会产生对立克次体和衣原体感染的抵 抗。 二、鸡胚的结构与生理 鸡胚是由三个胚层发育起 来的，即外胚层，中胚层和内 胚层，它们构成胚胎的组织与 器官。 （约10日龄鸡胚的结构见图） 三、材料 w（一）711日龄鸡胚 w（二）孵卵箱 w（三）检卵灯、开卵钻和卵盘 w（四）其它 四、接种技术 （一）活胚检查 w 1.血管：活胚可见清晰的血管，有时可见血管搏 动，死胚血管模糊成淤血带或淤血块。 w 2.胎动：活胚可见明显的自然运动，尤其在转动 胚胎时，死胚见不到任何胎动，胚胎发红像出血样 ，有的呈现黑块。 w 3.血管网是否丰满：发育好的鸡胚可见密布丰满 的血管网，也就是绒毛尿囊膜，死胚则见不到这一 现象。 （二）接种途径 w1.尿囊腔接种：该途径一般用于流感、新城 鸡瘟病毒和腮腺炎的适应和传代。 w2.羊膜腔接种：这途径主要用于临床材料（ 如患者的鼻洗液及咽漱液）分离病毒。 w3.卵黄囊接种：该接种途径主要用于抗流感 病毒药物实验。 w4.绒毛尿囊膜壳块培养法：该法可用于流 感病毒滴定、中和试验和药物实验。 五、注意事项 w 鸡胚为一活的有机体，因此要严格 无菌操作，
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