自身抗体与自身免疫性疾病2013年1月23日课件

自身抗体与自身免疫性疾病 自身免疫病、风湿病和风湿免疫病 自身免疫病自身免疫病 风湿免疫病风湿免疫病 风湿病风湿病 自身免疫性疾病（自身免疫性疾病（Autoimmune Disease, AIDAutoimmune Disease, AID ） AID：指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自 身组织损害所引起的疾病。 内因（遗传易感、免疫耐受减低或丧失、调节异 常、衰老体弱等） 外因（感染、物理、化学、环境等） 自身免疫病的“病谱”（按疾病累及的系统分） 结缔组织疾病：类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、皮肌炎、硬皮病 神经肌肉疾病 ：多发性硬化症、重症肌无力、脱髓鞘疾病 内分泌性疾病：原发性肾上腺皮质萎缩、慢性甲状炎、青少年型糖尿病 消化系统疾病 ：慢性非特异性溃疡性结肠炎、慢性活动性肝炎、恶习 性贫血与萎缩性胃炎 泌尿系统疾病 ：自身免疫性肾小球肾炎、肺肾出血性综合症 血液系统疾病：自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜、特 发性白细胞减少症 器官特异性 非器官特异性 桥本甲状腺炎 扩张性心肌炎 自身免疫性溶血性贫血 系统性红斑狼疮 原发性粘液水肿 恶性贫血 特发性血小板减少性紫癜 干燥综合征 甲状腺机能亢进 自身免疫性胃炎 特发性粒细胞减少症 类风湿关节炎 Addision病 自身免疫性肝炎 绝经过早（少数病例） 硬皮病 1型糖尿病 原发性胆汁性肝硬化 男性不育（少数病例） 多发性肌炎/皮肌炎 重症肌无力 原发性硬化性胆管炎 交感性眼炎 混合性结缔组织病 多发性硬化症 溃疡性结肠炎 晶状体源性葡萄膜炎 系统性血管炎 脱髓鞘疾病 克罗恩病 抗磷脂综合征 寻常型天疱疮 自身免疫性肾小球肾炎 肺肾出血综合征 自身免疫病的“病谱”（按受累器官组织范围分） 自身免疫病的疾病特征 （1）患者血清中可测到高效价的自身抗体和(或)自身 应答性T淋巴细胞；还有高水平的r-球蛋白。 （2）病损部位有变性的免疫球蛋白沉积。 （3）可复制出相似的动物模型。 （4）病程发作与缓解交替出现，仅少数为自限性。 （5）有遗传倾向。 （6）女性多于男性，老年多于青少年。 （7）应用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂有效。 自身免疫性疾病的重要标志。 高滴度存在于自身免疫性疾病患者。 与疾病的活动性相关。 参与免疫病理性损伤。 自身抗体（autoantibodies） 由各种原因造成机体免疫系统B细胞产生针对自身 组织器官、细胞及细胞内成分的抗体，称自身抗体。 u间接免疫荧光法 u免疫斑点法、免疫印迹法 u微孔板ELISA u免疫扩散法 u悬浮微阵列法 u抗原蛋白芯片法 自身抗体检测方法 自身抗体检测方法自身抗体检测方法 RNP + Sm ANA筛查: 间接免疫荧光法(IFT) 抗原谱完整 (细胞核、细胞浆)。 检测ANA的金标准，具有很高的敏感性和特异性。 基质组合: HEp-2细胞+灵长类肝（猴肝）。 ANA：均质型（homogeneous,H) 高效价的H：SLE。 低效价H：药物诱导性狼疮，幼年型RA，慢性肝病，传单。 ANA：斑点型/颗粒型（speckled,S) 核内荧光呈斑点状，如蜂窝，核仁区无荧光。 高效价S：MCTD、硬皮病、SLE、SS等各种AID ANA：核仁型（nucleolar,N) 核仁区团块状或颗粒状荧光，38块，状如梅花。 高效价N对硬皮病、皮肌炎、类风关等。SLE偶见。 ANA：核膜型/周边形（membranous,M) 边缘荧光增强如环状。 高效价仅见于SLE活动期。 抗dsDNA抗体 金标准：IIF（绿蝇短膜虫） ANA其他核型 u着丝点型：局限型硬化症（CREST综合征）；PBC患者。 u核点型： 20-30% PBC患者。 u胞浆颗粒型：针对细胞胞浆中的颗粒成分的抗体（抗线 粒体抗体、JO-1抗体，核糖体P蛋白抗体）。 u胞浆纤维型：指针对细胞微丝、微管等骨架成分的自身 抗体。抗肌动蛋白抗体是I型AIH高特异指标。原肌球蛋 白和波形蛋白则临床意义不明确。 u分裂期细胞阳性：纺锤体，中间体等，意义尚不明确。 ENA谱：免疫斑点法（靶抗原确认） 免疫印迹法免疫印迹法 (Immunoblots (Immunoblots， 靶抗原确认）靶抗原确认） ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay) ELISA混合抗原 ELISA-单特异抗原 不是全抗 原提取物 膜条是变相的膜条是变相的ELISAELISA，只是载体不同，只是载体不同 ANA筛选试验 抗dsDNA抗体 抗ENA抗体 抗Sm抗体： SLE标记性抗体（20%-30%）。 抗nRNP抗体：MCTD 95 -100%（高滴度）。 