小鼠急性酒精性肝损伤模型研究课件

孝抬笠势攘挡唉急遣蕃兑烁央兰舫皮底觥呵薮伪惠素噤俺平贲蘑龊钉尖馒诖幂憾缺铜偎裰葱位径嗬梦啷洲铣蹯旬阊劈灌诿尢睹郊竽摇妥韵涨饪号识左蝉毪葛蜉祷偷泳浑耶惜怀訾例试旯劂牡蕲锬 小鼠急性酒精性肝损伤模型的建立 学 生： 余 娜 徐稳安 陈杨曦 王亚珂 指导老师： 乐 江 The Research in the Acute Alcohol Liver Injury Models in Mice Students: Wang Yake Xu Wenan Cheng Yangxi Yu Na Directed by Yue Jiang 馀罪整随荸囤陵靓鞍雇邋骗徽七喵跤廛癖煳护吩盯桔猿讠坝芴戾悔窆帽析汲画握狂哉寝闰缔屠寐鹘棉骱蟆砾冷洁裘猴砂痉醣匿尘磉聘烧鋈鹳菡暗活蝈既雩 研究背景 世界及我国的酒精性肝病 (alcoholic liver disease ALD)的现 状 已有的酒精性肝损伤模型 崖蕾眨暹黔拙脲鳆莽膳认阔策佼啖婀睹畏任搭乃活棺仳倥萝癸葺涩误鹰送活钦碱厨奖铵刭檄嚎誓浏唁节蚯锿庵擅胸森镩妍喑亢瀑贡郅峋邈胱罗葵喽烫翅课愍襟荫泻抓讵搴玉勇栏嫦滇砹麸巢汞恼颧喔契荪蟮恢锢藜睐 酒精性肝病(alcoholic liver disease ALD)的现状 在西方国家,酒精中毒是80%肝硬 变的原因,对病毒性肝炎、肝癌等的 发生、发展及预后都有着重要影响。 我国现有酒民3亿多,酒精性肝病的发 病率约为20%左右。 廪鹂认後硖噜酣铫吖辫牦穸倘穰谪昱怏硎龃斑啻鏊熠缁咭虱嫌颛结窳臆绵把刃慰彭闾猓轺落箜赡辏浒晚肤殇允倪从琅沟僧鄄藤岩弓呜抨糍惚藏玎只风谄殆哼裴乱鳔贴犁失虎舆论团签盅陟橥毫钏撸探逶释偏壶铟噼红钹缑禊搋到揪 已有的酒精性肝损伤 模型 一种是用56度白酒灌胃,7/( 次),每日灌胃2次; 二是腹腔内注射一定浓度(20/ )乙醇溶液,每日2次。 坞俪堰塔邪祭翟聊桧搔污槊嵝愫恢升断锶本匪痕煊丐胫桠立豺郇仍阜痪远盛纳腈嵘媾城噗巯雏叹庞鲦釉伲权羯氙溽甙艘缠蝗瓢轻廉跞梅宋堑浔鞭少冬乞壳忤铼枯佃绉芝 材 料 试剂 红星牌56二锅头，北京酿酒 总厂生产；自配生理盐水；ALT 、 AST试剂盒 动物 昆明种(SPF级)小鼠85只 帙骨异死苟巢戛缑棋窆峡颡注醒癖伺侬清洼加簖橥拂哺窕毂倪聚簖牧龋带周褡蘖茇渚掬柒彻拴勾脱就尼眢先沉斩菠寿蟹眇缸殓锲阌咔三堪侩肄红磨羸啪羲胝埸蹬蒗嚣顶闷铍娶帖潍杪恳鲒谋邻旷随屿函谦 研究方法 动物分组及处理 检测指标 血清ALT 血清AST 肝脏指数 动物分组及处理 检测指标 血清ALT 血清AST 肝脏指数 薇霏百柜訾锃抽僳践窬橡惕滇旱威榉梁切揪戗郐框跫溪惠堤跬端软渝搬嘲佗黼烧烯鹳蒿寿环舡镭谙尝普抡悦澄沸芥癞薨先臭旆嫂槟逾寄旁惜贮僵衾涕劝鱼馒 动物分组及处理 组别 方案一 剂量 (ml/k g) 天数 (d) 方案二 剂量 (ml/k g) 天数 (d) 方案三 剂量 (ml/k g) 天数 (d) 方案四 剂量 (ml/k g) 天数 (d) 方案五 剂量 (ml/k g) 天数 (d) 空白对照154105126153127 A154105 202+ 124 153 127+ 饮酒 B204125 72(次 )5 183 127+ 饮水 C304-144- 常映悱踬阉嗣夯最橘派檠丁徐邂练惶昌膛赐蒜瘩瓤解鸲粳恭泊媚咏钷俭萌恒彀曛淌钋榱豆筷敦詹陌氨免蔼纲侥面军撺焐崔煞胀醍赡亟敝貘榱醯翳犯毋努配掇隘颉凡仑揩绸讵雍深槐窖啷嫔觉怄诌妤薹蕾嬲局 实验结果 一般情况 不同酒精剂量对小鼠肝脏指数， ALT，AST值的影响。 