蛙神经肌肉标本的制备及刺激与肌肉收缩的关系课件

蛙神经-肌肉标本的制备及刺 激与肌肉收缩的关系 李涛 Tel666049 Email: 一、实验目的 1.观察给予不同强度刺激时骨骼肌 的收缩情况，验证刺激强度与肌肉 收缩的关系。 2.观察剌激频率与收缩形式之间的 关系，了解单收缩和强直收缩。 二、实验原理 n坐骨神经是由多条神经纤维组成的神经干，神经干中 各组成纤维的兴奋性有所不同。 n刚刚引起肌肉收缩所需的刺激强度称为阈刺激强度。 n随着刺激强度的增加，坐骨神经干中发生兴奋的纤维 数目随之增多，肌肉收缩的幅度也随之增大。 n当神经干中的全部纤维都发生兴奋时，所需的最低刺 激强度称为最大刺激强度。 n阈刺激强度至最大刺激强度之间的刺激称为阈上刺激 强度。 n超过最大强度的刺激，神经所支配肌肉的收缩幅度不 再增强。 二、实验原理 n肌肉组织对于一个阈上强度的刺激发生一次迅 速的收缩反应，称为单收缩。 n两个同等强度的阈上刺激，相继作用于神经肌 肉标本，如果刺激间隔小于单收缩的时程，则 出现两个收缩反应的重叠，称为收缩的总和。 强直收缩：不完全强直收缩；完全强直收缩 三、试剂与器材三、试剂与器材 蛙、计算机、MedLab生物信号处理系统、解 剖针、手术剪、圆头手术镊、尖头手术镊、玻 璃勾针、蛙板、肌槽、连接导线、张力换能器 、刺激输出线、任氏液、棉花、棉线、烧杯。 n神经肌肉标本（自己制备） n在神经上施加电刺激 n准确记录骨骼肌张力 借助 Medlab 四、实验步骤四、实验步骤 1.材料和方法 (Materials and methods ) 实验动物（laboratory animal) 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，Zhuoshan Toad） 雄性蟾蜍皮肤光滑，前肢趾上有黑色婚垫，会鸣叫。雌性蟾蜍皮肤 粗糙，无婚垫，不会鸣叫。 婚垫 雄蟾 雄蟾 雌蟾 1.破坏脑和脊髓 ！判断脑脊髓破坏成功的标准 四肢肌肉松软， 呼吸消失。 图1-1 破坏蟾蜍脑脊髓的方法 2.剪除躯干上部及内脏 ！注意勿损伤脊柱两侧的坐骨神经。 图1-2 剪除躯干上部及内脏 3.剥皮 ！注意保护脊柱两侧的坐骨神经束，镊子不要夹 住坐骨神经。 图1-3剥掉后肢皮肤 l将标本放入盛有任氏液烧杯 中，不能用自来水清洗标本 l洗净手及用过的剪刀、镊子 等全部手术器械。 任氏液由无机盐和蒸馏水 配置而成，每升溶液含 NaCl 6.5g、KCl 0.14g、 CaCl2 0.12g,、NaHCO3 0.20g、NaH2PO4 0.01g。 任氏液的理化特性与蛙的 组织液近似。可用于蛙的 组织、器官润湿和营养。 4.分离两腿 ！注意不可剪歪，以防坐骨神经 损伤 图1-4分离坐骨神经 5.分离坐骨神经 ！玻璃针钝性分离 ！忌用金属器械触、夹神经，防止 过度牵拉神经。 ！用任氏液保持神经湿润。 5.坐骨神经-腓肠肌标本 图1-5坐骨神经腓肠肌标本 6.仪器标本连接 1. 将张力换能器固定在铁支架上，肌 肉标本的股骨固定于支架下端，腓 肠肌跟腱的结扎线连于张力换能器 的受力片上，连线应松紧适宜，并 与桌面垂直，张力换能器的输入端 接Medlab系统的1通道插座。 2. 把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放 在刺激电极上或将刺激电极与肌肉 直接接触。 完整的标本应包括四部分：一段脊柱骨 、坐骨神经、腓肠肌、一段股骨头。 肌肉收缩检测肌肉收缩检测 模式图模式图 earth 刺激电极 记录电极 神经传导动作电位检测模式图神经传导动作电位检测模式图 CH1 CH2 CH3 CH4 刺激 1 2 3 4 5 6 7 + - MedLab实验系统 标本盒 坐骨神经 张力换能器 不同刺激强度对骨骼肌收缩的影响不同刺激强度对骨骼肌收缩的影响 刺激器参数 模式自动调幅 主周期2s 波宽2ms 初幅度0V 增量0.1-0.2V 末幅1-2V 脉冲数1 延时1ms 采样参数 显示方式记录仪 采样间隔1ms X轴显示比例50：1 通道14 直流(DC)/交流（AC ） DCDC 处理名称张力刺激标记 放大倍数100-100050-100 Y轴比例4：164：1 实验结果（一）实验结果（一） 阈强度阈强度/V/V阈上刺激强度阈上刺激强度/V/V最大刺激强度最大刺激强度/V/V 不同刺激频率对骨骼肌收缩的影响不同刺激频率对骨骼肌收缩的影响 刺激器参数 模式自动调频 串长2s 波宽2ms 幅度最大刺激强度 初频1Hz 增量5Hz 末频率50Hz 串间隔5s 采样参数 显示方式记录仪 采样间隔1ms X轴显示比例50：1 通道14 直流(DC)/交流（AC ） DCDC 处理名称张力刺激标记 放大倍数100-100050-100 Y轴比例4：164：1 实验结果（二）实验结果（二） 单收缩频率