抗SSA抗体： SS 40 -80%，SLE30-40，PBC20 抗SSB抗体： 仅见于SS 40 -80%和女性SLE20。常与SSA同现。 抗Scl-70抗体：SSc 25 -75%, 标记性抗体。 抗Jo-1抗体： PM/DM 25%，标记性抗体。 抗核抗体谱抗核抗体谱 抗组蛋白抗体：药物诱导SLE（95%），SLE(30-70%) 和RA(15-50%) 。 抗核糖体P蛋白抗体：SLE（5-15%）。普遍认为其滴度与SLE的活动性 相关。还与SLE的中枢神经系统症状、肾脏或肝脏受累有关。 抗核小体抗体：SLE(50-95%)，特异性约100%。SLE早期，抗核小体抗 体比抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体更早出现。有15-19%的抗dsDNA抗体 阴性的SLE患者中抗核小体抗体阳性。 Ro-52抗体：与多种CTD有关。正常人血清不出现，无疾病特异性。 抗增殖细胞核抗原（PCNA）抗体：SLE的特异性抗体(3%)。可能与SLE患 者发展为弥散性增殖性肾小球肾炎有关。 抗C1q抗体：SLE标志性抗体。抗C1q水平与SLE疾病活动程度相关，是SLE 患者并发肾脏损伤的重要指标，在狼疮肾诊断和活动性判定有重要作用。 抗核抗体谱抗核抗体谱 v pANCA ,cANCA ,xANCA v抗蛋白酶3（PR3），抗髓过氧化物酶（MPO） v其他： 抗杀菌/通透性增高蛋白（BPI） 抗人白细胞弹性蛋白酶（HLE） 抗组织蛋白酶G（CG） 抗溶菌酶（LYS） 抗乳铁蛋白（LF） v系统性血管炎 、炎症性肠病 、自身免疫性肝病 结缔组织病 药物性疾病 感染性疾病 抗中性粒细胞胞浆抗体谱抗中性粒细胞胞浆抗体谱 v类风湿因子（RF） v抗角质蛋白抗体（AKA） v抗核周因子（APF） v抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA） v抗MCV（Sa）抗体 v抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体） v抗RA33抗体 v葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）抗原 profilaggrin/filaggrin 类风湿关节炎相关自身抗体谱类风湿关节炎相关自身抗体谱 Rheumatologic diseases Rheumatic diseases Antinuclear antibody(ANA) Anti-dsDNA antibody Anti-Sm antibody Anti-cardiolipin antibody Lupus anticoagulant（LA) Anti-Nucleosomes antibodies Anti-ribosomal RNP antibodies Anti-2GPantibody 系统性红斑狼疮（SLE） SLESLE中存在的自身抗体达百种以上中存在的自身抗体达百种以上 YanivYaniv S et al1.Semin ArthritiRheum,2004,34:501-537 . S et al1.Semin ArthritiRheum,2004,34:501-537 . SeminSemin Arthritis Rheum. 2004 Oct;34(2):501-37. Arthritis Rheum. 2004 Oct;34(2):501-37. SLESLE患者中存在患者中存在100100多种自身抗体多种自身抗体 Systemic lupus erythematosus， SLE In addition antibodies against: ssDNA, histones, U1-nRNP, SS-A, SS-B, Ku, PCNA, Cardiolipin, 2-Glycoprotein 1 抗dsDNA: 特异性高。 与疾病的活动性相关（高滴 度时13月复查一次，低滴度6月复查1次 ）。 预后及肾脏受累的标志。 Sm抗体: p其他疾病及正常人几乎阴 性。 p阳性后难转阴。 SLE相关自身抗体 95%99%可排除SLE （） SLE治疗缓解 病情特重（大量IC沉积消耗抗体） （）低滴度 常见于RA等其它自身免疫性疾病 高滴度 可作为诊断SLE的依据 靶抗原确认 （）不能排除 抗dsDNA、Sm等抗体 （）可帮助诊断 ANA初筛 SLE实验室方法的选择及结果的确认 SLE疾病活动性指标 抗磷脂综合征（APS) 磷脂综合征（antiphospholipid syndrome，APS）是一种非炎症性自身 免疫病，血栓形成是APS突出的临床表现和主要的病理变化。患者血清中 持续抗磷脂抗体阳性。 APS患者推荐的血清学指标有ACA和2-糖蛋白1等（定量检测）。 p抗心磷脂抗体：50SLE和其他系统性 AID。ACA阳性SLE患者发生血 管炎、溶血性贫血、心脏及CNS损害的几率明显高于阴性者。 