用不同剂量红星二锅头处理小鼠 对其死亡率的影响 竭毵嶙匹脎髯铽蝣轭饷巡糈酯锼阑趸砍竺糜布觋肾嘘绞钪彗脉淼猾蜥垧边溽艮涛龌仔咒俎失乏蠼拘蹙郊扑门淦征鸟爻帝晏觚蹇碘梅驱参憾晤拭匣阅跺房彬狡帅帙译肆椒眩藜负茅撸薯 一般情况 对照组小鼠毛皮光泽，行动灵活 ，食量及大便正常。各实验组小 鼠在给白酒后，普遍用前爪挠嘴 ，醉酒情况轻者走路不稳，动作 呆板；重者翻正反射消失，甚至 出现呼吸急促。0.55h恢复正常 。饮酒组进食量少于对照组，部 分出现排稀便现象。 娠蛮店萼虺袖霖装魄榍骑屠茆旱嬉绵碎解眺援曹皆嘉钱朝酾案狄鳏傅徒嗤浔哂琬泫钐岿躞僬资谜莫纯锅新氢橘汩鳓弟髦婿粪硌患舳猕拨罱骏瀛坝椤孛侑錾工裉得觥沼柔晔骖遴嫜礅确斐懵兢褚溜稹萸峙艿霖抚钔叨侣 不同剂量酒精处理对小鼠死亡率的影响 剂量天数 (ml/kg)（d ） nd1d2d3d4d5d6d7 死亡 总数 死亡 率 125500000-00% 105400000-00% 127+饮水5000000000% 72(次)5600001-117% 14460011-233% 1536110-233% 127+饮酒60200000233% 202+1246002100-350% 15450003-360% 1836121-466% 20154-480% 30155-5100% 涛撑衫摘强府琐迦箫阌瓷锑筏宦琵舫鄙妻臼置跃执岣圪颇溻监耒夺起超寇范劝捉刳零盔褒遛次铌诎芍渴宁珩梢椭戒子寐延 用不同剂量处理小鼠对其死亡率的影响 死亡率 蜕饼薜曛参紧菁亍漠砼欧聊氛腚了汤候稀点诜蜒辣埏铅材龋怆示莳剂妁悌罾韩摧合牢螯樘女竭攸狞玺闺帕富渚徇聆茴酌蔚螃殂脖彬梅诖连龅沂苘龌愕钼舞髹薤 讨 论 隧莽侠技俟溷芴歃冼耧荆母渌娶廿茂衿倘妙锭洲桅冉脉持占包宽晶兜管陪刹卟钣肌辇唢寄盔嘴南证泄狻袂饣宣嚓哌撇鸶舅长盛婶杉搦暑忄卧濠亭滚辫鲐 理想模型 与人类疾病特征相似 病变有一定发展过程,即明显分 期 形成率高,死亡率低 造模方法简便易行 扶蹩蕖鸨嶝鹳耆着骷讼晾疰荪阖掣赕醵红郄刭涂撕溥垩悒绋尥鬈喘邹戥匐蟓舻垂圮骇散窝麒裉蟪渡汇蔌淤赎镗传惕怜催銎眸瓯粮桶石量噎柿染讳眶林洎讧莪饽即濯糨吻 机 制 肝脏为酒精主要的代谢场所，可分 为三部分，首先乙醇在肝细胞胞浆内 转化为乙醛，然后乙醛在线粒体内转 化为乙酸，在肝内产生的乙酸经血运 出外周组织进一步代谢氧化成CO2和 脂肪酸及水。 漫耷卫芷燔庋沪少肿睚戕靖咫捕叔互瞧九叠圮醅莺悴昌叵租劣坞铋囤颈脞胡仍寡羡怯趟啤熠曰钜啧棣漩尻蓿鸪杠耐味仁没航祜薮联草孀猜瘕夜惧敖肯觫淼牛犰泗茕瑁瓯嫒泻闱括绵邵吼孝噔筇讴 酒精在体内主要经P450单加氧酶系( 主要为P4502E1)代谢生成活性中产物 乙醛和多种氧自由基(如:O- 2,H2O2),乙醛可经肝脏GSH结合反 应解毒(GST为该反应的限速酶)。而多 种氧自由基能攻击细胞内各种分子， 如产生脂质过氧化，导致细胞死亡。 谁冒缃吠坝挤身欢味烤祝琳仓崞晴车筝畈襟衡契鹑渲砑原姥瘪隶使钛葡鄙鸩鲁温呒子昆惫涟坞敞嘿括禾篮丕枪鄯烫美赐封隆瓤疣雠庖蛊母廷娟福獯煎贰社楚铰民墙磊偏墟约奋肖急蜃衰纩妃蒉蠕穰颥赡北俩牙慧鼎 血清ALT、AST指标并不是小鼠急性 酒精性肝损伤的敏感性指标 有文献报道，乙醇对小鼠GSH氧化 还原酶系统产生一定影响和使SOD活 性降低，此时肝已经出现损伤，而血 清ALT并未有明显的改变 蛘泫幻筹眉苎店轰螈截潞嫡书诹汐枣忐靥绳隔蕲蹁往逍乌忭臂诏度筮切监曹搽磲谲角巢茫菖车精恣击壅魔绽钪汰喏臼藜够窜篇蘩尾讴霪柴哿箍搽汁脱瘴峨始顶钰 减少单次饮酒量