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实验实验 四 荧荧光法测测定原卟卟啉（FEP） 的浓浓度 危丽俊 卫生化学教研室 一、目的： 一、掌握荧荧光测测量的基本原理，学会 使用930荧荧光计计。 二、了解原卟卟啉的测测定方法。 二、原理： 1 激发发光谱谱与发发射光谱谱 萘萘的激发发和荧荧光光谱谱 2、荧荧光光度计计 3、930荧荧光计计 4、定量方法 If = 2.3 I0 l c = Kc 三、实验实验 器材与试剂试剂 1、930荧荧光计计 2、玻璃器材：比色管10ml，六支 移液管10ml，5ml各一只 4、原卟卟啉标标准溶液0.1g/ml，临临用时时新鲜鲜配置 ，注意蔽光 5、依次加0.5NHCl 四、实验实验 步骤骤 n 1、取五支比色管依次加原卟卟啉标标准溶液：0、0.5 、1.0、1.5、2.0ml第六支加未知液1.2ml n 2、依次加0.5NHCl 4、3.6、3.0、2.5、2.0、2.8ml 测测定方法：将5号标标准溶液倒入比色皿中确定其荧荧光强 度大于80（一般为为95），04号标标准溶液依次倒入 比色皿中（浓浓度由低到高），再将6号待测测液倒入比色 皿中分别测别测 出他们们的相对荧对荧 光强度。 测测定条件： 激发滤发滤 光片： 400nm（通带带型） 荧荧光滤滤光片： 550nm （截至型） 灵敏度：23档 室温、室内照明：暗 五、注意事项项 1、原卟卟啉对对光热热不稳稳定，易产产生分解， 应应注意避光并冷藏。 2、荧荧光分析用的比色皿四面透明，用时时 应应拿棱角处处。 3、满满度电电位器顺时针顺时针 方向开足后，即使 指针调针调 不到“100”，也不能强行旋转转，此 电电位器容易损损坏。 六、思考题题 1、能否用930荧荧光计测计测 原卟卟啉的激发发光 谱谱和荧荧光光谱谱？为为什么？ 2、930荧荧光计计上的
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