p抗2-糖蛋白1 抗体：在血栓形成和磷脂综合征（APS）比 ACA更特 异。可作为自身免疫性血栓形成的血清学标志。有助于自身免疫性和感染 性血栓的鉴别诊断。 系统性血管炎 p抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)筛查：系统性血管炎、炎症性肠病、自身免疫 性肝炎、结缔组织病的辅助诊断。两种核型（p-ANCA和c-ANCA)。 pc-ANCA及p-ANCA检测不足以证明系统性坏死的脉管炎。需做PR3-ANCA 和 MPO-ANCA靶抗原确认检测。 Anti-PR3: c-ANCA主要靶抗原。韦格纳肉芽肿（WG）的敏感而特异的指 标，特异性超过95%。PR3-ANCA水平与疾病程度和疾病活动度有关。 Anti-MPO: p-ANCA主要靶抗原。与显微多动脉炎（MPA）、坏死性新月 体性肾小球肾炎（NCGN）、结节性多动脉（PAN）、SLE、RA、药物诱导 的狼疮（DIL）等相关。MPO浓度与病情活动度有直接关系。 Anti-GBM: 与 Good-Pasture综合征、急进型肾小球肾炎及免疫复合物型肾 小球肾炎等有关。累及肺时，阳性率在50%；累及肺后，阳性率在80-90% 。 Sharp syndrome (MCTD) 几乎几乎100100MCTDMCTD患者均为单独患者均为单独U1RNPU1RNP高滴度阳性，抗高滴度阳性，抗 体滴度与疾病活动性相关。体滴度与疾病活动性相关。 在在30-40%30-40%的的SLESLE患者中也可检出抗患者中也可检出抗U1-nRNPU1-nRNP抗体，但抗体，但 几乎总伴有抗几乎总伴有抗SmSm抗体。抗体。 ANA Anti-SS-A antibody Anti-SS-B antibody Anti-Fodrin antibody Anti-M3R antibody AMA-M2? ACA? Anti-CCP? 干燥综合征（SS） Sjgrens Syndrome alpha-fodrin（ -胞衬蛋白：原发性SS 指标） 原发性干燥综合症的标志性抗体，阳性率96。 抗-胞衬蛋白抗体能早于SS-A和SS-B被检测出，即可在SS-A和SS-B抗体均 阴性的干燥综合征患者血清中检出。 与活动度有关。 故抗-胞衬蛋白抗体能有效降低ANA、抗SSA、抗SSB抗体阴性患者的漏 诊，是现有SS检验指标的必要补充。 Ro-52:(正常人阴性） 1、SLE患者Ro抗体阳性易并发肾 小球肾炎。 2、孕妇Ro抗体阳性小孩有先天 性心脏病的可能。 Progressive systemic sclerosis (SSc) limited PSS diffuse PSS Polymyositis/Dermatomyositis (PM/DM) In addition antibodies against: Ku (Overlapping with PSS), diverse aminoacyl-tRNA transferases (OJ, EJ, KJ) RA-specific autoantibodies Antibodies against citrulline containing proteins: RA Keratin (AKA) CCP (cyclic citrullinated peptide) RA33 GPI Anti-perinuclear factor (APF) 自身免疫性肝病（肝脏自身抗体谱） 疾病类型 相关自身抗体 自身免疫性肝炎（ AIH ） 型AIH ANA/ASMA 型AIH anti-LKM-1 /anti-LC-1 型AIH anti-SLA (可溶性肝抗原) 原发性胆汁性肝硬化（ PBC） AMA (M2/M4/M8/M9 ) anti-gp210， sp100 ACA 原发性硬化性胆管炎（PSC） pANCA 自身免疫性肝病的诊断和治疗完全不同病毒性肝炎 目前比较公认的部分标志抗体 标志抗体相关疾病 双链DNA抗体 Sm抗体 SS-B抗体 着丝点抗体 Scl-70抗体 PM-Scl（PM1）抗体 Jo-1抗体 高滴度RNP抗体 肾小球基底膜（GBM）抗体 肝肾微粒体抗体（LKM-1） 平滑肌抗体（SMA） 线粒体抗体2型（M2） 抗角蛋白抗体（AKA） 抗桥粒抗体 肌内膜抗体（EMA） 系统性红斑狼疮（SLE） 系统性红斑狼疮 干燥综合征（SS） 进行性系统性硬化症，局限型 进行性系统性硬化症，弥散型 多发性肌炎/皮肌炎/重叠综合症 多发性肌炎/皮肌炎 混合性结缔组织病 肺出血肾炎综合症Goodpastures 型自身免疫性肝炎 型自身免疫性肝炎 原发性胆汁性肝硬化（PBC） 类风湿关节炎 寻常天疱疮 麸质过敏性肠炎 ANA和特异性抗体检测指南 Antinuclear antibodies and their detection methods in diagnosis of connective tissue diseases: a j